Антитела к Helicobacter pylori в сыворотке в норме отсутствуют.

Из серологических методов определения антител в крови к Helicobacter pylori наиболь­шей чувствительностью обладает иммуноферментный метод. Получивший широкое распро­странение уреазный метод часто дает ложноположительные результаты вследствие возмож­ного обсеменения биоптата слизистой оболочки желудка другими бактериями, обладающи­ми уреазной активностью. Определение антител к Helicobacter pylori является хорошим мето­дом контроля за эффективностью лечения. Уровень антител определяется перед началом курса лечения и через 1 — 1,5 мес после его окончания. Снижение уровня антител в крови больного или их исчезновение говорит об успешном лечении.

Определение антител к Helicobacter pylori необходимо для диагностики заболеваний, вызванных хеликобактером, в том числе при язвенной болезни желудка и двенадцатиперст­ной кишки, раке желудка, язве пищевода.

Иммуноблотинг для определения антител к белкам Helicobacter pylori в сыворотке

Исследования последних лет показали, что развитие гастрита и язвы желудка связано в первую очередь с колонизацией слизистой оболочки токсигенными штаммами Helicobacter pylori, в то время как колонизация нетоксигенными штаммами только в небольшом процен­те случаев приводит к развитию этих заболеваний. Токсигенность штаммов обусловлена про­дукцией вакуолярного цитотоксина, синтез которого связан с продукцией белка с мол. мас­сой 120 000—128 000, кодируемого геном Coag A (cytoxin-associated gene А), а также токси­нов, кодируемых геном Vac А. Простое определение антител в сыворотке крови пациента свидетельствует о наличии инфекции Helicobacter pylori, но не дает информации о том, вы­звана ли она наличием токсигенных штаммов бактерий. При получении положительного ре­зультата для подтверждения наличия токсигенных штаммов бактерий используется метод иммуноблотинга Western-blot — встречная преципитация в геле антител в сыворотке крови больного с различными белками Helicobacter pylori, подвергнутыми разделению по молеку­лярной массе с помощью электрофореза и нанесенными на нитроцеллюлозу. Иммунобло­тинг позволяет выявить наличие антител в крови пациента к токсигенным белкам Helicobac­ter pylori, таким, как геномы Coag А и Vac А, уреазным субъединицам, а также белкам с мо­лекулярной массой 19 500; 26 500; 30 000; 36 000; 89 000, которые специфичны для этой ин­фекции. Данный метод позволяет исключить неспецифическое увеличении уровня антител при простом серологическом исследовании.

Хламидийная инфекция

Хламидии представляют большую группу облигатных внутриклеточных паразитов, очень близких к грамотрицательным бактериям. Их можно рассматривать как грамотрицательные бактерии, которые утратили способность синтезировать АТФ, ГТФ и ряд других ферментных

систем, иными словами утратили способность выработки метаболической энергии. Этот де­фект обусловливает их внутриклеточный рост, благодаря которому они имеют доступ к бога­тым энергией промежуточным продуктам метаболизма клеток хозяина. Род Chlamidia делят на 4 вида: Chlamidia trachomatis, Chlamidia psittaci, Chlamidia pneumonia, Chlamidia percorum. Все хламидии сходны по морфологическим признакам, имеют общий групповой антиген и раз­множаются в цитоплазме организма-хозяина, проходя определенные стадии развития. Инфек­ционным началом является так называемое элементарное тельце — маленькая клетка диамет­ром около 0,3 мкм. Эта частица проникает в клетку хозяина при фагоцитозе. Из поверхност­ных мембран клетки хозяина вокруг этой маленькой частицы образуется вакуоль. Элементар­ное тельце делится, превращаясь в «ретикулярное тельце» диаметром около 0,5—1,0 мкм. Внутри образованной вакуоли крупная частица увеличивается в размерах и многократно де­лится путем образования поперечной перегородки. В конечном счете вся вакуоль заполняется элементарными частицами (из одного элементарного тельца получается от 200 до 1000 инфек­ционных единиц) и превращается во «включение» в цитоплазме клетки-хозяина. Новообразо­ванные элементарные тельца выходят из клетки, которая в конечном счете разрывается, и могут инфицировать новые клетки. Весь цикл развития занимает 48—72 ч.

Заболевания, вызываемые Chlamidia trachomatis

Трахома. Хронический кератоконъюнктивит, который начинается с острых воспали­тельных изменений коньюнктивы и роговицы, приводит к образованию рубцов и слепоте.

В соскобах с конъюнктивы методом флюоресценции определяют хламидийные антиге­ны в эпителиальных клетках. Чаще их обнаруживают на ранних стадиях заболевания в верх­ней части конъюнктивы.

