Диагностический титр антител к Chlamidia trachomatis в крови: для IgM — 1:8 и выше, для IgG — 1:64 и выше.

Во время острой хламидийной инфекции и вскоре после нее наблюдается повышение титра антител IgA, IgM и IgG к Chlamidia trachomatis в крови. Инфицированный Chlamidia trachomatis организм продуцирует антитела, которые имеют слабое защитное действие: обычно возбудители персистируют даже при наличии высоких титров антител. Раннее интенсивное лечение может угнетать синтез антител. Вследствие относительно большой «антигенной массы» хламидий при инфекциях половых органов сывороточные антитела IgG обнаруживают довольно часто и в высоких титрах. Так, у детей с хламидийной пневмонией они могут быть очень высокими — 1:2000—1:4000. Антитела класса IgM выявляют в острый период инфекции, наличие антител IgM свидетельствует об активности хламидиоза. Немного позже появляются антитела класса IgG. Выявление антител класса IgA свидетельствует о выраженном аутоаллер-гическом процессе у больного и наиболее часто определяется у больных с синдромом Рейтера. Наличие антител класса IgA говорит о тяжелом течении заболевания у пациента. Определение уровня антител к хламидиям в крови необходимо проводить в динамике, оценка результатов исследований, основанная на однократном исследовании, ненадежна.

Новорожденных и их матерей обследуют в 1—3-й сутки после родов и в случае отрица­тельного результата при наличии клинической картины заболевания — повторно на 5—7-е и 10—14-е сутки. Отсутствие у новорожденных антихлам ид ийных антител не означает отсутст­вие хламидийной инфекции.

Определение антител к Chlamidia trachomatis в крови является вспомогательным тестом диагностики хламидиоза, так как из-за низкой иммуногенности у 50 % больных хламидио-зом антитела не обнаруживают.

Определение антител IgA, IgM, IgG к Chlamidia trachomatis в крови необходимо для диа­гностики хламидиозной инфекции при:

— уретритах, простатитах, цервицитах, аднекситах;

— пневмонии, воспалительных заболеваниях легких;

— болезни Рейтера, синдроме Бехчета, инфекционных артропатиях.

Экспресс-диагностика урогенитального хламидиоза

Chlamidia trachomatis в материале из мочеполовых органов в норме отсутствуют.

Метод основан на выявлении антигенов Chlamidia trachomatis в соскобах из уретры, цервикального канала и конъюнктивы методом иммуноферментного анализа с визуальной оценкой результата. Данный метод основан на наличии у хламидий родоспецифического ли-пополисахаридного антигена. Этот метод позволяет проводить быстрый скрининг возбудите­ля, однако окончательный диагноз устанавливают при помощи метода флюоресцирующих антител или ПЦР. Результаты исследования выражают в виде положительного или отрица­тельного ответа. Чтобы получить удовлетворительные результаты исследования, необходимо соблюдать определенные правила: материал (соскоб) должен быть правильно взят и своевре­менно доставлен в лабораторию (в течение 2 ч).

Экспресс-диагностика урогенитального хламидиоза необходима для диагностики хлами-диозной инфекции при:

— уретритах,

— простатитах,

— цервицитах,

— аднекситах.

Определение Chlamidia trachomatis в материале методом прямой

иммунофлюоресценции

Chlamidia trachomatis в материале из мочеполовых органов в норме отсутствуют.

Принцип метода заключается в использовании моноклональных антител, меченных флюоресцирующим изотиоцианатом против главного белка внешней мембраны хламидий, имеющегося во всех сероварах Chlamidia trachomatis, а также у элементарных и ретикуляр­ных телец. Чувствительность данного метода достигает 95 %, а применение моноклональных антител обусловливает высокую специфичность.

Количественное определение антигена Chlamidia trachomatis в материале иммуноферментным методом

Антиген Chlamidia trachomatis в материале из мочеполовых органов в норме отсутствует.

Данный метод дополняет спектр других методов диагностики хламидиоза и позволяет диагностировать до 15 серотипов хламидий. Метод ИФА позволяет количественно опреде­лить антиген хламидий в эндоцервикальном, уретральном отделяемом, а также в моче, в глазном отделяемом больных с целью диагностики заболевания. Специфичность данного ме­тода составляет 97 %, чувствительность — 92 %, сравнима с методом полимеразной цепной реакции (99,8 и 94,6 % соответственно). Вместе с тем этот метод менее трудоемок. Он осно­ван на прямом определении образовавшегося иммунокомплекса антитело—липосахаридный антиген хламидий. В качестве антител используют кроличьи антихламидийные антитела.

