Активированное частичное тромбопластиновое время (APTT)

Подготовка: натощак.

Материал: цитратная бестромбоцитарная плазма.

Условия хранения: немедленно отцентрифугировать и отделить плазму; плазма стабильна в течение 1 часа при 40С или 28 дней в замороженном состоянии.

Норма: средние значения нормы указаны на паспорте на каждый набор (например: 21-35 сек по данным зарубежных авторов).

Условия хранения: плазму, отделенную немедленно после взятия крови, анализировать в течение 2 часов после сбора крови.

 

Определение АЧТВ – является одним из самых информативных и самых распространенных скрининговых тестов, который отражает изменение активности факторов внутреннего пути свертывания крови: VIII, IX, XI, XII, прекалликреина (фактор Флетчера) и высокомолекулярного кининогена. Тест чувствителен к дефициту всех факторов свертывания крови, кроме VII, гепарину, к специфическим и неспецифическим ингибиторам.

Внутренний путь свертывания происходит за несколько минут и осуществляется внутри кровеносных сосудов при повреждении эндотелия или при появлении чужеродной отрицательно заряженной поверхности. Процесс внутреннего свертывания начинается с активации «факторов контакта»: фактора XII (Хагемана), прекалликреина и высокомолекулярного кининогена, которые связываются с коллагеном или базальной мембраной эндотелия или с отрицательно заряженной чужеродной поверхностью, образуют комплекс и взаимно активируют друг друга, что выражается в изменении молекулярной структуры каждого компонента. Завершается процесс свертывания крови по обшей схеме (пути): Ха (в присутствии Vа) превращает протромбин в тромбин, тромбин превращает растворимый фибриноген плазмы крови в фибрин. Под действием ф.XIII происходит полимеризация фибрина.

По результатам теста АЧТВ определяют дефицит факторов внутреннего пути свертывания, наличие в крови ингибиторов этих факторов и антикоагулянтов. Тест используется для диагностики и дифференциальной диагностики гемофилии и для выявления волчаночного антикоагулянта.

Тест АЧТВ применяют при выборе антикоагулянта и для контроля за лечением больных с коронарной недостаточностью. Тест не улавливает нарушения в тромбоцитах, недостаточность проконвертина, фибринстимулирующего фактора и недостаток кальция в системе.

Удлинение теста АЧТВ может быть вызвано:

синдромом диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС);

заболеванием печени, где синтезируются почти все факторы свертывания крови;

массивными гемотрасфузиями;

введением гепарина;

дефицитом факторов внутреннего пути свертывания;

дефицитом витамина К;

присутствием ингибиторов свертывания, специфических и неспецифических;

наличием волчаночного антикоагулянта; наличием гемофилии.

Укорочение АЧТВ – признак развития тромбозов и синдрома ДВС.

 

[НОВИНКА!] АНТИТРОМБИН

Метод: хромогенный

Материал: цитратная плазма, цвет крышки – голубой.

Норма: 80 – 120 %, 150 – 400 мг/л.

 

Антитромбин III (АТ III) – гликопротеид, основной естественный первичный регулятор гемостатического механизма, ингибитор всех сериновых протеаз (тромбин, факторы IХа, Ха, ХIIа, калликреин, плазмин, урокиназа), вовлеченных в процесс свертывания крови, главный ингибитор тромбина и фактора X, на его долю приходится 80 – 90% антикоагулянтной активности крови. Антитромбин III не ингибирует фактор VIIа и не влияет на факторы в составе мембранных комплексов, а устраняет ферменты, находящиеся в плазме крови, препятствуя распространению тромбообразования в кровотоке. Антитромбин III является плазменным кофактором гепарина, образуя с ним быстродействующий комплекс, обладающий выраженными антикоагулянтными свойствами.

Дефицит антитромбина III может быть первичным (наследственным) и вторичным, связанным с определенным заболеванием или состоянием. Снижение уровня антитромбина III, являющееся фактором тромбогенного риска (снижение уровня АТ III до 50 – 80% ведет к значительному увеличению числа послеоперационных тромбозов), отмечается при ряде состояний и заболеваний:

При врожденной недостаточности и его аномалиях.

При атеросклерозе, в старческом возрасте;

В середине менструального цикла, в последние месяцы беременности;

В послеоперационном периоде;

При заболеваниях печени (хронические гепатиты, циррозы печени) уровень АТ III снижается пропорционально тяжести заболевания;

При ДВС-синдроме, являясь его ранним и важным лабораторным признаком. Поэтому при состояниях, чреватых развитием этого осложнения, целесообразно как профилактическое определение АТ III, так и определение его в качестве контроля за течением заболевания и проводимой терапией.