Урогенитальный хламидиоз и конъюнктивит. Частота обнаружения хламидии у мужчин с негонококковым уретритом составляет 30—50 %. Инфицированность женщин, имеющих первую беременность, достигает 5—20 %, делающих аборт — 3—18 %. Среди больных, имею­щих признаки цервицита, хламидийную инфекцию выявляют в 20—40 % случаев; сальпин­гит — в 20—70 % случаев; инфекцию мочевых путей — в 5—10 % случаев. У больных со сме­шанной урогенитальной инфекцией хламидиоз в сочетании с гонореей наблюдается в 23,5 % случаев, с трихомониазом — в 39,5 %, с гонореей и трихомониазом — в 36,8 % [Делектор-ский В.В. и др., 1996]. В последние годы инфекция нередко ассоциирована с микоплазмен-ной и уреаплазменной инфекцией, гарднереллезом. По данным различных авторов, 6—7 % детей уже при рождении оказываются инфицированными хламидиями.

Иммунологические типы Chlamidia trachomatis D-K — возбудители заболеваний, пере­даваемых половым путем, при которых могут развиваться и инфекционные поражения глаз (конъюнктивиты). У мужчин Chlamidia trachomatis являются возбудителями негонококковых уретритов, эпидидимитов, простатитов, проктитов, болезни Рейтера. У женщин Chlamidia trachomatis вызывают цервициты, сальпингиты, воспалительные заболевания органов малого таза, перигепатит, уретрит. В результате у мужчин и женщин может развиваться бесплодие. Считается, что около 80 % трубного бесплодия вызвано хламидиями. При любой локализа­ции инфекции может развиваться соответствующая симптоматика заболевания. В то же время болезнь может протекать бессимптомно (примерно в 50 % случаев у женщин), но передаваться половым путем партнерам [Козлова В.И., Пухнер А.Ф., 1995].

Поражения дыхательных путей, вызываемых Chlamidia. У взрослых, больных хламидий-ным конъюнктивитом, нередко появляются симптомы поражения верхних дыхательных путей (фарингит, ринит, отит и др.), которые развиваются, по-видимому, в результате рас­пространения хламидийной инфекции через слезно-носовой канал. Пневмония у взрослых обычно не наблюдается. У новорожденных, заразившихся от матерей, через 2—12 нед после родов возможны поражения респираторной системы вплоть до пневмонии.

Венерическая лимфогранулема. Эта форма хламидиоза распространена в тропических и умеренных зонах. Для нее характерно развитие гнойного пахового лимфаденита. Возбудите­лями являются Chlamidia trachomatis иммунологических типов L1-L3.

Синдром Рейтера. Для синдрома Рейтера характерна классическая триада: уретрит, конъюнктивит и артрит. При данном синдроме хламидии могут быть обнаружены в синови­альной жидкости. Наблюдается возрастание титра антител классов IgA, IgM, IgG в ходе раз­вития активной инфекции суставов.

Эндокардиты. Клинически протекают молниеносно со значительным поражением кла­панов аорты.

Первым и самым ответственным этапом при диагностике инфекционного процесса, яв­ляется забор материала у пациента.

1. Методика забора материала из уретры у мужчин:

— пациент не должен мочиться 1 ч до забора материала;

— ввести маленький капроновый тампон в уретру на 2—4 см, повернуть тампон на
360° и вынуть его;

— сразу же после забора материала поместить тампон на предметное стекло и, вращая
тампон вдоль предметного стекла, равномерно распределить материал по его по­
верхности;

— высушить мазок на воздухе и доставить в лабораторию.

2. Методика забора материала из цервикального канала с использованием цитощеточки:

— удалить ватой или тампоном слизь;

— ввести щеточку в цервикальный канал и повернуть ее на 360° вынуть, не касаясь по­
верхности влагалища;

— поместить щеточку на предметное стекло и, вращая тампон вдоль предметного
стекла, равномерно распределить материал по его поверхности;

— высушить мазок на воздухе и доставить в лабораторию.

3. Методика приготовления мазков с конъюнктивы:

— нанести местный анестетик на один или оба глаза;

— используя малый тампон, осторожно протереть им внутреннюю поверхность ниж­
него, а затем верхнего века, при заборе материала с обоих глаз вначале протирают
менее пораженный глаз;

— сразу же после забора материала поместить тампон на предметное стекло и, вращая
тампон вдоль предметного стекла, равномерно распределить материал по его по­
верхности;

— высушить мазок на воздухе и доставить в лабораторию.

Антитела IgA, IgM, IgG к Chlamidia trachomatis в сыворотке