Исследование персонала на носительство золотистого стафилококка

Для выявления носителей персонал хирургических отделений, отделений реанимации, интенсивной терапии обследуют один раз в квартал. Исследованию подвергают слизь из передних отделов носа. Отбор проводят сухим или смоченным в 0,9% растворе NaCl стерильным тампоном из обеих ноздрей. Исследование слизи из зева проводят только по показаниям, прежде всего при наличии воспалительных процессов в нём. Сбор материала из зева проводят с поверхности миндалин натощак или не ранее, чем через 2–3 ч после еды. Посев проводят на ЖСА (МСА) непосредственно тампоном, которым забирали материал (многократно поворачивая его). Либо тампон помещают в 5 мл стерильного 0,9% раствора NaCl, 10 мин встряхивают, жидкость перемешивают пипеткой и 0,1 мл наносят на среду, растирая шпателем. Для определения массивности обсеменения верхних дыхательных путей стафилококком подсчитывают число выросших на чашках однотипных, однородных колоний идентичных по морфологии и пигменту. Затем для каждого типа подсчитывают КОЕ, выросших при посеве с тампона.

Санитарно-микробиологическое исследование аптек

Санитарно-бактериологический контроль аптек осуществляют не реже двух раз в квартал. Объектами исследования являются.

• Вода дистиллированная для приготовления ЛС кроме инъекционных растворов и глазных капель.

• Вода дистиллированная для приготовления инъекционных растворов и глазных капель — инъекционные растворы до стерилизации; глазные капли, приготовленные в асептических условиях на стерильных основах (то есть изготовляемые в самих аптеках).

• Сухие ЛС, используемые для приготовления инъекционных растворов.

• Аптечная посуда, пробки, прокладки, прочие вспомогательные материалы.

• Инвентарь, оборудование, руки и санитарная одежда персонала.

• Воздух аптечных помещений.

Объекты санитарно-микробиологического исследования

Вода дистиллированная для приготовления ЛС кроме инъекционных растворов и глазных капель. Пробы отбирают из бюретки, заполненной исследуемой водой; выводной конец которой предварительно обжигают ватно-спиртовым факелом. Пробы забирают в стерильные бутылки в объёме 300 мл. Если результаты оказываются неудовлетворительными, то пробы отбирают из приёмника дистиллятора. Определяют содержание МАФАМ, плеснев?х и дрожжевых грибов. Результаты оценивают по общему количеству микроорганизмов путём суммирования числа выросших колоний бактерий и грибов. Предельно допустимо содержание 10–15 КОЕ в 1 см³. Наличие бактерий группы БГКП в дистиллированной воде не допускается.

Вода дистиллированная для приготовления инъекционных растворов и глазных капель. Отбор проб проводят в стерильные флаконы в объёме 15–20 мл непосредственно из тех ёмкостей, в которых осуществляют стерилизацию.

• Инъекционные растворы до стерилизации отбирают во время их приготовления, но не позднее 1,5 ч и доставляют в тех флаконах, в которых их будут стерилизовать.

• Инъекционные растворы, глазные капли после стерилизации и приготовленные асептическим способом доставляют в аптечной упаковке.

• Глазные капли из торгового зала аптек доставляют в тех упаковках, в которых их отпускают (3–4 наименования как со стола ассистента, так и с прилавка).

Исследование сухих ЛС проводят по показаниям, например в случае неоднократных неудовлетворительных бактериологических анализов. Отбор проб проводят стерильными ложками в количестве 30–50 г, затем растворяют стерильной дистиллированной водой до концентрации, используемой в соответствующем растворе инъекций и глазных капель.

Исследование аптечного оборудования. Посуду, пробки, прокладки, воронки, цилиндры исследуют в момент подготовки к разливу инъекционных растворов и глазных капель. Посуду отбирают в укупоренном виде, но без содержимого в количестве трёх штук одинаковой ёмкости; пробки и уплотнители по пять штук, помещая их в стерильную закупоривающуюся посуду. Исследование проводят путём споласкивания оборудования 10 мл стерильной водопроводной воды. В смывной жидкости определяют МАФАМ и БГКП. Бактерий группы МАФАМ не должно быть более 150 КОЕ в смывах с трёх флаконов, пяти пробок и пяти прокладок. Присутствие БГКП не допускается.

Исследование воздуха. Пробы отбирают в асептическом блоке, стерилизационной комнате, в ассистентской, фасовочной, материальной, моечной, в зале обслуживания. Отбор проводят аспирационным методом в чистом, подготовленном к работе помещении (не ранее чем через 30 мин после влажной уборки помещения), при закрытых дверях и форточках. Уровень отбора проб — высота рабочего стола, скорость протягивания воздуха — 25 л/мин. ОМЧ определяют в 100 л воздуха, золотистый стафилококк — в 250 л, плесени и дрожжи — в 250 л.

Прочие объекты. Санитарно-микробиологическим исследованиям также подлежит тара для хранения аптечного оборудования, ступки, весы, руки персонала, полотенца, спецодежда и рабочие места. Проводят исследования на наличие БГКП, синегнойной палочки, протеев и золотистого стафилококка (по показаниям). Пробы берут методом смыва с помощью ватных тампонов, помещённых в пробирки с 2 мл 0,85% раствора NaCl или 0,1% пептонной воды. Проводят посев на жидкие и плотные питательные среды. В исследуемых образцах наличие бактерий группы БГКП, синегнойной палочки, протеев и золотистого стафилококка не допускается.

