Обеззараживание и утилизация отходов деятельности лаборатории

Все отходы деятельности лаборатории по степени эпидемиологической и токсикологической опасности подразделяются на следующие классы (СанПиН 2.1.7.2527-09, СанПин 2.1.7.728-99):

- класс А (неопасные) – отходы, не имеющие контакта с зараженными или условно зараженными ПБА I-IV групп патогенности (различная макулатура, упаковочный материал, негодная мебель, строительный мусор и др.);

- класс Б (опасные) – биологические отходы вивариев, иммуноклиник, мусор из помещений лаборатории, где не проводится работа с живыми ПБА I-IV групп патогенности, стеклянная лабораторная посуда из препараторских, стерильные отработанные ватно-марлевые материалы, бумажная макулатура из письменных комнат и др.;

- класс В (чрезвычайно опасные) – медицинские отходы из лабораторий, работающих с ПБА I-IV групп патогенности: отработанные посевы, остатки диагностического материала (сыворотки, сгустки крови, трупный материал и др.), вскрытые биопробные животные, остатки их корма, подстилочный материал от экспериментальных животных, пипетки, шприцы, тест-контроли работы автоклавов, ампулы из-под лиофилизированных культур, ватно-марлевый материал, макулатура из письменных комнат и другой отработанный материал, зараженный или подозрительный на зараженность бактериальными и вирус содержащими ПБА;

- класс Г – просроченные медицинские и иммунобиологические препараты (МИБП), питательные среды с истекшим сроком годности, химические реактивы, ртутьсодержащие предметы, приборы, оборудование.

К отходам деятельности лаборатории, в зависимости от их класса, предъявляют различные требования по обеззараживанию, сбору, временному хранению, транспортированию и утилизации.

Отходы класса А (неопасные) не требуют специального обеззараживания. Их собирают в пластиковые пакеты белого цвета, герметично закрывают и в твердых емкостях (например, баках) с крышками переносят к мусороприемнику для дальнейшего вывоза на полигон твердых бытовых отходов (ТБО).

Отходы класса Б (опасные) подвергают обязательной дезинфекции на месте их образования в соответствии с действующими нормативными документами (СП I. 3.1285-03). Обеззараженные отходы собирают в одноразовую герметичную упаковку желтого цвета. Для твердых отходов, имеющих острые края (битая стеклянная посуда, пипетки и т.п.), используют твердую упаковку, для игл от шприцов испльзуют специальные одноразовые контейнеры. Одноразовые емкости желтого цвета с отходами класса Б маркируют надписью «Опасные отходы – «Класс Б» с указанием названия лаборатории, кода учреждения, даты, фамилии ответственного за сбор отходов лица. Заполненные емкости помещают во влагонепроницаемые баки желтого цвета с той же маркировкой, герметично закрывают крышкой и переносят к металлическим контейнерам, которые размещены на специальной площадке хозяйственного двора учреждения (лаборатории). Дальнейшую утилизацию отходов проводят централизовано специальным автотранспортом на полигон ТБО или децентрализовано к месту кремации, если учреждение имеет крематорий для сжигания отходов.

Использованные для переноса (перевоза), временного хранения многоразовые емкости (баки, контейнеры) дезинфицируют и моют.

Отходы класса В (чрезвычайно опасные) подвергают обязательной дезинфекции на месте их образования в соответствии с действующими нормативными документами (СанПиН 2.1.7.2527-09, СП 1.3.1285-03; СанПин 2.1.7.728-99). Обеззараживание отходов проводят автоклавированием или обработкой дезрастворами. Эффективность работы автоклавов контролируют с помощью химических (каждый цикл автоклавирования) или биологических (ежемесячно) тестов. Путем автоклавирования обеззараживают жидкие и плотные питательные среды с посевами ПБА I-IV групп патогенности и без посевов; вскрытые ампулы из-под лиофилизированных культур (предварительно обеззараженные в дезрастворе); пробирки, флаконы, колбы с бактериальными взвесями; сыворотки; лабораторную посуду; обгоревшие ватно-марлевые пробки и другой материал, инфицированный или подозрительный на зараженность ПБА I-IV групп.