При введении гепарина АТ III снижается, так как соединяется с ним. Низкое содержание АТ III ведет к неэффективности терапии гепарином. Ослабление действия гепарина наблюдается при снижении АТ III до 50%; при снижении до 20% действие гепарина почти полностью прекращается. Наклонность к рецидивирующим тромбозам, особенно плохо поддающимся терапии гепарином, должна наводить на мысль на снижении АТ III. При терапии гепарином желательно проводить контроль за уровнем содержания АТ III.

При приеме пероральных контрацептивов и эстрагенов.

Наиболее частая причина снижения уровня АТ III – шоковые состояния, при которых резко падает продукция АТ III печенью и активируются его ингибиторы в крови.

У новорожденных.

При лечении кортикостероидами, L-аспарагиназой.

Повышение АТ III расценивается как фактор геморрагического риска и отмечается в следующих случаях:

При вирусном гепатите, холестазе, тяжелом остром панкреатите, раке поджелудочной железы.

При дефиците витамина К.

При приеме антикоагулянтов непрямого действия.

Во время менструации.

При лечении нестероидными анаболичными гормонами.

Входит в профили:

• В ожидании ребенка (первый триместр)
• В ожидании ребенка (третий триместр)
• Варикозное расширение вен
• Варикозное расширение вен

 

[Новинка!] Волчаночный антикоагулянт (LAC Screen)

Метод: клоттинговый

Материал: цитратная плазма, цвет крышки – голубой.

Норма: 0,8–1,2 усл. ед.

При назначении определения ВА необходимо отменить больному прием гепарина за 2 дня и отменить кумариновые препараты за 2 недели до взятия крови, так как присутствие этих препаратов в крови может давать ложноположительные результаты.

 

Волчаночный антикоагулянт. (ВА) относится к иммуноглобулинам класса IgG и представляет собой гетерогенную группу антител против отрицательно заряженных фосфолипидов. Свое название он получил в связи с тем, что оказывает влияние на фосфолипидзависимые коагуляционные тесты и впервые был выявлен у больных с СКВ. Уровень волчаночного антикоагулянта в плазме в норме – 0,8–1,2 усл. ед. Наличие ВА у больных можно заподозрить при необъяснимом удлинении АЧТВ, коагуляционных тестов со змеиным ядом, времени рекальцификации и в меньшей степени протромбинового времени при всех других нормальных показателях коагулограммы. ВА обычно обнаруживают по удлинению у больных АЧТВ, при этом они не имеют выраженных проявлений кровоточивости, в то же время у 30 % из них может развиваться тромбоз, т.е. имеется парадоксальная реакция – удлинение АЧТВ и развитие тромбоза. Механизм возникновения тромбоза у больных с ВА точно не установлен, однако известно, что антитела к фосфолипидам снижают продукцию простациклина эндотелиальными клетками за счет ингибирования фосфолипазы А2 и протеина S и, таким образом, создают предпосылки к тромбообразованию. В настоящее время ВА рассматривается как значительный фактор риска у больных с необъяснимыми тромбозами и часто обнаруживается при различных формах патологии, особенно при системных, аутоиммунных заболеваниях, АФС, у больных СПИДом (у 20–50 % больных), у женщин с привычными выкидышами и внутриутробной гибелью плода, у больных с осложнениями лекарственной терапии. Около 25–30 % пациентов с ВА имеют тромбоэмболии. Эпизоды церебральной ишемии могут быть результатом кардиоэмболии, развивающейся у пациентов с циркулирующим в крови ВА. ВА и антитела к кардиолипину обнаруживаются одновременно у 70 % больных с АФС. ВА выявляется при СКВ у 34–44 % больных, а среди больных, длительно получающих фенотиазин, – у 32 %. У пациентов с ВА в крови часто отмечаются ложноположительные результаты при исследовании на сифилис. Частота выявления ВА лучше коррелирует с тромбозами у больных, чем частота выявления антител к кардиолипину.

В некоторых случаях заболевания клапанов сердца, имеющие тенденцию к тромбозам и тромбоэмболиям, связанные с наличием ВА и антител к кардиолипину в крови больного, которые могут быть причиной деформаций клапанов ревматического типа и тяжелых поражений клапанов (растяжение слоев клапана тромбом).