Микоплазменная инфекция

В настоящее время описано несколько штаммов микоплазм. Микоплазмы — группа весьма разнообразных и характерных по морфологии бактерий размером 150—200 нм. Они не имеют плотной клеточной стенки и покрыты трехслойной цитоплазматической мембра­ной. Микоплазмы грамотрицательны и обладают крайне низкой чувствительностью к боль­шинству красителей. Микоплазмы можно подразделить в зависимости от вызываемых ими патологических процессов у человека на 6 групп.

1. Микоплазмы — возбудители респираторных заболеваний, основной возбудитель My­
coplasma pneumoniae.

2. Микоплазмы, связанные с заболеваниями мочеполового тракта, основные возбудите­
ли Mycoplasma hominis тип I, реже Mycoplasma hominis тип II и Ureaplasma urealiticum.

3. Микоплазмы — возбудители ревматоидных процессов.

4. Микоплазмы — возбудители сложных воспалительных синдромов.

5. Микоплазмы, связанные с разнообразными по их локализации воспалительными
процессами.

6. Микоплазмы — условные сапрофиты, встречающиеся в выделениях практически здо­
ровых людей.

Здесь мы рассмотрим диагностику только первых двух групп заболеваний. Наибольший интерес представляет диагностика респираторного микоплазмоза.

Диагностика респираторного микоплазмоза

Mycoplasma pneumoniae является возбудителем заболеваний респираторного тракта че­ловека, паразитируя на клеточных мембранах. Удельный вес респираторных микоплазмозов в общей группе респираторных заболеваний колеблется для разных групп населения от 35 до 40 %. Микоплазменные пневмонии составляют 10—17 % случаев от общего числа пневмо­ний. С интервалами в несколько лет могут развиваться эпидемии пневмонии, вызываемой М. pneumonia, и при этом частота случаев развития заболевания может вдвое превышать ее обычный уровень. Лабораторная диагностика заболевания осуществляется бактериологичес­кими и серологическими методами.

Правила забора материала для исследования. Клинический материал (лаважная жид­кость, мазки из носоглотки) получают с помощью ватных тампонов, собранный материал наносят тонким слоем на поверхность чистого обезжиренного предметного стекла, подсуши­вают на воздухе и фиксируют.

Выявление антигенов Mycoplasma pneumoniae в материале методом прямой иммунофлюоресценции

Полученный мазок с материалом от больного обрабатывают поликлональными антите­лами к цитоплазматической мембране Mycoplasma pneumoniae, меченных ФИТЦ. При про­смотре препарата в люминесцентном микроскопе в результате произошедшей реакции анти­ген—антитело определяется зеленая флюоресценция микоплазм. Положительная оценка ре­зультатов исследования предполагает выявление в препарате не менее 10 ярко-зеленых гра­нул, четко выявляющихся на красноватом фоне препарата. При получении меньшего коли­чества светящихся гранул в препарате и отсутствии в препарате эпителиальных клеток иссле­дование рекомендуется повторить. Если количество эпителиальных клеток в препарате до­статочно, а количество светящихся гранул менее 10, результат отрицательный.

Антитела к Mycoplasma pneumoniae в сыворотке

Серологическая диагностика основана на выявлении титра антител к Mycoplasma pneu­moniae в сыворотке. Кровь берут в первые дни болезни — до 6-го дня и спустя 10—14 дней, диагностическим считается нарастание титра антител в 4 раза и более. Максимальное увели­чение титра антител достигается через 4 нед заболевания. Однако интерпретация результатов серологического исследования требует определенной осторожности, так как вследствие ак­тивации поликлональных В-клеток могут появиться «неспецифические антитела»; другие возбудители инфекционных заболеваний, включая цитомегаловирус, вирусы Эпштейна— Барр и кори могут вызывать развитие сходных эффектов, что затрудняет оценку результатов исследования.

Определение антител к Mycoplasma pneumoniae применяется для диагностики мико-плазменной инфекции при хронических воспалительных заболеваниях легких, вторичных иммунодефицитных состояниях, в том числе СПИДе.

Диагностика микоплазменной инфекции органов мочеполовой системы

Микоплазменные инфекции урогениталий в настоящее время занимают ведущее место среди инфекций, передающихся половым путем. Они часто сочетаются с гонококками, трихо-монадами и условно-патогенными микроорганизмами. Результаты бактериологических иссле­дований показали, что микоплазмоз выделяется в виде моноинфекции у 12,8 % больных, в со-

четании с одним микроорганизмом — у 76,5 % и в сочетании с 2—3 видами уретральной мик­рофлоры — у 10,7 % больных [Козлова В.И., Пухнер А.Ф., 1995]. Факторами, обусловливаю­щими патогенность микоплазм, является их способность прикрепляться к различным клеткам (эпителию, лейкоцитам, сперматозоидам) и оказывать токсическое и деструктивное действие. Обследование на микоплазмоз должно проводиться у всех мужчин, женщин и детей, обратив­шихся к врачу по поводу воспалительных заболеваний мочеполовых органов, а также у всех половых партнеров или предполагаемых источников заражения микоплазмозом и у лиц с кли­ническими подозрениями на наличие заболевания. Необходимо учитывать, что характерной особенностью микоплазменной инфекции является существование латентной формы и мико-плазмоносительство в мочеполовых органах у мужчин и женщин.