Жидкие питательные среды с посевами микроорганизмов после обеззараживания автоклавированием разводят водопроводной водой 1:2 и сбрасывают в канализацию. Рабочие растворы отработанных дезсредств после экспозиции в течение не менее 24 ч разводят водопроводной водой 1:2 и сливают в канализацию.

Лабораторные отходы класса В (из блока для работы с инфицированными животными) после обеззараживания в дезрастворах могут содержать ватные и ватно-марлевые тампоны, салфетки, вскрытые трупы мелких экспериментальных животных, трупы отловленных в природе грызунов, остатки корма и подстилочный материал из садков, где содержались лабораторные животные до и после экспериментов, шприцы, ампулы и флаконы с остатками вакцинных препаратов, сколы концов пастеровских пипеток и ампул и др.

После обеззараживания отходы класса В собирают в одноразовую упаковку красного цвета. Одноразовая упаковка может быть мягкой (пакеты) и твердой (одноразовые емкости). Каждая упаковка маркируется надписью «Чрезвычайно опасные отходы – «Класс В» с указанием названия лаборатории, кода, даты и фамилии ответственного сотрудника. Бактериальные культуры, вирусологически опасный материал, различные острые предметы, экспериментальных животных складывают в твердую герметичную упаковку, нетвердые отходы – в герметичную мягкую упаковку.

Все заполненные емкости укладывают в маркированные водонепроницаемые металлические баки (контейнеры) с плотно закрывающимися крышками и хранят до кремирования в специально отведенном месте в пределах лаборатории. Транспортирование отходов класса В для утилизации осуществляют только в закрытых кузовах специально применяемых для этих целей автомашинах, которые после вывоза подвергают спецобработке.

Подготовку обеззараженных отходов лабораторной деятельности к утилизации (сбор, упаковка, герметизация, размещение в емкости для временного хранения) осуществляет ответственное лицо из числа работников лаборатории в средствах индивидуальной защиты (противочумный костюм III типа, дополненного при необходимостиреспиратором и прорезиненным фартуком).

Отходы лаборатории класса Г по степени токсичности делятся на следующие подклассы (Сан ПиН № 4286-87, Приказ МПР РФ от 02.12.2002 г. № 786):

1 – ртуть, термометры, лампы люминесцентные

2 – масла, серная кислота, электролиты

3 – медицинские отходы

4 – картонная упаковка

Использованные люминесцентные лампы, ртутьсодержащие приборы собирают в закрытые влагонепроницаемые емкости черного цвета с маркировкой «Отходы – «Класс Г» и хранят в специально выделенном помещении до утилизации, которая осуществляется в соответствии с действующими нормативными документами. Если во время работы повреждена целостность ртутьсодержащих приборов или термометров и ртуть вылилась, необходимо немедленно провести демеркуризацию.

Масла, минеральные (хлорводородная, азотная, серная) и сильные органические кислоты, щелочи утилизируют согласно действующим нормативным документам.

Вакцинные, диагностические и лекарственные препараты с истекшим сроком годности после обеззараживания путем автоклавирования измельчают, помещают в пакеты черного цвета и хранят до утилизации в водонепроницаемом герметически закрытом контейнере с маркировкой «Отходы – «Класс Г». В эти же контейнеры складывают ненужную картонную упаковку в мягких одноразовых маркированных пакетах черного цвета. Вывоз этих отходов на полигон ТБО осуществляют централизованно специализированным автотранспортом.

СРЕДСТВА ЗАЩИТЫ

Основным правилом работы в режимных лабораториях является эффективная первичная изоляция персонала от ПБА, которая обеспечивается использованием одного (или более) из перечисленных средств:

– средства индивидуальной защиты (СИЗ)

– боксы биологической безопасности (БББ)

– изоляты из гибкой пленки аналогичного боксам стандарта.

Любые лабораторные манипуляции с микроорганизмами приводят к их рассеиванию в большей или меньшей степени во внешнюю среду. В связи с этим все работники микробиологических и вирусологических лабораторий, вне зависимости от их устройства и оборудования, должны применять средства индивидуальной защиты. Это предполагает использование той или иной спецодежды: противочумного костюма, пневмокостюма (типа «Антибелок»), изолирующего костюма типа К3М-1 с противогазом, пневмошлема, различных респираторов и т.п. Тип применяемой спецодежды зависит от вида ПБА, с которым ведется работа, и характера выполняемых манипуляций.