Антитела к фосфолипидам являются одной из причин ишемических нарушений мозгового кровообращения, особенно у лиц молодого возраста. По данным литературы антитела к фосфолипидам выявляют у 2,4–46 % больных молодого возраста с ишемическими нарушениями мозгового кровообращения. Из всех больных с антителами к фосфолипидам антитела к кардиолипину обнаруживают у 60 % больных, волчаночный антикоагулянт у 75 %. Одновременно те и другие типы антител выявляют в 50–75 % случаев. Нарушения мозгового кровообращения, ассоциирующиеся с выработкой антител к фосфолипидам, имеют ряд клинических особенностей. Как правило, они начинаются в молодом возрасте (чаще заболевают женщины) и имеют тенденцию к рецидивированию. Рецидивы отмечают 35–70 % больных с ишемическими инсультами, поэтому таким больным показано не только длительное лечение антиагрегантами и антикоагулянтами непрямого действия, но и динамический контроль за уровнем антител к фосфолипидам.

Определение ВА и антител к кардиолипину для диагностики АФС показано всем пациентам, подверженным явлениям гиперкоагуляции (церебральный тромбоз, некроз кожи, связанный с приемом кумарина и др.), даже если АЧТВ у них не удлинено.

При оценке полученных результатов необходимо ориентироваться на следующие данные: если результат составляет 1,2–1,5 усл. ед., то ВА содержится в малых количествах, и его активность небольшая; если 1,5–2,0 усл. ед., то ВА обнаруживается в умеренном количестве, и вероятность развития тромбоза значительно возрастает; если более 2,0 усл. ед., то ВА имеется в большом количестве, и вероятность возникновения тромбоза у больного очень велика.

ВА является очень лабильным показателем и на него могут влиять очень многие факторы, поэтому ставить диагноз только при наличии ВА нельзя! Помимо определения ВА необходимо определить антитела к кардиолипину IgG и IgM. Для постановки диагноза антифофолипидного синдрома (АФС) необходимо наличие его критериев: достоверный артериальный или венозный тромбоз любой локализации (может быть в анамнезе), акушерская патология: повторная потеря морфологически нормального плода (антенатальная гибель на любом сроке гестации при отсутствии других причин), гестоз (преэклампсия или эклампсия); повышение титров антифосфолипидных антител минимум дважды с интервалом их определения 6 недель.

 

[НОВИНКА!] ВОЛЧАНОЧНЫЙ АНТИКОАГУЛЯНТ(КОНФИРМ. ТЕСТ)

Метод: клоттинговый

Материал: цитратная плазма, цвет крышки – голубой.

Норма: 0,8–1,2 усл. ед.

При назначении определения ВА необходимо отменить больному прием гепарина за 2 дня и отменить кумариновые препараты за 2 недели до взятия крови, так как присутствие этих препаратов в крови может давать ложноположительные результаты.

 

Волчаночный антикоагулянт. (ВА) относится к иммуноглобулинам класса IgG и представляет собой гетерогенную группу антител против отрицательно заряженных фосфолипидов. Свое название он получил в связи с тем, что оказывает влияние на фосфолипидзависимые коагуляционные тесты и впервые был выявлен у больных с СКВ. Уровень волчаночного антикоагулянта в плазме в норме – 0,8–1,2 усл. ед. Наличие ВА у больных можно заподозрить при необъяснимом удлинении АЧТВ, коагуляционных тестов со змеиным ядом, времени рекальцификации и в меньшей степени протромбинового времени при всех других нормальных показателях коагулограммы. ВА обычно обнаруживают по удлинению у больных АЧТВ, при этом они не имеют выраженных проявлений кровоточивости, в то же время у 30 % из них может развиваться тромбоз, т.е. имеется парадоксальная реакция – удлинение АЧТВ и развитие тромбоза. Механизм возникновения тромбоза у больных с ВА точно не установлен, однако известно, что антитела к фосфолипидам снижают продукцию простациклина эндотелиальными клетками за счет ингибирования фосфолипазы А2 и протеина S и, таким образом, создают предпосылки к тромбообразованию. В настоящее время ВА рассматривается как значительный фактор риска у больных с необъяснимыми тромбозами и часто обнаруживается при различных формах патологии, особенно при системных, аутоиммунных заболеваниях, АФС, у больных СПИДом (у 20–50 % больных), у женщин с привычными выкидышами и внутриутробной гибелью плода, у больных с осложнениями лекарственной терапии. Около 25–30 % пациентов с ВА имеют тромбоэмболии. Эпизоды церебральной ишемии могут быть результатом кардиоэмболии, развивающейся у пациентов с циркулирующим в крови ВА. ВА и антитела к кардиолипину обнаруживаются одновременно у 70 % больных с АФС. ВА выявляется при СКВ у 34–44 % больных, а среди больных, длительно получающих фенотиазин, – у 32 %. У пациентов с ВА в крови часто отмечаются ложноположительные результаты при исследовании на сифилис. Частота выявления ВА лучше коррелирует с тромбозами у больных, чем частота выявления антител к кардиолипину.

