Растворимость АП в щелочах в зависимости от заместителей

 

Растворитель	Заместитель
-СООН	b-ОН	a-ОН
Гидроксиды щелочей Карбонаты Гидрокарбонаты	+ + +	+ + -	+ - -

 

8. Большинство АП флуоресцируют в УФ свете:

антрахиноны - оранжевым, розовым, красным, огненно-красным цветом;

антроны и антранолы - желтым, голубым и фиолетовым.

9. Гликозиды под действием ферментов и кислот гидролизуются на агликон и сахарную часть.

10. Характерным свойством всех АП является устойчивость их ядра.

11. С ионами щелочных металлов образуют соли.

12. С солями тяжелых металлов (Al, Cr, Sn) - очень устойчивые соли или комплексы (лаки).

Методы выделения антраценпроизводных из ЛРС

Для выделения антрагликозидов (схема 10) растительный материал экстрагируют водой, спиртами (этиловым, метиловым) или водно-спиртовыми смесями (70%, 80%).

Полученное извлечение отгоняют под вакуумом до водного остатка, который обрабатывают четыреххлористым углеродом для очистки от липофильных (балластных) веществ. Затем проводят разделение суммы гликозидов хроматографически.

Схема 10

 

Для выделения агликонов гликозиды в растительном материале подвергают кислотному или ферментативному гидролизу, после чего свободные агликоны извлекают хлороформом, диэтиловом эфиром или другими органическими растворителями.

Для разделения агликонов используют их избирательную растворимость (таблица 4), а также колоночную хроматографию на полиамиде или силикагеле.

Установление структуры выделенных соединений проводят с помощью физико-химических методов (УФ-, ИК-, ПМР-, масс-спектроскопия), определяют температуру плавления, удельное вращение (для гликозидов). Полученные спектры и показатели сравнивают со спектрами известных соединений.

Методы обнаружения антраценпроизводных в ЛРС

I. Качественные реакции

1. Наиболее характерными реакциями на антрахиноны являются реакции с раствором аммиака или с растворами едких щелочей, в результате которых феноляты окрашиваются в различные цвета в зависимости от положения гидроксильных групп:

· феноляты 1-8 дигидроксиантрохинонов имеют вишнево-красное окрашивание;

· феноляты 1-4 дигидроксиантрохинонов - пурпурное окрашивание;

· феноляты 1-2 дигидроксиантрохинонов - фиолетовое окрашивание.

Реакцию можно провести, смачивая внутреннюю поверхность коры крушины 10% раствором гидроксида натрия или известковой водой. Появляется кроваво-красное окрашивание.

Восстановленные формы со щелочами дают желтое окрашивание, но после окисления кислородом воздуха или перекисью водорода (или другими окислителями) - красное окрашивание.

2. Для обнаружения антрахинонов, имеющих хотя бы одну ОН-группу в a-положении, можно использовать реакцию с 1% метанольным раствором ацетата магния, дающую различное окрашивание по аналогии.

3. Широко используют реакцию Борнтрегера (схема 11). Готовится щелочное извлечение из ЛРС (10% раствор гидроксида натрия) при нагревании. При этом происходит:

1) гидролиз антрагликозидов с образованием свободных

агликонов;

2) окисление восстановленных форм до антрахинона;

3) образование фенолятов.

После подкисления гидролизата агликоны извлекают органическим растворителем (диэтиловым эфиром). При встряхивании эфирного слоя с раствором аммиака образующиеся феноляты переходят в аммиачный слой и окрашивают его в вишнево-красный или фиолетовый цвета (эмодины). В случае хризофанола органический слой остается окрашенным в желтый цвет.

Эта реакция лежит в основе количественного определения АП.

4. Реакция сублимации. Сырье нагревают в сухой пробирке, при этом происходит окисление восстановленных форм до антрахинонов, которые возгоняются. Сублимат конденсируется на стенках пробирки в виде желтых капель или кристаллов. От капли щелочи они окрашиваются в красный цвет.

II. Хроматография

При анализе ЛРС, содержащего АП, используется бумажная и тонкослойная хроматография.

Для хроматографии на бумаге используют системы растворителей:

Н-БУТАНОЛ - УКСУСНАЯ КИСЛОТА - ВОДА (4:1:5),

МЕТАНОЛ - ЭТИЛАЦЕТАТ - МУРАВЬИНАЯ КИСЛОТА (50:5:5) и др.

Для хроматографии в тонких слоях:

БЕНЗОЛ - МЕТАНОЛ (8:2);

ХЛОРОФОРМ - ЭТАНОЛ - ВОДА (60:30:20) и др.

Спиртовое извлечение из ЛРС наносят на пластинку с тонким слоем силикагеля, хроматографируют в системе ЭТИЛАЦЕТАТ - МЕТАНОЛ - ВОДА (100:17:13), затем высушивают. Зоны сорбции АП обнаруживают по окраске в видимом и УФ-свете до и после проявления 5% спиртовым раствором щелочи. Наблюдают различно окрашенные пятна от желтой до огненно-, кирпично-красной и даже фиолетовой окраски.

Количественное определение

Для количественного определения АП в ЛРС используют оптические методы: колориметрические и спектрофотометрические.

Схема 11

Схема реакции Борнтрегера

 

Щелочное извлечение

 

 

Фильтрация

(отработанное сырье на выброс)

 

 

Подкисление гидролизата

 

 

Агликоны извлекают диэтиловым эфиром

Эфирный слой желтого цвета

 

Обработка эфирного слоя аммиаком

 

Образующиеся феноляты переходят в

аммиачный слой, окрашивая его в

вишнево-красный цвет - эмодины

 

Эфирный слой остается окрашенным в

желтый цвет (хризофанол)

 

1. Колориметрический метод основан на реакции Борнтрегера, которая заключается в том, что окисленные формы антраценпроизводных при растворении в щелочах образуют красную окраску, а восстановленные - желтую. Реакция является положительной для антрахинонов хризацинового ряда. Антроны, антранолы, диантроны и их гликозиды дают красное окрашивание после гидролиза и окисления.

Существует множество модификаций этого метода, но чаще используют метод, принятый ГФ ХI (вып. 2, ст. 2) для определения АП в коре крушины (схема 12).

При определении необходимо учитывать, что производные антрацена могут быть представлены С-гликозидами, как у алоэ и сенны. В этих соединениях углеводные компоненты не отщепляются ни при кислотном, ни при щелочном гидролизе. Таким образом, этот метод не позволяет с достаточной точностью определять сумму антраценпроизводных или содержание отдельных антрахинонов.