Например, при работе в стационарных, полевых или передвижных лабораториях сотрудники надевают противочумные костюмы I-IV типов, изолирующие костюмы типа К3М-1 и другие, разрешенные к применению защитные средства (рис. 1,2). В стационарных максимально изолированных лабораториях при работе с ПБА I-II групп патогенности персонал использует пневмокостюмы типа «Антибелок-5», пневмосистемы (типа ЛИЗ) или их аналоги (рис. 3,4,5). При экстремальных ситуациях (например, авариях) работники применяют аварийный комплект защитной одежды типа Л-1, «Корунд» или их аналоги с фильтрующим противогазом (рис. 1,6).

 

Рис.1. Костюм изолирующий с Рис. 2. Одноразовый костюм «Тайкем»

автономным обеспечением подачи воздуха

 

Рис.3. Защитный костюм «Кварц» Рис.4. Комбинезон защитный и панорам ная

полумаска со сменными фильтрами

 

Рис.5. Защитный колпак с принудительной Рис.6. Защитный костюм «Л-1»

подачей воздуха.

 

Существуют 4 основных типа противочумных костюмов:

I тип – комбинезон (пижама), носки, тапочки, большая противочумная косынка (120 х 120 х 150 см) или капюшон, противочумный халат, ватно-марлевая маска (из марли 125 х 50 см со слоем ваты 25х17х1,5 см весом 20 г) или противопылевой респиратор, или фильтрующий противогаз, плотно прилегающие очки-консервы или полимерная пленка одноразового использования (17 х 39 см с учетом 6 см с каждой стороны для привязывания тесёмок длиной по 30 см), резиновые перчатки, сапоги резиновые или водонепроницаемые бахилы, полотенце. При необходимости (вскрытие трупов людей или крупных животных) дополнительно надеваются прорезиненные фартук, нарукавники и вторая пара перчаток.

II тип – комбинезон (пижама), носки, тапочки, большая косынка (капюшон), противочумный халат, ватно-марлевая маска (респиратор), резиновые перчатки, сапоги (водонепроницаемые бахилы), полотенце. Отличается от костюма I типа отсутствием очков.

III тип - комбинезон (пижама), носки, тапочки, большая косынка, противочумный халат, резиновые перчатки, защитная обувь (глубокие галоши, сапоги или водонепроницаемые бахилы), полотенце.

IV тип – комбинезон (пижама), носки, тапочки, шапочка (малая косынка), противочумный (хирургический) халат.

Разработан порядок надевания и снятия противочумного костюма.

К работе в пневмокостюмах допускаются только лица, не имеющие медицинских противопоказаний к ношению этого типа защитной одежды, прошедшие специальное обучение, инструктаж по правилам работы и сдавшие зачёт. На централизованном специальном участке перед использованием пневмокостюм проверяют на целостность, а комплектные к ним фильтры ТОВ (В-0,4) – на оценку коэффициента проскока и фиксируют результаты в специальном журнале. Сотрудник лаборатории получает пневмокостюм под личную роспись и визуально проверяет его на целостность перед непосредственной работой. В соответствующих инструкциях регламентируется порядок надевания-снятия пневмокостюмов и правила работы в них.

После использования пневмокостюмы обрабатывают в дезинфицирующем душе, в парагазовых передаточных камерах и затем проверяют на целостность.

Для защиты органов дыхания надевают различные респираторы. Респираторы-капюшоны положительного давления представляют собой легкий капюшон из прозрачного материала, покрывающий голову, шею и плечи. Подача воздуха осуществляется из переносных баллонов со сжатым воздухом (запас воздуха на 15-20 мин) или через шланги, связанные с небольшим компрессором с ВД (высокого давления) - фильтрами, который питается от батарей. Продолжительность их работы (6-7 ч) зависит от качества фильтров.

Маска-респиратор закрывает большую часть лица, обеспечивая надежную защиту глаз и дыхательных путей. Маска может иметь одновременно биологический фильтр системы ВД и химический патрон. Наличие химического патрона не обязательно, если респиратор применяется при биологической защите. Маска-респиратор должна плотно прилегать к лицу, чтобы обеспечить необходимую герметичность. При слабом натяжении крепящих маску лент вдыхаемый воздух минует фильтрующие элементы и снижает защитную способность маски. В помещениях, где содержание кислорода не соответствует нормативам, не разрешается применять респираторы с химическим патроном.