В некоторых случаях заболевания клапанов сердца, имеющие тенденцию к тромбозам и тромбоэмболиям, связанные с наличием ВА и антител к кардиолипину в крови больного, которые могут быть причиной деформаций клапанов ревматического типа и тяжелых поражений клапанов (растяжение слоев клапана тромбом).

Антитела к фосфолипидам являются одной из причин ишемических нарушений мозгового кровообращения, особенно у лиц молодого возраста. По данным литературы антитела к фосфолипидам выявляют у 2,4–46 % больных молодого возраста с ишемическими нарушениями мозгового кровообращения. Из всех больных с антителами к фосфолипидам антитела к кардиолипину обнаруживают у 60 % больных, волчаночный антикоагулянт у 75 %. Одновременно те и другие типы антител выявляют в 50–75 % случаев. Нарушения мозгового кровообращения, ассоциирующиеся с выработкой антител к фосфолипидам, имеют ряд клинических особенностей. Как правило, они начинаются в молодом возрасте (чаще заболевают женщины) и имеют тенденцию к рецидивированию. Рецидивы отмечают 35–70 % больных с ишемическими инсультами, поэтому таким больным показано не только длительное лечение антиагрегантами и антикоагулянтами непрямого действия, но и динамический контроль за уровнем антител к фосфолипидам.

Определение ВА и антител к кардиолипину для диагностики АФС показано всем пациентам, подверженным явлениям гиперкоагуляции (церебральный тромбоз, некроз кожи, связанный с приемом кумарина и др.), даже если АЧТВ у них не удлинено.

При оценке полученных результатов необходимо ориентироваться на следующие данные: если результат составляет 1,2–1,5 усл. ед., то ВА содержится в малых количествах, и его активность небольшая; если 1,5–2,0 усл. ед., то ВА обнаруживается в умеренном количестве, и вероятность развития тромбоза значительно возрастает; если более 2,0 усл. ед., то ВА имеется в большом количестве, и вероятность возникновения тромбоза у больного очень велика.

ВА является очень лабильным показателем и на него могут влиять очень многие факторы, поэтому ставить диагноз только при наличии ВА нельзя! Помимо определения ВА необходимо определить антитела к кардиолипину IgG и IgM. Для постановки диагноза антифофолипидного синдрома (АФС) необходимо наличие его критериев: достоверный артериальный или венозный тромбоз любой локализации (может быть в анамнезе), акушерская патология: повторная потеря морфологически нормального плода (антенатальная гибель на любом сроке гестации при отсутствии других причин), гестоз (преэклампсия или эклампсия); повышение титров антифосфолипидных антител минимум дважды с интервалом их определения 6 недель.

ВРЕМЯ КРОВОТЕЧЕНИЯ

Подготовка: не требуется

Материал: капиллярная кровь

Метод: рутинный

 

Время кровотечения - один из показателей активности физиологического механизма остановки кровотечения из мельчайших кровеносных сосудов. В. к. определяется длительностью кровотечения из поверхностного прокола или надреза кожи, который делают однотипно при каждом исследовании.

Время кровотечения – это лабораторный тест, характеризующий, с одной стороны, эластичность кровеносных сосудов и их способность к сокращению при травме, с другой стороны, состояние тромбоцитарной системы гемостаза.

Существует несколько методов определения В. к. Классическим методом является проба Дьюка: в нижненаружный край уха (в кончик пальца при модификации пробы Дьюка) иглой или пером-скарификатором производят укол на глубину около. 4 мм, после чего каждые 15-30 сек. фильтровальной бумагой, не касаясь ранки, снимают каплю крови; счет времени ведут от момента появления первой капли до остановки кровотечения. В норме кровотечение прекращается через 1-4 мин.

Увеличение времени кровотечения наблюдается при:

- выраженном недостатке тромбоцитов в крови (тромбоцитопении любого происхождения);

- нарушении функции тромбоцитов врожденного или приобретенного характера;

- длительном приеме некоторых лекарств (аспирина и других дезагрегантов, некоторых антибактериальных средств и др.);

- аутоиммунных заболеваниях;

- вакулитах;

- ДВС-синдроме.

Уменьшение времени кровотечения наблюдается при- повышенной спастической способности капилляров.

