Режим работы с бактериями, образующими споры

Вся работа с культурами возбудителя сибирской язвы и зараженными животными должна проводиться в соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)».

При работе с возбудителем сибирской язвы для дезинфекции применяют 3-6 % растворы Н₂О₂. Для снижения высокого поверхностного натяжения Н₂О₂ в ее растворы добавляют моющие средства до 0,5 % концентрации. Повышение температуры смеси до 50-60 ^оС значительно усиливает бактерицидную активность Н₂О₂ в отношении микроорганизмов и позволяет снизить экспозицию 6 % раствора с 6 ч до одного часа. Приготовление рабочих растворов и активацию производят в резиновых перчатках, предохранительных очках, 4-слойной марлевой маске.

Кроме вышеперечисленных веществ, для дезинфекции применяют растворы велтолена, формалина, едкого натра, септодора-форте и др.

В лаборатории основным методом обеззараживания объектов, инфицированных возбудителем сибирской язвы, является автоклавирование при температуре 132±2 ºС под давлением 2,0 кгс/см² в течение 90 мин. Эффективность автоклавирования контролируется физическим, бактериологическим, химическим методами. Физический метод контроля - непосредственное наблюдение за процессом стерилизации по показаниям термометра, манометра. Бактериологический контроль осуществляется с помощью тест-объектов. В качестве тест-объектов используется отмытый стерильный песок, пропитанный термофильными бактериями «С». Пробирки с тест-объектами (не менее 6 штук) помещают на разных уровнях в автоклав. Одна пробирка остается контрольной. После прохождения цикла автоклавирования все пробирки стерильно заливают 1% пептонной водой (не менее 5 мл в каждую пробирку), в том числе и в контрольную. Пробирки помещают в термостат при 60 ºС и выдерживают не менее 5 сут. В автоклавированных пробирках среда должна оставаться прозрачной, в контроле - мутной.

Химический контроль проводят с помощью веществ, имеющих строго определенную точку плавления: бензамид или сукцинимид (126±2 ^оС), мочевина (132±2 ^оС). К последним добавляют анилиновые краски: фуксин, сафранин и др., которые при плавлении индикатора окрашивают его в тот или иной цвет.

Дезинфекция

При работе за лабораторным столом пипетки, отработанные предметные и покровные стекла погружают в сосуд с 4 % раствором активированного хлорамина или 6 % раствором перекиси водорода с 0,5 % моющего средства не менее чем на 60 мин., после чего дезинфицирующий раствор сливают в канализацию, а пипетки кипятят в мыльном растворе или 2 % растворе пищевой соды.

Приготовленные мазки из споровой культуры фиксируют 30 мин 96 ^о спиртом, содержащим 3 % Н₂О₂. После отмывания мазков вода подлежит обеззараживанию автоклавированием или добавлением хлорамина до 4 % концентрации с последующим его активированием. Высушивание мазков у вентилятора не допускается.

Лабораторные столы после работы протирают двукратно с интервалом 30 мин 6 % раствором перекиси водорода с 0,5% моющего средства. Бумагу, вату, картонные коробки и другие материалы, подлежащие уничтожению, сжигают в кремационной печи или автоклавируют, металлические предметы обжигают.

Трупы лабораторных животных сжигают в кремационной печи или автоклавируют.

Металлические ящики, садки, банки из-под животных с подстилочным материалом и экскрементами, сетчатые крышки автоклавируют или заливают на 48 ч 4 % активированным раствором хлорамина либо 6 % раствором перекиси водорода с 0,5 % моющего средства.

Противочумные костюмы (халаты, косынки, ватно-марлевые маски) автоклавируют или замачивают в 1 % активированном растворе хлорамина на 2 часа либо в 3 % растворе перекиси водорода при температуре 50 °С на 1 ч. Перчатки замачивают в 6 % растворе перекиси водорода на 1 ч либо кипятят в 2 % растворе соды 60 мин. Сапоги протирают 6 % раствором перекиси водорода двукратно с интервалом в 15 мин. Помещение обрабатывают УФ при текущей дезинфекции и парами формалина при заключительной.

После проведения текущей и заключительной дезинфекции споры возбудителя сибирской язвы должны отсутствовать.

Не ранее, чем через час, но не позднее двух часов после обработки, производят контроль эффективности дезинфекции. Для этого с поверхности 100 см² 5-10 объектов, подвергшихся обработке (лабораторные столы, стены, оконные рамы, двери), делают смывы ватным тампоном, смоченным стерильным 0,9 % раствором. Тампоны помещают в стерильные пробирки с 4-5 мл МПБ. Посевы инкубируют в термостате при 37 °С 18-24 ч. Из пробирок, в которых обнаружено помутнение бульона, производят высев на МПА и посевы выдерживают 18-20 ч при 37 °С.

Удовлетворительная оценка качества дезинфекции дается при отсутствии роста во всех исследованных смывах.