Полумаска-респиратор не защищает глаза, прикрывая только рот и нос. Блок с фильтрами системы ВД, размещенный сбоку маски, обеспечивает лучшую видимость, чем в случае его расположения впереди. Наличие химического фильтра-патрона в полумаске-респираторе необязательно, если нет угрозы применения ОВ.

При необходимости защитить глаза можно использовать «очки-консервы», которые должны плотно прилегать к коже в области глаз.

Если нет опасности воздушной микробной инфекции для защиты глаз от химических веществ (в виде брызг) можно рекомендовать специальные козырьки (щитки). Козырьки должны полностью закрывать лицо и при необходимости легко откидываться назад.

Большинство лабораторных манипуляций, когда смешивают, встряхивают, измельчают или центрифугируют инфицированный материал, сопровождается образованием случайных аэрозолей. Неправильная работа бактериологической петлей, пипеткой также создают целый ряд возможностей образования аэрозолей. Использование современных защитных боксов при работе с инфицированными материалами обеспечит удержание и контролируемое удаление из рабочей зоны образовавшихся аэрозолей. Выбор конструкции защитного бокса определяется степенью опасности ПБА, с которым предстоит работа.

Различают боксы с частичным удержанием микроорганизмов (боксы I и II классов) и с полным их удержанием или изолирующие боксы (III класса).

Эффективность боксов биологической безопасности (БББ) контролируется проверкой работы фильтров, определением скорости потока воздуха, надежностью общей изоляции и других инженерно-технических характеристик.

БББ I класса – это открытая спереди рабочая камера с принудительным удалением через ВД-систему отработанного воздуха. Удаляемый воздух очищается от частиц аэрозоля в предфильтре и в специальном фильтре тонкой очистки (ФТО) и выводится в центральную вытяжную систему лаборатории. Скорость движения воздуха в проёме передней панели бокса должна составлять 0,5-1,0 м/с, а высота проёма ≈ 20 см. Снижение или повышение скорости движения воздуха в проёме недопустимо.

Боксы I класса предназначены для работы с агентами низкой (микроорганизмы, которые обычно не вызывают заболеваний человека или животных) или умеренной (микроорганизмы, которые могут вызывать не представляющее серьезной опасности заболевание человека или животного и риск распространения инфекции невысок) степени риска, согласно классификации ВОЗ.

Боксы II класса представляют собой защитные конструкции также с проёмом в передней панели для рук работающего. В этих боксах создается нисходящий вертикальный ламинарный воздушный поток благодаря рециркуляции части засасываемого в бокс воздуха. Рециркулируемый и выводимый из бокса воздух очищается в высокоэффективных аэрозольных фильтрах.

Разработано два типа БББ II класса: тип А и тип Б. В боксах типа А минимальная скорость поступающего воздуха через рабочий проём высотой 20 см составляет 0,4 м/с. Скорость вертикального нисходящего потока воздуха внутри камеры такая же. Конструкция обеспечивает рециркуляцию около 70 % всего воздуха. В боксах типа Б воздух поступает внутрь устройства через изменяемый по вертикали рабочий проём со скоростью 0,5 м/с, а средняя вертикальная скорость нисходящего потока воздуха внутри камеры равна 0,25 м/с. Эта конструкция обеспечивает удаление около 70 % всего воздуха, протекающего через рабочую зону, и является предпочтительней конструкции типа А, поскольку исключает накопление в высоких концентрациях опасных и токсичных агентов при работе с ними. Эффективная работа защитных боксов II класса достигается только при хорошо сформированном и тщательно поддерживаемом ламинарном потоке воздуха.

Все манипуляции в боксах проводятся ближе к задней стенке камеры на специальных поддонах с салфетками, смоченными дезинфицирующим раствором.

Работа с ПБА проводится в противочумном костюме IV типа, поскольку не исключается загрязнение рук экспериментатора, необходимо использование резиновых перчаток. После окончания работы все извлекаемые из боксов предметы и материалы подвергают предварительному обеззараживанию непосредственно в боксах путем протирания или погружения в соответствующие дезинфицирующие растворы и заключительной дезинфекции вне боксов. СИЗ после окончания работы помещают в контейнеры для последующего обеззараживания.