 

ВРЕМЯ СВЕРТЫВАНИЯ КРОВИ

Подготовка: не требуется

Метод: рутинный

Материал: капиллярная или венозная кровь

Норма: венозная кровь – 5 – 10 мин.

капиллярная кровь – начало: 30 сек. – 2 мин.

конец: 3 – 5 мин.

 

Свертывание крови - превращение жидкой крови в эластичный сгусток в результате перехода растворенного в плазме крови белка фибриногена в нерастворимый фибрин при истечении крови из поврежденного сосуда. Фибрин, полимеризуясь, образует тонкие нити, удерживающие кровяные тельца; таким образом, формируется сгусток, закупоривающий пораженное место сосуда. Тест применяется для выявления грубых нарушений гемостаза и широко используется при профилактическом обследовании, а также на предоперационном этапе.

 

Увеличение времени свертывания крови указывает на склонность к кровоточивости и наблюдается при:

- значительном дефиците плазменных факторов свертывания крови или их врожденной функциональной неполноценности;

- заболеваниях печени с нарушением ее функций;

- лечении гепарином, непрямыми антикоагулянтами;

- ДВС-синдроме (гипокоагуляционной фазе).

Уменьшение времени свертывания крови указывает на повышенный риск тромбообразования и наблюдается при:

- гиперкоагуляционной стадии ДВС-синдрома;

- тромбозах и тромбофилиях (состояниях с высоким риском активного тромбообразования);

- длительном применении таблетированных контрацептивов, гормональных препаратов, содержащих кортикостероиды и др.)

 

Д-ДИМЕРЫ

Метод: иммунохимический

Материал: цитратная плазма, цвет крышки – голубой.

Норма: < 0,5 мкг/мл.

 

D-димер - специфический продукт расщепления поперечно-сшитого (нерастворимого) фибрина плазмином.

Как известно, образование тромбина начинается с момента, когда под действием тромбина фибриноген превращается в фибрин, который образует основной каркас сгустка крови и тромба. Фибрин, который является конечным продуктом процесса свертывания крови, одновременно служит субстратом для плазмина - основного фермента фибринолиза. Фибринолитическая система в основном адаптирована к лизису фибрина и растворимых фибрин-мономерных комплексов, но при чрезмерной активации фибринолиза возможен лизис фибриногена. Плазмин вызывает последовательное асимметричное расщепление фибриногена и фибрина на все более и более мелкие фрагменты, обозначаемые как продукты деградации фибриногена/фибрина. В отличие от конечных продуктов расщепления фибриногена, которые представлены в виде отдельных фрагментов D и E, при расщеплении поперечно-сшитых фактором XIIIа волокон фибрина образуются более крупные фрагменты - D-димеры, тримеры D- Е- D, поскольку плазмин не способен разрезать ковалентную связь между D-доменами.

Повышенное содержание фрагмента фибриногена D-димера является одним из главных маркеров активации системы гемостаза, поскольку отражает как образование фибрина в исследуемой крови, так и его лизис.

Выявление в плазме крови D-димера свидетельствует об активации в ней фибринолиза, которой предшествует усиление коагуляционного каскада с избыточным образованием нерастворимого фибрина. Определение в плазме D-димера используется для исключения тромбоза и диагностики ДВС-синдрома. Если концентрация D-димера в плазме менее 0,5 мкг/мл, наличие тромбоза (легочной артерии, глубоких вен и др.) у больного можно исключить.

Причины повышенного уровня D-димера

Тромбоз глубоких вен и тромбоэмболия легочной артерии.

К повышению уровня D-димера могут привести:

- диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови;

- тромболитическая терапия;

- онкологические заболевания;

- инфекционные заболевания;

- активные воспалительные процессы;

- болезни печени;

- ишемическая болезнь;

- обширные гематомы;

- возраст старше 80 лет;

- беременность;

- инфаркт миокарда..

Причины отрицательных результатов теста на D-димер при тромбозе

Уровень D-димера, не превышающий пороговое значение, редкое явление у больных с тромбозом (менее 2% случаев). В основном это может быть обусловлено следующими причинами:

- малым размером тромба;

- запоздалым исследованием;

- при ложно положительных инструментального исследования;

- за счет ошибки на преданалитическом этапе (хранение образцов плазмы более 6 часов);

- при снижении фибринолитической активности за счет или дефицита тканевого активатора плазминогена (tPA) или высокого уровня ингибитора активатора плазминогена PAI-I).

ПРОТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ (PТ) + ФИБРИНОГЕН

Протромбиновое время

Подготовка: натощак

Материал: цитратная плазма.