Микрофлора лекарственных средств

Источники загрязнения лекарственных средств

Современный арсенал ЛС включает большой ассортимент препаратов. При этом технология их производства далеко не всегда гарантирует полную микробную чистоту. Инъекционные и офтальмологические препараты должны быть абсолютно стерильными, что учитывают при их изготовлении. Для остальных препаратов микробное загрязнение также крайне нежелательно, но возможно, так как регламент их изготовления не требует поддержания строгой стерильности. Основные источники загрязнения ЛС: сырьё (чаще растительного и животного происхождения), технологическая вода, производственное оборудование, воздух в производственных помещениях, рабочий персонал, контейнеры и упаковка готовой продукции.

• Микробная контаминация лекарственного препарата может вызвать заболевание у принимающего его человека. В клинической практике известны случаи заболевания, вызванные энтеробактериями, синегнойной палочкой, золотистым стафилококком, споровыми анаэробами, плеснев?ми грибами и др.

• Микробная контаминация ЛС нарушает его стабильность.

В жидких и мягких лекарственных формах условия для роста и размножения микроорганизмов более подходящие. Это связано с высоким содержанием воды, растительных масел и отсутствием консервантов в составе многих мазей. Более того, содержание в составе мазей антимикробных веществ не всегда гарантирует их микробную чистоту. Размножение микробов изменяет консистенцию мазевых основ, вызывает их прогоркание, появление неприятного запаха и т.д. В жидких лекарственных формах метаболиты микроорганизмов могут изменить его химический состав, а также привести к образованию токсичных продуктов. В твёрдых лекарственных формах риск микробной порчи минимален, так как отсутствуют условия для размножения микробов. Высокая загрязнённость сырья, его неправильное хранение может приводить к изменению свойств.

Микрофлора лекарственного растительного сырья

Микробы, обитающие на лекарственном растительном сырье могут включать представителей нормальной эпифитной и фитопатогенной микрофлоры. Микробная обсеменённость растительного лекарственного сырья зависит от исходной загрязненности, но может повышаться на этапах первичной обработки, измельчения, приведения в стандартное состояние. Порча сырья происходит в основном при повышенной влажности, способствующей размножению гнилостных микроорганизмов.

Эпифитная микрофлора [от греч. epi, на + phyton, растение] представлена микроорганизмами, обитающими на поверхности растений. Микроорганизмы - эпифиты не причиняют вреда растению, а в некоторых случаях составляют конкуренцию фитопатогенным микробам. В качестве источников питания эпифитная микрофлора утилизирует выделения растений и различные их поверхностные загрязнения. Основной представитель эпифитной микрофлоры — Erwinia herbicola —подвижная грамотрицательная палочка, образующая золотисто-жёлтые колонии на МПА. Реже на поверхности растений выделяют Pseudomonas fluorescens — подвижную грамотрицательную палочку. Бактерии образуют зелёный пигмент пиовердин, вызывающий флуоресценцию колоний при коротковолновом УФ-облучении. Пиовердин обладает свойством бактериоцина, действующего на грамположительные и грамотрицательные бактерии, а также проявляет умеренную фунгицидную активность. Иногда на поверхности растений выделяют Bacillus mesenthericus — аэробные подвижные спорообразующие грамположительные палочки. Как было указано выше (см. главу 6), наиболее обильно микроорганизмы представлены в почве, особенно в прикорневой зоне. В её состав входят различные микобактерии, псевдомонады, спорообразующие, азотфиксирующие и нитрифицирующие бактерии, актиномицеты и грибы. Вокруг корней растений находится зона интенсивного роста и повышенной активности микробов. Поверхность корневой системы колонизируют преимущественно псевдомонады и грибы. Последние вступают в симбиотические отношения с растениями и образуют микоризу (грибокорень), стимулирующую рост обоих партнёров.

Фитопатогенная микрофлора. Способностью вызывать болезни растений обладают различные вирусы, бактерии и грибы. Поражения, вызываемые фитопатогенными бактериями называют бактериозами. Фитопатогенные грибы вызывают микофитозы. По локализации процесса выделяют общие и местные поражения. Первые вызывают гибель всего растения или отдельных его частей, вторые — отдельных участков растения. По механизму поражения бактериозы разделяют на паренхиматозные заболевания, сосудистые поражения и опухоли.

Паренхиматозные заболевания. Развиваются при попадании бактерий в ткани растений через различные анатомические отверстия (устьица, чечевички, нектарники) и повреждения покровных тканей. Возбудители выделяют ферменты и токсины, облегчающие их распространение по межклеточным пространствам. Проникновение бактерий вглубь вызывает массовую гибель клеток. К ним относят: гнили (основные возбудители — бактерии родов Pseudomonas и Erwinia), ожоги (основные возбудители — виды Erwiniа и Corynebacterium) и пятнистости (основные возбудители — виды Pseudomonas и Xanthomonas).

Сосудистые поражения. Развиваются при распространении бактерий по сосудам растений. Основные возбудители — виды Corynebacterium (C. fascians, C. insidiosum, C. michiganense). Бактерии размножаются в сосудах, вызывая их закупорку за счёт повреждения стенок, что приводит к увяданию растения.

Опухоли. Основные возбудители — бактерии рода Agrobacterium (наиболее часто A. tumoralis). Агробактерии содержат онкогенные плазмиды. После их переноса в растительных клетках развиваются специфические опухоли — корончатые галлы.

Возбудители микофитозов также вызывают паренхиматозные и сосудистые поражения растений. Использование сырья, обсеменённого грибами, в качестве пищевых продуктов может вызвать тяжёлые заболевания — микотоксикозы (см. главу 36).

Фитопатогенные вирусы вызывают мозаичные болезни, желтуху, карликовость. Их характерная особенность — появление слабоокрашеных пятен или целых участков, а также задержка роста растений. Помимо вирусов, к фитопатогенам относят и вироиды (см. главу 2).