Защитные боксы II класса используют для работ с микроорганизмами низкой категории риска, если лабораторные манипуляции сопровождаются массовым образованием аэрозолей, или агентами с высоким уровнем риска для индивида и низким – для общества.

В боксах БББ II Б класса проводят диагностические исследования, связанные с изоляцией вирусов и риккетсий II группы патогенности. Если в помещении блока для работы с животными отсутствует приточно-вытяжная вентиляция или фильтры тонкой очистки на выходе вытяжной вентиляции, разрешается проводить работу с инфицированными (кроме вирусов I группы патогенности) животными в боксах БББ II (А, Б) класса, а исследование на чуму – в боксах БББ II Б или III класса.

Защитные боксы III класса – полностью изолированная воздухонепроницаемая камера, внутри которой создается пониженное давление (на 0,1-0,24 кПа ниже окружающего), что обеспечивает надежный барьер между инфицированным материалом и экспериментатором. Резиновые перчатки плечевого типа герметично заделаны в передней, а иногда и задней (при боксах двустороннего типа) панелях камеры. Засасываемый в бокс и выводимый из него вентилятором воздух очищается в предфильтре и в двух последовательно установленных высокоэффективных фильтрах. Жидкие отходы из бокса собирают в специальную емкость и подвергают термической обработке.

Для проведения специальных исследований боксы III класса можно объединять в защитные технологические линии. Эти линии оснащают изолированными от окружающей среды и друг от друга инкубаторами, центрифугами, измельчителями, гомогенизаторами, рефрижераторами и другим оборудованием и приборами. Возможно изолированное содержание подопытных животных. Соединение отдельных элементов в линии осуществляется с помощью камер-шлюзов.

Камеры-шлюзы могут быть оформлены в виде автоклавов проходного типа. Места ввода коммуникаций и соединения боксов между собой герметизируют, чтобы исключить возможность утечки аэрозолей, как при работающих вентиляторах, так и в случае их неисправности или перерыва в подаче электроэнергии.

Перед началом работы в боксе включают вентиляцию, проверяют наличие отрицательного давления по шкале боксового манометра, наличие запаса дезинфицирующих средств и загружают материал.

Время непрерывной работы ограничивают четырьмя часами, после которых устанавливают 30-60-минутный перерыв.

Защитные боксы III класса предназначены для работы с ПБА любого уровня опасности, являясь в этом отношении универсальными для всех современных микробиологических и вирусологических лабораторий.

Максимально изолированные лаборатории оборудуют боксами биологической защиты III класса. В них проводят исследование материала от больных людей с подозрением на особо опасное инфекционное заболевание, заражение культур ткани, членистоногих (на биомембране), биопробных животных (материалом из объектов окружающей среды, диких грызунов и членистоногих), заражение и вскрытие куриных эмбрионов, постановку серологических реакций с необеззараженными пробами. Исследование материала от больных с неясной этиологией, когда невозможно исключить наличие вирусов I группы патогенности, также проводят в БББ III класса.

В БББ III класса или отдельных боксированных помещениях проводят все манипуляции, связанные с высоким риском образования аэрозоля: центрифугирование, гомогенизация, измельчение, интенсивное встряхивание, обработка ультразвуком, вскрытие объектов с зараженным материалом, работа с большими объёмами и высокой концентрацией ПБА и др.

Микологические лаборатории также оборудуют БББ III класса, поскольку отдельные манипуляции при работе с возбудителями глубоких микозов требуют максимальной изоляции. Так, все манипуляции с культурами мицелиальной фазы, изучение выживаемости грибов во всех фазах проводят в БББ III класса. Не разрешается открывать пробирки и матрацы с посевами мицелиальной фазы грибов вне БББ.

При работе в БББ III класса сотрудники надевают противочумный костюм IV типа дополненный резиновыми перчатками.

Изоляторы отрицательного давления из мягкой пленки представляют собой в основном бокс биологической безопасности III класса. Эта конструкция выполнена в виде мешка из мягкой пленки, смонтированного и укрепленного на металлической раме. В переднюю стенку изолятора герметично заделаны резиновые перчатки плечевого типа. Ввиду недостаточной прочности его использование ограничено. Только хорошо обученный и опытный персонал может быть допущен к работе с этим оборудованием.