Условия хранения: проба стабильна 2 часа при комнатной температуре, 4 часа - при +40С.

Нормальные значения:

ПВ (протромбиновое время) – 15-20 сек

ПИ (протромбиновый индекс) – 90-105%

ПО (протромбиновое отношение) – 0,9-1,1

Протромбин по Квику в % 70-130%

 

У пациентов, принимающих варфарин, МНО должно составлять 2,0-3,0. У больных с протезированными клапанами величину МНО поддерживают на уровне 2,0-3,5.

Внешняя система гемокоагуляции резервная, мобилизируется организмом при чрезвычайных обстоятельствах, свертывание происходит очень быстро – за 15-20 сек. Из поврежденных тканей выделяется так называемый тканевой фактор (ТФ), гликопротеин, который является компонентом мембран. Тканевой фактор образует комплекс с циркулирующим в крови ф.VII, этот комплекс активирует ф.Х, который вместе с активированным ф.V, фосфолипидами, в присутствии ионов кальция превращает неактивный протромбин плазмы крови в активный фермент тромбин, образующий из растворимого плазменного белка фибриногена (при участии ф.ХIII) фибриновый сгусток.

Внешний путь свертывания принято in vitro моделировать тестом протромбинового времени. Протромбиновый тест был предложен в 1935 г. А.Quik с целью определения в системе in vitro активности протромбина – ф.II свертывания крови. Позднее было установлено, что этим тестом определяется активность нескольких факторов свертывания крови (факторов протромбинового комплекса): ф.II (протромбин), ф.VII (проконвертин), ф.Х (Стюарта) и ф.V (проакцелерин). При этом ф.VII является фактором только внешнего пути свертывания, остальные факторы участвуют и во внутреннем пути. Все факторы протромбинового комплекса являются витамин К-зависимыми протеиназами, т.к. их активация присходит только при участии витамина К.

Ф.V – гликопротеин, ф.VII – гликопротеин, витамин К-зависимая протеиназа, ф.Х – витамин К-зависимая протеиназа.

Пртромбиновое время выражают:

в секундах по сравнению с нормой;

как протромбиновое отношение (ПО), отношение протромбинового времени больного к пртромбиновому времени здорового;

как протромбиновый индекс (ПИ), отношение протромбинового времени здорового к протромбиновому времени больного в процентах;

как протромбиновая активность в процентах по Квику, по калибровочному графику, построенному в результате измерения протромбинового времени в разведенных растворах нормальной плазмы;

Для определения МНО (Международного нормализованного отношения – INR на английском языке), необходимо знать Международный индекс чувствительности – МИЧ (ISI – английская аббревиатура от International Sensitivity Index) тромбопластина. При возведении значения протромбинового отношения (ПО) в степень МИЧ, будет получено значение МНО: МНО=ПОМИЧ.

Расчет МНО позволяет клиницисту контролировать уровень антикоагулянтной терапии

Удленение протромбинового времени связано с:

введением пероральных антикоагулянтом;

заболеванием печени (цирроз печени, гепатит);

дефицитом витамина К;

ДВС;

наследственным дефицитом протромбина, ф.VII, X или V;

массивное переливание крови.

Укорочение протромбинового времени связано с опасностью тромбозов.

ФИБРИНОГЕН

Подготовка: натощак.

Материал: цитратная плазма

Норма: 1.8-4.0 г/л.

 

Оценка третьей фазы плазменного гемостаза – образование фибрина.

Фактор I свертывания крови – фибриноген – является гликопротеином и находится в растворенном состоянии в плазме крови и в тканях всех позвоночных животных.

Молекула фибриногена состоит из 6 полипептидных цепей. Образование из растворимого фибриногена нерастворимого полимера фибрина представляет собой высокоорганизованную последовательность взаимодействия целого ряда веществ. Установлено, что тромбин отщепляет от молекулы фибриногена А и В фибринопептиды, оставшиеся фибрин-мономеры начинают полимеризоваться, образуя сначала димеры, потом тетрамеры, олигомеры и так далее до образования полимера растворимого фибрина. В последней стадии растворимый стабилизируется ковалентными связями под действием ф.XIII, и становится нерастворимым.

Фибриноген синтезируется в печени и имеет много функций: принимает участие, как в свертывании крови, так и в агрегации тромбоцитов, определяет вязкость крови и влияет на взаимодействие форменных элементов крови с сосудистой стенкой. Фибриноген – это белок острой фазы, его концентрация увеличивается при острых ситуациях: травме, инфекции, воспалении, операции и т.п. Концентрация фибриногена увеличивается с возрастом, при ожирении, у больных атеросклерозом, сахарным диабетом, у курящих, при инфаркте миокарда, канцерогенезе, нефрозе. Возрастание в крови содержание фибриногена приводит к риску возникновения атеросклероза коронарных, мозговых и внемозговых артерий и к увеличению смертности.

