Агломерация лейкоцитов крови

Величины агломерации лейкоцитов крови в норме — не выше 30 % от контроля; реакция отрицательная — менее 30 %, слабоположительная — 30—40 %, положительная — 40—50 %, резко положительная — более 50 %.

Определение агломерации лейкоцитов крови — метод выявления сенсибилизации орга­низма к аллергенам и лекарственным препаратам. Он основан на эффекте усиления склеива­ния лейкоцитов при добавлении к крови специфического аллергена, что является одной из первых фаз специфической аллергической реакции клеток крови. При отсутствии сенсиби­лизации склеивания клеток не происходит. При проведении данного теста необходимо учи­тывать требования к аллергенам, используемым в реакции. Они должны быть водораствори­мыми, не оказывать цитотоксического и раздражающего действия, монокомпонентными, химически чистыми. Для исключения ложноположительных результатов исследование на­значают в период ремиссии спустя 7 дней после клинических проявлений.

Тест используют для диагностики аллергии при следующих патологических состояниях:

• анафилактический шок;

• сывороточная болезнь;

• лекарственная аллергия;

• крапивница, отек Квинке, псевдоаллергия.

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ

ОРГАНИЗМА

Неспецифические факторы резистентности организма принимают непосредственное участие вначале, в период развития и в конечной фазе иммунного ответа. В иммунный ответ организма сначала включаются неспецифические, а затем специфические механизмы реак­тивности при инфекции, вакцинации и воспалительном процессе. Реактивность данной сис­темы не дифференцирована по отношению к конкретному антигену и направлена против любых инфекционных и неинфекционных агентов. В системе неспецифической резистент­ности организма можно выделить процессы, которые ее регулируют:

• фагоцитоз;

• лизоцим;

• система комплемента;

• цитокины.

Определение состояния неспецифической резистентности организма имеет важное значе­ние в комплексной оценке иммунного статуса. От состояния неспецифических защитно-при­способительных механизмов зависит исход начальной стадии инфекционно-воспалительного процесса. Резкое и длительное их угнетение — неблагоприятный прогностический признак.

Фагоцитоз

Фагоцитоз — поглощение клеткой крупных частиц, видимых в микроскоп (например, микроорганизмов, крупных вирусов, поврежденных тел клеток и т.д.). Процесс фагоцитоза можно подразделить на две фазы. В первой фазе частицы связываются на поверхности мем­браны. Во второй фазе происходят собственно поглощение частицы и ее дальнейшее разру­шение. Различают две основные группы клеток фагоцитов — мононуклеарные и полинукле-арные. Полинуклеарные нейтрофилы составляют первую линию защиты от проникновения в организм разнообразных бактерий, грибов и простейших. Они уничтожают поврежденные и погибшие клетки, участвуют в процессе удаления старых эритроцитов и очистки раневой по­верхности. Мононуклеарные фагоциты участвуют как в разрушении, так и в инициации и стимуляции фибропластических процессов. Они способствуют синтезу биологически актив­ных веществ и формированию иммунного ответа (путем модификации антигенов и представ­ления их лимфоцитам). Таким образом, клетки мононуклеарно-фагоцитарной системы игра­ют важную роль в инициации иммунного ответа посредством захвата антигена, представле­ния его Т-лимфоцитам и секреции интерлейкина-1 (основного активатора Т-лимфоцитов).

Изучение показателей фагоцитоза имеет значение в комплексном анализе и диагности­ке иммунодефицитных состояний: часто рецидивирующих гнойно-воспалительных процес­сах, длительно не заживающих ран, склонности к послеоперационным осложнениям. Иссле­дование системы фагоцитоза помогает в диагностике вторичных иммунодефицитных состоя­ний, вызванных лекарственной терапией. В связи с тем что фагоциты участвуют в элимина­ции иммунных комплексов и активность фагоцитоза тесно связана с активностью компо­нентов комплемента, а именно СЗ, концентрацией IgG-антител, наличием других опсониру-ющих факторов, исследование активности фагоцитоза играет важную роль в диагностике, оценке активности и эффективности терапии при ревматических заболеваниях, коллагено-зах. Наиболее информативными для оценки активности фагоцитоза считают фагоцитарное число, количество активных фагоцитов и индекс завершенности фагоцитоза. О бактерицид­ной активности нейтрофилов судят по тесту восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) или лизосомально-катионному тесту (ЛКТ).

Фагоцитарная активность нейтрофилов

Параметры, характеризующие состояние фагоцитоза.

Фагоцитарное число: норма — 5—10 микробных частиц. Фагоцитарное число — среднее количество микробов, поглощенных одним нейтрофилом крови. Характеризует поглотитель­ную способность нейтрофилов.

