Занятие № 1. Строение и функции белков. Методы качественного и количественного анализа белков.

Цель занятия. Овладеть некоторыми методами качественного и количественного анализа белков, освоить правила работы с биологическим материалом, научиться производить измерения оптической плотности на фотоэлектроколориметре (ФЭК).

 

Студент должен
знать:	уметь:
-строение и свойства протеиногенных аминокислот; -уровни организации белковой молекулы; -качественные реакции на белки; -методы установления первичной структуры белков; -принцип работы и устройство ФЭК.	-писать формулы пептидов заданного состава; -определять количество белка в сыворотке крови биуретовым методом.

 

Содержание занятия. В ходе занятия студентам предстоит:

-ознакомиться с требованиями кафедры к студентам;

-ознакомиться с правилами работы в биохимической лаборатории;

-ответить на вопросы тест-контроля;

-ответить на вопросы преподавателя и обсудить основные вопросы темы;

- произвести количественное определение содержания белка в сыворотке крови биуретовым методом.

УИРС. Решение ситуационных задач, исследование некоторых особенностей аминокислотного состава яичного, соевого белков и белка соединительной ткани – коллагена.

Методические указания к самоподготовке

При подготовке к занятию повторите раздел из курса биоорганической химии «Структура и свойства аминокислот». Используя лекции и учебник по биохимии, изучите химический состав, строение, уровни организации белковой молекулы, биологические функции белков.

Для успешного усвоения материала и плодотворной работы на лабораторном занятии дома необходимо выполнить следующие задания:

 

№№	Задание	Указания к выполнению задания
1.	Сформулируйте, почему будущему врачу необходимо знать структуру, свойства и биологическую роль белков.	1. Вспомните химический состав живых объектов. 2. Опишите функциональное многообразие белков – белки ферменты, белки-рецепторы, транспортные белки, антитела. Приведите примеры белковых гормонов, важнейших сократительных и структурных белков.
2.	Изучите уровни организации белковой молекулы.	1. Что такое первичная структура белка (дайте определение)? 2. Напишите структурную формулу трипептида мет-про-илей. 3. Что такое вторичная структура белка, какие ее разновидности вы знаете? Дайте характеристику связи, стабилизирующей вторичную структуру. 4. Нарисуйте схему α–спирали и β–складчатого листа. 5. Что такое супервторичная структура? Какие виды супервторичной структуры вы знаете? 6. Что такое третичная структура? Покажите связи, стабилизирующие третичную структуру. 7. Что такое четвертичная структура? Приведите примеры белков, имеющих четвертичную структуру.
3.	Изучите методы исследования первичной структуры белка.	1. Какие методы гидролиза белка Вы знаете? 2. В чем суть хроматографического анализа. Приведите классификацию хроматографических методов. 3. Выпишите методы избирательного гидролиза белков (реагент - тип гидролизуемых связей). 4. Приведите примерную последовательность операций при установлении первичной структуры белка. 5. Продумайте, какое практическое значение для медицины имеют исследование аминокислотного состава и первичной структуры белков.
4.	Ознакомьтесь с методами установления вторичной, третичной и четвертичной структуры белка.	1. Перечислите и охарактеризуйте методы, позволяющие изучить вторичную, третичную и четвертичную структуру белка.
5.	Изучите, какими методами можно определить количественное содержание белка и аминокислот в биологических объектах.	1. Опишите принцип количественного определения белка по белковому азоту. 2. Сформулируйте принцип количественного определения белка биуретовым методом. 3. Выпишите границы содержания белка в сыворотке крови в физиологичеких условиях и приведите примеры заболеваний, сопровождающихся гипо- и гиперпротеинемией.
6.	Вспомните, каков характер зависимости степени поглощения света раствором от интенсивности окраски.	1. Нарисуйте график зависимости степени поглощения от интенсивности окраски. 2. Занесите в тетрадь схему фотоэлектроколориметра, кратко выпишите принцип действия и последовательность операций при работе на этом приборе (из курса биоорганической химии).

Занесите в тетрадь протоколы лабораторных работ, оставляя место для выводов и расчетов.

Графологическая структура

«Качественный анализ – установление структуры белка»

Примеры тестов контроля исходного уровня знаний

Вид 1. Выберите один наиболее правильный ответ:

1.1. Компонент мочи, который не позволяет использовать биуретовый метод для количественного определения белка в моче -

а) мочевая кислота

б) минеральные вещества

в) мочевина

г) органические кислоты

д) аминокислоты