Диагноз урогенитального микоплазмоза основывается на данных анамнеза, клиническо­го обследования и результатах лабораторных исследований. Диагноз во всех случаях должен быть подтвержден выделением микоплазм в культуре (бактериологический метод). В последние годы наибольшее распространение в лабораторной диагностике микоплазмоза урогениталий нашли серологические методы — РСК и РНГА, позволяющие выявить нарастание титров анти­тел в крови в процессе болезни при исследовании парных сывороток; метод иммунофлюоре-сценции, идентифицирующий микоплазмы в различном материале, взятом от больных, а также метод ПЦР, который обладает наиболее высокой чувствительностью и специфичностью.

Правила забора материала для исследования. Клинический материал берут с доступных исследованию слизистых оболочек (уретра, шейка матки, влагалище) с помощью ватных тампонов, ложки Фолькмана и других инструментов. Полученный материал наносят тонким слоем на поверхность чистого обезжиренного предметного стекла, подсушивают на воздухе и фиксируют.

Выявление антигенов Mycoplasma hominis в материале методом прямой иммунофлюоресценции

Mycoplasma hominis вызывает острые и хронические воспалительные заболевания уроге­нитального тракта, послеродовую лихорадку и сепсис, септические и спонтанные аборты. Mycoplasma hominis обнаруживают методом прямой иммунофлюоресценции при воспали­тельных заболеваниях урогениталий, по данным разных авторов, в 15—90 % случаев.

Полученный мазок с материалом от больного обрабатывают поликлональными антите­лами к цитоплазматической мембране Mycoplasma hominis, меченных ФИТЦ. При просмот­ре препарата в люминесцентном микроскопе в результате произошедшей реакции антиген-антитело определяется зеленая флюоресценция микоплазм. Положительная оценка результа­тов исследования предполагает выявление в препарате не менее 10 ярко-зеленых гранул, четко выявляющихся на красноватом фоне препарата. При получении меньшего количества светящихся гранул в препарате и отсутствии в препарате эпителиальных клеток исследова­ние рекомендуется повторить. Если количество эпителиальных клеток в препарате достаточ­но, а количество светящихся гранул менее 10, результат отрицательный.

Выявление антигенов Ureaplasma urealiticum в материале методом прямой иммунофлюоресценции

Ureaplasma urealiticum относится к виду микоплазм. Название «уреаплазмы» происходит от способности этого вида микоплазм продуцировать фермент уреазу, расщепляющий моче­вину с образованием углекислого газа и аммиака. Ureaplasma urealiticum вызывает воспали­тельные заболевания урогенитального тракта и может являться причиной развития беспло­дия как у мужчин, так и женщин. У мужчин Ureaplasma urealiticum способствует развитию простатита, уретрита и оказывает влияние на сперматогенез, что приводит к снижению фер-тильности. Бесплодие женщин обусловлено воспалительными процессами половых органов. Забор материала на исследование, его проведение и оценка результатов аналогична диагнос­тике Mycoplasma hominis.

Гонорея

Гонококки вызывают гнойное воспаление половых путей — гонорею. Трудность их об­наружения заключается в их слабой жизнеспособности, которая не позволяет широко поль­зоваться бактериологическим методом. В последние годы широкое распространение нашли

серологические методы диагностики. Они дают положительные результаты не только при острых формах заболевания, но и, что наиболее важно, при затяжных и хронических процес­сах, а также при осложненной гонорее.

Экспресс-диагностика гонореи в отделяемом материале из уретры

Метод основан на выявлении антигенов нейсерий в соскобах из уретры, цервикального канала и конъюнктивы методом иммуноферментного анализа с визуальной оценкой резуль­тата. Данный метод, основанный на наличии у нейсерий родоспецифического липополиса-харидного антигена, позволяет проводить быстрый скрининг возбудителя. Результаты иссле­дования — положительный или отрицательный ответ. Чтобы получить удовлетворительные результаты, необходимо соблюдать определенные правила: материал должен быть правильно взят (соскоб) и своевременно доставлен в лабораторию (в течение 2 ч).

Тест позволяет диагностировать гонококковую инфекцию при уретритах, простатитах, вагинитах, цервицитах, аднекситах.