Выраженное прогрессивное снижение концентрации фибриногена наблюдается во II-III стадиях острого ДВС-синдрома

 

ПРОТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ (РТ)

Подготовка: натощак

Материал: цитратная плазма.

Условия хранения: проба стабильна 2 часа при комнатной температуре, 4 часа - при +40С.

Нормальные значения:

ПВ (протромбиновое время) – 15-20 сек

ПИ (протромбиновый индекс) – 90-105%

ПО (протромбиновое отношение) – 0,9-1,1

Протромбин по Квику в % 70-130%

У пациентов, принимающих варфарин, МНО должно составлять 2,0-3,0. У больных с протезированными клапанами величину МНО поддерживают на уровне 2,0-3,5.

 

Внешняя система гемокоагуляции резервная, мобилизируется организмом при чрезвычайных обстоятельствах, свертывание происходит очень быстро – за 15-20 сек. Из поврежденных тканей выделяется так называемый тканевой фактор (ТФ), гликопротеин, который является компонентом мембран. Тканевой фактор образует комплекс с циркулирующим в крови ф.VII, этот комплекс активирует ф.Х, который вместе с активированным ф.V, фосфолипидами, в присутствии ионов кальция превращает неактивный протромбин плазмы крови в активный фермент тромбин, образующий из растворимого плазменного белка фибриногена (при участии ф.ХIII) фибриновый сгусток.

Внешний путь свертывания принято in vitro моделировать тестом протромбинового времени. Протромбиновый тест был предложен в 1935 г. А.Quik с целью определения в системе in vitro активности протромбина – ф.II свертывания крови. Позднее было установлено, что этим тестом определяется активность нескольких факторов свертывания крови (факторов протромбинового комплекса): ф.II (протромбин), ф.VII (проконвертин), ф.Х (Стюарта) и ф.V (проакцелерин). При этом ф.VII является фактором только внешнего пути свертывания, остальные факторы участвуют и во внутреннем пути. Все факторы протромбинового комплекса являются витамин К-зависимыми протеиназами, т.к. их активация присходит только при участии витамина К.

Ф.V – гликопротеин, ф.VII – гликопротеин, витамин К-зависимая протеиназа, ф.Х – витамин К-зависимая протеиназа.

Пртромбиновое время выражают:

в секундах по сравнению с нормой;

как протромбиновое отношение (ПО), отношение протромбинового времени больного к пртромбиновому времени здорового;

как протромбиновый индекс (ПИ), отношение протромбинового времени здорового к протромбиновому времени больного в процентах;

как протромбиновая активность в процентах по Квику, по калибровочному графику, построенному в результате измерения протромбинового времени в разведенных растворах нормальной плазмы;

Для определения МНО (Международного нормализованного отношения – INR на английском языке), необходимо знать Международный индекс чувствительности – МИЧ (ISI – английская аббревиатура от International Sensitivity Index) тромбопластина. При возведении значения протромбинового отношения (ПО) в степень МИЧ, будет получено значение МНО: МНО=ПОМИЧ.

Расчет МНО позволяет клиницисту контролировать уровень антикоагулянтной терапии

Удленение протромбинового времени связано с:

введением пероральных антикоагулянтом;

заболеванием печени (цирроз печени, гепатит);

дефицитом витамина К;

ДВС;

наследственным дефицитом протромбина, ф.VII, X или V;

массивное переливание крови.

Укорочение протромбинового времени связано с опасностью тромбозов.

 

ТРОМБИНОВОЕ ВРЕМЯ (ТТ)

Подготовка: натощак.

Материал: цитратная плазма

Норма: 15±1 сек.

Условия хранения: плазму крови использовать для анализов только в течение 2 часов после забора крови, хранению не подлежит.

 

Тромбиновое время характеризует конечный этап процесса свертывания – превращения фибриногена в фибрин под действием тромбина, на него влияет концентрация фибриногена и наличие продуктов деградации фибрина. По продолжительности тромбинового времени нельзя диагностировать синдром ДВС и первичный фибринолиз.

Тромбин – это витамин К зависимая протеиназа. Тромбин имеет много функций: он активирует кофакторы V и VIII, активирует ф. XI, способствует агрегации и дезинтеграции тромбоцитов, активирует ф.XIII, и только тромбин превращает растворимый фибриноген плазмы в нерастворимый фибрин.

