Аналитический сигнал нефелометриии и прибор, на котором его снимают.

Нефелометрический и турбидиметрический методы применяются для анализа суспензий, эмульсий, различных взвесей и других мутных сред. Интенсивность пучка света, проходящего через такую среду, уменьшается за счет рассеивания и поглощения света взвешенными частицами.

Нефелометрический метод определения концентрации основан на измерении интенсивности света, рассеянного взвешенными частицами. Интенсивность рассеянного света подчиняется закону Релея:

где I_н и I₀ - интенсивности рассеянного и падающего света; n₁ и n₂ - коэффициенты преломления частиц и среды; N - общее количество светорассеивающих частиц; х - объем одной частицы; л - длина волны падающего света; r - расстояние до приемника рассеянного света; в - угол между падающим и рассеянным светом. В условиях нефелометрического определения ряд величин остается постоянным и уравнение (V.1) переходит в

Множитель 1/ л⁴ указывает на быстрое возрастание интенсивности рассеянного света с уменьшением длины волны падающего света. Так как красный свет рассеивается меньше, чем любой другой при прочих равных условиях, различные сигнальные огни (стоп-сигналы, огни маяка и т. д.) бывают красные.

Серьезное затруднение в практике нефелометрии состоит в том, что интенсивность рассеянного света зависит от объема частиц. Большое значение в связи с этим приобретает унификация методики приготовления взвеси - строгое соблюдение концентрационных и температурных условий, порядка и скорости смешения растворов, введение защитных коллоидов и т. д. При строгом соблюдении этих условий объемы частиц суспензии получаются примерно одинаковые, и их размер вполне удовлетворительно воспроизводится от опыта к опыту.

Устройство приборов для нефелометрии. Прибор для измерения светорассеяния называется нефелометром. В конструктивном отношении флюорометр и нефелометр очень похожи и в определенных случаях может использоваться один и тот же прибор.

В скоростной (кинетической) нефелометрии в качестве источников света используют вольфрамово-галогеновую и кварцево- йодную лампы накаливания. Свет от них, пройдя через фильтр (фильтры) и приобретя определенную длину волны, достигает кюветы с измеряемой пробой. В течение некоторого времени избираются различные длины волн, при этом измеряют, например, скорость взаимодействия антител и антигена (гаптена) путем определения максимального светорассеяния на число образующихся комплексов. Высокопроизводительный светодиод (LED) возбуждает свет одной, специфической, длины волны, диапазон длин волн не может быть избран. В качестве источника света в нефелометрах используют также лазеры. Требования к качеству спектров в нефелометрии не очень высоки.

На ранних этапах развития нефелометрии детекторы в нефелометрах располагали под углом 90° к исходящему лучу. Однако комплексы «антиген — антитело» относятся к частицам, которые рассеивают свет преимущественно в направлении вперед, поэтому фотодетектор может быть помещен под меньшим углом к исходящему лучу для увеличения чувствительности. При использовании ФЭУ или силиконовые фотодетекторы помещают под углом 70° к проходящему лучу света, в то время как в LED-системах угол расположения фотодиода по отношению к исходящему свету может широко варьировать: от 13 —24 до 90° Можно применять вертикальную схему измерения светорассеяния.