Техника подсчета кровяных пластинок

 

Кровяные пластинки подсчитывают по методу Фонио, несколько изме­ненному Негели. Чтобы избежать коагуляции пластинок, сосуд прокалы­вают через нанесенную на кожу каплю 14% раствора сернокислой магнезии,

Выступающую из ранки кровь смешивают с этим же раствором, затем краем покров­ного стекла набирают капельку смеси и делают мазок на предметном стекле.

Приготовленный мазок высушивают на воздухе и фиксируют специальной смесью следующего состава: сулемы 0,1; ледяной уксусной кислоты 6 капель; абсо­лютного спирта 100 мл. Мазок окраши­вают в течение 1—2 часов по методу Романовского — Гимза или по Паппенгейму. Последняя окраска дает очень демонстра­тивные результаты.

При подсчете определяют, какое ко­личество кровяных пластинок приходится на 1000 эритроцитов. С этой целью ис­пользуют специальное окулярное окно; суживая поле зрения, оно облегчает ра­боту и делает ее более точной. Вначале в каждом поле зрения подсчитывают все эритроциты, а затем кровяные пластинки в четырех разных участках мазка, так как при неравно­мерном распределении эритроцитов может получиться значительная ошибка. Найденные количества эритроцитов и кровяных пластинок в различных полях записывают раздельно.

 

 

Зная общее количество эритроцитов, нетрудно определить, какое коли­чество кровяных пластинок находится в 1 мм³ крови, например:

 

 

Метод подсчета тромбоцитов в камере (Г одр и). Для такого подсчета кровяных пластинок необходимо иметь пипетку, флакон и жидкость для разведения крови следующего состава: лимоннокислого натрия 2,0; хлористого натрия 0,2; бриллианткрезильблау 0,1; формола 0,3 и дистиллированной воды до 100 мл.

Пипетку для взятия крови предварительно опускают в расплавленный парафин, застывающий на ее стенке тонким слоем. В пипетку набирают 40 мм³ воды и отмечают на парафине ее уровень. Парафином покрывают и стенки флакона, в который набирается кровь.

Кровь насасывают в пипетку (освобожденную от воды) до метки и выду­вают в пузырек с парафинированными стенками. Туда же добавляют 5 мл указанного выше раствора. Получается разведение крови 1: 150 (точнее 1: 151). После тщательного размешивания содержимого пузырька заполняют камеру и определяют число бляшек, окрашенных бриллианткрезильблау.

Для подсчета лучше использовать камеру Тома с круглой пластинкой. Камера типа Бюркера менее пригодна, так как существует опасность, что бляшки в ней распределятся неравномерно (часть из них, как только они кос­нутся незащищенной поверхности стекла, задержится вблизи края). Следует, однако, иметь в виду, что и в камере типа Тома также возможны ошибки из-за скопления клеток в центральной части пластинки.

В парафинированном сосуде кровь может сохраняться без заметного уменьшения количества тромбоцитов в течение нескольких часов.

У здоровых животных количество тромбоцитов в 1 мм³ крови составляет (is тысячах): у крупного рогатого скота 260—710, у овец 170—980, у коз 310—1020, у лошади 200—900, у свиньи 130—450, у собаки 190—577.

При патологических процессах количество кровяных пластинок может увеличиваться (тромбоцнтоз) и уменьшаться (тромбоцитопения).

Т р о м б о ц и т о з наблюдается у животных при ряде инфекционных заболеваний — инфлюэнце лошадей, плеврите, гемоглобинемии и саркома­тозных поражениях.

Т р о м б о ц и т о п е н и я отмечается при инфекционной анемии лоша­дей, кровопятнистой болезни и др. Особенно большое значение она имеет при стахиботриотоксикозе лошадей. По данным А. В. Синева, количество кровя­ных пластинок при этой болезни снижается задолго до появления изменений со стороны белой крови. По мере развития процесса количество их постепенно уменьшается и падает до минимума незадолго до перехода из скрытой формы в септическую. Если у здоровой лошади соотношение тромбоцитов и эритро­цитов равно в среднем 50: 3000, то при стахиботриотоксикозе оно составляет лишь 8—3: 3000. Одновременно обнаруживают резко выраженную лейкопе­нию и лимфоцитоз (до 90%) с уменьшением гранулоцитов и полной ирретрак-тильностью кровяного сгустка.

Тромбоцитопения может, следовательно, иметь такое же диагностиче­ское значение, как и ретракция кровяного сгустка, и использоваться для выде­ления больных лошадей до перехода процесса в септическую форму.