Фагоцитарная емкость крови (ФЕК): норма — 12,5—25-Ю⁹ на 1 л крови. ФЕК — коли­чество микроорганизмов, которое могут поглотить нейтрофилы 1 л крови.

Фагоцитарный показатель: норма — 65—95 %. Фагоцитарный показатель — процент нейтрофилов, участвующих в фагоцитозе.

Количество активных фагоцитов (КАФ): норма — 1,6—5,0-Ю⁹ в 1 л крови. КАФ — абсо­лютное число фагоцитирующих нейтрофилов в 1 л крови.

Индекс завершенности фагоцитоза: норма > 1,0. Индекс завершенности фагоцитоза — переваривающая способность фагоцитов.

Фагоцитарная активность нейтрофилов обычно повышается в начале развития воспали­тельного процесса. Ее снижение ведет к хронизации воспалительного процесса и поддержа­нию аутоиммунного процесса, так как при этом нарушается функция разрушения и выведе­ния иммунных комплексов из организма.

Заболевания и состояния, при которых изменяется фагоцитарная активность нейтрофи­лов, представлены в табл. 7.27.

Таблица 7.27. Заболевания и состояния, при которых изменяется фагоцитарная

Активность нейтрофилов

 

Повышение показателя

Снижение показателя

Антигенное раздражение вследствие бактери­ального воспаления (продромальный пери­од, период острого проявления инфекции) при нормальной активности фагоцитоза Лейкоцитоз Аллергия Аутоаллергические заболевания Усиление антителозависимой цитотоксично-сти и реакции на донорский трансплантат

Хронические воспалительные заболевания бактериаль­ной и вирусной природы Врожденные дефекты фагоцитарной системы, синдром Чедиака—Хигаси, болезнь Дауна, СКВ, коллагенозы, болезни иммунных комплексов, недостаток иммуногло­булинов, комплемента Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами, облу­чение ионизирующей радиацией Вторичные и первичные иммунодефициты Новообразования Тяжелые ожоги, травмы, стресс Кишечные и почечные синдромы потери белка Недостаточность питания Недостаточность фагоцитоза Хронизация воспалительного процесса

Спонтанный тест с НСТ в крови

Величина спонтанного теста с НСТ в крови в норме: у взрослых число НС 1 -положиie.ii.- ных нейтрофилов — до 10 %.

Спонтанный тест с НСТ (нитросиний тетразолий) позволяет оценить степень антиген­ной раздраженности неактивированных in vitro гранулоцитов крови. Он характеризует сте­пень активации внутриклеточных антибактериальных систем. Принцип метода основан на восстановлении поглощенного фагоцитом растворимого красителя нитросинего тетразолия в нерастворимый диформазан под влиянием супероксиданиона, образующегося в НАДФ-Н-оксидазной реакции, инициирующей процесс стимуляции фагоцита. Показатели НСТ-теста повышаются в начальном периоде острых бактериальных инфекций, тогда как при подо-стром и хроническом течении инфекционного процесса они снижаются. Санация организма от возбудителя сопровождается нормализацией показателя. Резкое снижение свидетельствует о декомпенсации противоинфекционной защиты и является прогностически неблагоприят­ным признаком.

Снижение спонтанного теста с НСТ характерно для хронизации воспалительного про­цесса, врожденных дефектов фагоцитарной системы, вторичных и первичных иммунодефи-цитов, СПИДа, злокачественных новообразований, тяжелых ожогов, травм, стрессов, недо­статочности питания, лечения цитостатиками и иммунодепрессантами, облучения ионизи­рующей радиацией.

Повышение спонтанного теста с НСТ отмечается при антигенном раздражении вследствие бактериального воспаления (продромальный период, период острого проявления инфекции при нормальной активности фагоцитоза), хроническом гранулематозе, лейкоцитозе, усилении антителозависимой цитотоксичности фагоцитов, аутоаллергических заболеваниях, аллергии.

Активированный тест с НСТ в крови

Величина активированного теста с НСТ в крови в норме: у взрослых число НСТ-положи-тельных нейтрофилов — 40—80 %.

Активированный тест с нитросиним тетразолием позволяет оценить функциональный резерв кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов. Тест используют для выявления резервных возможностей внутриклеточных систем фагоцитов. При сохраненной внутриклеточной антибактериальной активности в фагоцитах резко возрастает число форма-занположительных нейтрофилов после их стимуляции латексом. Снижение показателей ак­тивированного НСТ-теста нейтрофилов ниже 40 % и моноцитов ниже 87 % свидетельствует о недостаточности фагоцитоза.

Лизосомально-катионный тест (ЛКТ) в крови