Удлинение тромбинового времени может быть вызвано: молекулярными аномалиями и снижением уровня фибриногена (< 1,0 г/л), избытком в крови гепарина в результате гепаринотерапии, накоплением продуктов деградации фибрина, парапротеинемией, наследственной и приобретенной дисфибриногенемией, наследственной и приобретенной дисфибриногенемией, наличием ингибиторов тромбина и фибриногена.

Для дифференциальной диагностики проводят количественное определение фибриногена, продуктов деградации фибрина, пробу с протаминсульфатом и др., позволяющие уточнить диагноз. Образование сгустка не происходит в терминальной стадии ДВС-синдрома, а также при внутривенном введении большой дозы гепарина.

Определение тромбинового времени проводится с целью дифференциальной диагностики коагулопатий, связанных с ингибированием активности тромбина, снижение уровня фибриногена ниже 1,0 г/л, с недостаточностью процесса полимеризации фибрина и для наблюдения за результатами проводимого лечения (гепаринотерапия, введение стрептокиназы и т.п.).

Удлинение тромбинового времени происходит при:

гипофиброгенемии, связанной с ДВС или наследственной или приобретенной патологией;

повышенной концентрации продуктов деградации фибриногена/фибрина;

присутствии в крови гепарина; с парапротеинемией; с наличием в крови ингибиторов тромбина или фибриногена; дисфибриногенемии, связанной с заболеванием печени или при наследственной паталогии.

Укорочение тромбинового времени свидетельствует о риске тромбозов.

 

[НОВИНКА!] ТРОМБОКСАН В2 (ТХВ2)

Метод: ИФА.

Материал для исследования – сыворотка (малиновая крышка).

Норма: 300 – 700 нг/мл.

 

Тромбоксан В2 – стабильный конечный продукт метаболизма арахидоновой кислоты.

В организме арахидоновая кислота, находящаяся в связанном виде в фосфолипидном пуле клеточных мембран, высвобождается при активации клеточных липаз мембраны тромбоцитов и прежде всего фосфолипазы А2, активируемой тромбином и другими стимуляторами тромбоцитов. Свободная арахидоновая кислота подвергается дальнейшему метаболизму при участии двух ферментов: липооксигеназы и циклооксигеназы. Эти два механизма, независимые друг от друга, ингибируются различными ингибиторами и ведут к образованию разных по структуре и биологической функции продуктов.

Циклооксигеназа присутствует во всех органах и тканях. Под действием этого фермента в результате специфической энзиматической циклизации молекулы кислоты образуются нестабильные промежуточные соединения - циклические эндоперекисли PGD2 и PGH2, которые затем трансформируются в простагландины Е2, D2, F2α, тромбоксаны (ТХА2 и ТХВ2) и конечные продукты с непростагландиновой структурой.

Тромбоксаны – семейство карбоксильных кислот, продуктов метаболизма эндоперекисей PGG2 и PGH2 в тромбоцитах животных и человека. Свое название получили благодаря их преимущественному синтезу в тромбоцитах и оксановой структуре молекулы. Вначале из тромбоцитов человека и легких морской свинки выделили ТХВ2 – С20-карбоксильную кислоту, содержащую оксановое кольцо, затем ее непосредственный предшественник ТХА2 - С20-карбоксильную кислоту с оксатено-оксановой структурой.

ТХА2 – главный продукт метаболизма простагландинов в тромбоцитах. В тромбоцитах большая часть PGH2 (80%) превращается в ТХВ2, меньшая (20%) – в малондиальдегид и ННТ. Это чрезвычайно нестабильные соединения, обладающие высокой биологической активностью: ТХА2 является мощным агрегантом тромбоцитов, тем самым стимулируя свертывание крови, и вазоконстриктором in vitro и in vivo, еще более активными, чем PGH2. ТХВ2 – продукт спонтанной деградации ТХА2, более стабильный, но менее активный.

Превращение эндоперекисей простагландинов в тромбоксаны и последующее превращение ТХА2 в конечный продукт ТХВ2 осуществляются ферментной системой. Она включает два выделенных фермента: циклооксигеназа (простагландин-эндопероксид-синтетаза), катализирующую превращение PGG2 и PGH2 в ТХА2, и тромбоксансинтетазу, под действием которой ТХА2 превращается в более стабильное, но менее активное соединение - ТХВ2.

Таким образом, синтез тромбоксана А2 из арахидоновой кислоты приводит к полной активации тромбоцитов, экзоцитозу и агрегации, а определение его конечного продукта тромбок