Спектрометрический анализ полисахарида

На спектрофотометре

Включают прибор и выдерживают его 3 минуты для выравнивания силы тока до 300 микроампер, затем включают излучающую водородную лампу и дожидаются загорания (со щелчком). Затем открывают крышку кюветодержателя (объектив фотоэлемента закрыт), поворачивают рукоятку видов работ в положение “on” – “включено” (положение “off” – “выключено”) и выдерживают 10 минут. Рукояткой регулировки длины волны “wavelength” – устанавливают соответствующий образцу узкий интервал со значением “λ” = 280 нм. Выдвижными ручками регулируют установку системы из двух фотоэлементов (одного для УФ – диапазона, другого для видимого ИК диапазона). Рукояткой “Durk-current” стабилизируют ультрафиолетовое излучение выбранного диапазона (“темновой” ток), фиксируя стрелку нуль прибора в среднем положении. Затем измеряют оптическую плотность “D” раствора. Кювету с растворителем помещают в кюветодержатель, закрывают его крышку (объектив фотоэлемента открыт дляизмерения). Рукоятку видов работ переключают из положения “on” в положение “ x I”, а рукоятку отсчета “reading” в положение ноль. Рукояткой “щель” – “slit” (узкая полоса диапазона) вначале грубо переводят стрелку нуль – прибора в положение 0, а рукояткой чувствительности производят точную доводку стрелки шкалы до 0, снимая после этого со шкалы отсчета “reading” значение оптической плотности “D” образца. Затем последовательно анализируют фракции элюента из колонки и строят график изменения оптической плотности “D” (полисахарид) в ходе хроматографирования, откладывая на оси абсцисс номера фракции, а на оси ординат – оптическую плотность “D” (рис. 18). Из графика следует, что вещество, поглощающее ультрафиолетовое излучение с длиной волны “λ” = 280 нм, содержится во фракциях с № 6 по № 10.

Кондуктометрический анализ нитрата кобальта на кондуктометре ОК – 102/1.

Из-за чувствительности прибора к присутствию сильных электролитов электрод, состоящий из двух проводников – электродов, должен быть очищен от следов электролитов промыванием в дистиллированной воде. Затем измеряют поочередно электропроводность хроматографических фракций с разным содержанием нитрата кобальта и строят график (рис. 18).

Рис. 18. Совмещенные графики оптической плотности и электропроводности (пунктиром) серии хроматографических фракций

 

Из графика следует, что фракции № 1-4 содержат чистый растворитель, фракции № 5-8 содержат лишь полисахарид, фракции № 10-12 содержат лишь Co(NO₃)₂, фракция № 9 содержит смесь обеих веществ (неполнота разделения).

Вопросы для самопроверки:

1. На чем основана классификация оптических методов анализа. Оптическая схема фотоэлектроколориметра.

2. Что такое оптическая плотность раствора, от каких факторов она зависит.

3. Привести объединенный закон Бугера-Ламберта-Бера. Чем объяснить отклонения от этого закона.

4. Эмиссионные методы анализа. Классификация.

5. Сущность спектрального метода анализа.

6. Пламенно-фотометрический метод анализа. Почему он может быть использован только для анализа щелочных и щелочно-земельных элементов.

7. Сущность люминесцентного метода анализа. Классификация.

9. В чем заключается «Стоксово смещение».

10. В каких пределах находится линейный диапазон концентраций при флуориметрическом анализе.

11. Чем вызвано концентрационное гашение флуоресценции.

12. Люминесцентные свойства витаминов группы В. Каков диапазон длин волн флуоресценции. Оптическая схема флуориметра.

13. На чем основан рефрактометрический метод анализа.

14. Объяснить природу молекулярной и атомной рефракций. Правило аддитивности.

15. Как рассчитать величину молекулярной рефракции.

16. Привести оптическую схему рефрактометра.

17. Классификация хроматографических методов анализа.

18. Блок-схема хроматографа.

19. На чем основан количественный хроматографический анализ.

20. Какой критерий лежит в основе идентификации веществ в газовой (ГХ), газо-жидкостной хроматографии (ГЖХ).

21. Типы сорбентов в газовой хроматографии.

Детекторы в ГХ и ГЖХ. Принцип их действия. Область применения.

 

ЛИТЕРАТУРА

а) основная литература

1. Коренман Я.И. Практикум по аналитической химии. Анализ пищевых продуктов в 4-х книгах. М.: Колос, 2005, 237с.

2. Цитович И.Е. Курс аналитической химии. - М.: Высшая школа, 2007, 495 с.

б) дополнительная литература

1. Основы аналитической химии. Практическое руководство (под ред. Ю.А. Золотова). М.: Высшая школа, 2004.

2. Коренман Я.И., Суханов П.Т. Задачник по аналитической химии. Воронеж: ВГТА, 2004, 339 с.

3. Васильев В.П. Аналитическая химия. Физико-химические методы анализа. - М.: высшая школа, 1989, Т. 2, 384 с.

4. Логинов Н.Я., Воскресенский А.Г., Солодкин И.С. Аналитическая химия. - М.: Просвещение, 1979,479 с.

5. Ляликов Ю.С. Физико-химические методы. -М.: Химия, 1973, 536 с.

6. Крешков А.П. Основы аналитической химии. - М.: Химия, 1970, 471 с.

7. Бончев П.Р. Введение в аналитическую химию. - Л.: Химия, 1978,496 с.

8. Ляликов Ю.С., Булатов М.И. и др. Сборник задач по физико-химическим методам анализа. - М.: Химия, 1972, 220 с.

9. Пилипенко А.Т. Аналитическая химия. М.: - «Химия», 1990.

10. Фритц Дж., Шенк Г. Количественный анализ. М., «Химия», 1979.

11. Скуг Д., Уэст Д. Оновы аналитической химии. М., «Химия», 1979.

12. Лайтинен Г.А., Харрис В.Е. Химический анализ. М., «Химия», 1979.

13. Шеллард Э. Количественная хроматография на бумаге и в тонком слое. М.: «Мир», 1971.

14. Гольберт К.А., Вигдергауз М.С. Введение в газовую хроматографию. М, «Химия», 1990.

15. Детерман. Гель-хроматография.М.: «Мир», 1970.

16. Логинов Н.Я., Воскресенский А.Г., Солодкин И.С. Аналитическая химия. М., «Просвещение», 1974.

17. Алексеев В.Н. Курс качественного химического полумикроанализа. М., «Химия», 1973.

18. Алексеев В.Н. Количественный анализ. М., «Химия», 1972.

19. Крешков А.П. Основы аналитической химии, Т.1-3, «Химия», 1976.

20. Мусакин А.П. и др. Задачник по количественному анализу. М., «Химия», 1973.

21. Мурашова В.И., Тананаева А.Н., Ховякова Р.Ф. Качественный химический дробный анализ. М., «Химия», 1976.

22. Лурье Ю.Ю. Справочник по аналитической химии М., «Химия»,1979.

 

Касьяненко Галина Рудольфовна

Кирничная Влада Константиновна

 

 

3. Методические указания по организации самостоятельной работы студентов

 

Контрольная работа по дисциплине:

«Аналитическая химия и физико-химические методы анализа»