Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Производные барбитуровой кислотыСодержание книги
Похожие статьи вашей тематики
Поиск на нашем сайте
Барбитураты — сильные снотворные и седативные средства. Имеют кето-енольную и лактим-лактамную таутомерию Пробоподготовка. Изолирование из органов трупа. 1. Общие методы · Изолирование нейтральным ацетоном · Метод Васильевой · Метод Стаса-Отто 2. Частные методы · Метод Валова 100 г измельченного биологического материала + 180 мл воды и 20 мл 10 %-го раствора гидроксида натрияà 30 мин при частом перемешиванииà центрифугируют 30 минà надосадочная жидкость + 120 мл 10 %-го раствора вольфрамата натрия и 1 н. раствор серной кислоты (до рН=2)à нагревают на кипящей водяной бане 20 минà центрифугированиеà центрифугат процеживают через ватный тампонà собирают в делительную воронку + диэтиловый эфирàэфирный слой + 50 мл 10%-го гидроксида натрияà водный слой отделяют + 25 %-ным раствор серной кислоты до рН=2 + диэтиловый эфирà эфирная вытяжка · Метод Швайковой 100 г измельченных органов трупов + 200 мл воды + раствор щавелевой кислоты до рН=2 à 2 ч при перемешиванииà центрифугируют 30 минà центрифугат процеживают через ватный тампон + хлороформ в течение 5 мин (3 раза)à вытяжки соединяют + 25 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия àхлороформная вытяжка + вода + соляная кислота до рН=2 + две порции хлороформа (по 20 мл) 5 минàхлороформная вытяжка. · Метод Попова 100 г измельченного биологического материала + 80 мл р-ра серной кислоты до рН=2...3à настаивают 2 ч при перемешиванииà биологический материал еще 2 раза настаивают с новыми порциями раствора серной кислоты 1 ч. à водные вытяжки процеживают через марлю и центрифугируютà центрифугат сливают с осадка и очищают от примесей методом гель-хроматографииà барбитураты + хлороформ в течение 7 мин à хлороформные вытяжки на водяной бане при 70 °С отгоняют и выпаривают досуха.
Очистка полученного извлечения. Метод экстракции. Основан на способности фенобарбитала практически не растворяться в органических растворителях в лактимной форме. В лактамной форме он легко переходит в органический слой. Метод заключается в многократной реэкстракции препарата при различных значениях pH из водного в органический слой и наоборот. Колоночная хроматография. Очистка вытяжки из биологического материала проводится с использованием колоночной хроматографии. В методе применяются колонки с окисью алюминия. Колонка – мерная пипетка на 10 мл, обрезанная с конца слива. Сорбент смачивают 1-2 мл растворителя - смесь хлороформа и 25% аммиака. Органический экстракт выпаривают в чашечке. Остаток растворяют в минимальном количестве растворителя – хлороформа - переносят в колонку. Затем колонку промывают для удаления соэкстрактивных веществ 8-10 мл хлороформа с добавлением аммиака. Фенобарбитал вымывают из колонки 4-5 мл 0,1 н щелочи (NaOH). Вытекающий из колонки раствор щелочи собирают, доводят до pH=1-2 раствором соляной кислоты и экстрагируют барбитурат хлороформом.
Предварительный этап (ТСХ-скрининг) 1) Исследование в общих системах растворителей НФ – силикагель ПФ - ацетон:хлороформ (1:9) Длина пробега растворителя – 10 см Время насыщения камеры парами растворителя – 15 – 20 мин Д: • дифенилкарбазоном (ДФК) – 0,1% раствор в хлороформе и раствором сульфата ртути – 5% раствор в концентрированной серной кислоте. Исследуемое соединение оказывается во второй хроматографической зоне (барбитураты): Rf=0,31 – 0,41
Непроявленный слой сорбента с анализируемым веществом элюируют ацетоном. 2) исследование в частных системах растворителей НФ – силикагель КСК, забуференный 0,1н раствором борной кислоты. ПФ – хлороформ:н-бутанол:25% раствор аммиака (70:40:5) Время насыщения камеры парами растворителя – 10 мин Высота поднятия фронта растворителя – 10 см Д: • дифенилкарбазоном (ДФК) – 0,1% раствор в хлороформе и раствором сульфата ртути – 5% раствор в концентрированной серной кислоте. Исследуемое соединение оказывается во второй хроматографической зоне (барбитураты): Rf фенобарбитала = 0,4 Характеристикой каждого вещества при (ТСХ) служит значение Rf: Длина пробега вещества от старта Rf = -------------------------------------------------------------------------------------------------------- Длина пробега растворителя от старта Сравниваются значения Rf соединения, находящегося в образце, со значением Rf вещества сравнения. Проведение гомогенного ИФА мочи. Используют следующий набор диагностикума: Реагенты: 1. Реакционная виала, содержащая: • антитело на фенобарбитал • кофермент НАД • конъюгат (фенобарбитал, меченный глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой) • хромогенное вещество • буфер • консервант
2. Негативный контроль (холостой образец – моча человека, в которой заведомо нет фенобарбитала, с консервантом – азидом натрия) 3. Позитивный контроль. Контрольный образец, содержащий 1 мкг/мл фенобарбитала, лиофилизированную мочу человека и азид натрия 4. Калибратор. Контрольный образец, содержащий фенобарбитал в концентрации 0,5 мкг/мл. Проведение анализа. 1 Отбор и хранение биообразцов. Образцы мочи отбирают в пластиковые или стеклянные контейнеры. 2. Анализ. • приготовление калибратора и контролей • контроль температуры – 22 – 25С • включение спектрофотометра • мочу помещают в виалу, виалу – в держатель и проводят СФ. 3. Интерпретация результатов 1. Цветные реакции · + изопропиламин и соли Co (р-в Пари) -> фиолетовое · + соли Co и щелочь -> розовое · + мурексидная проба -> розовое · + родамин -> оранжевое (слой в хлороформе) · + пиридин и соли Cu -> аморфный осадок
2. УФ – спектроскопия Вытяжка из биоматериала -> упаривание -> сухой остаток + вода · + NH4OH -> спектр при 240нм (фенобарбитал, барбитал) · + H2SO4 -> спектр не должно быть максимума 290нм – для тиобарбитуратов · + NaOH -> спектр при 240нм (фенобарбитал, барбитал) 305нм – для тиобарбитуратов
Количественное определение ГЖХ-анализ Условия газохроматографического анализа Газовый хроматограф с термоаэрозольным детектором (ТАД) или с беспламенным азотно-фосфорным детектором (NPD). Колонка стеклянная, силанизированная, длиной 1 м, внутренний диаметр 2 - 3 мм. Сорбент - 3%-ный SE-30 на хромосорбе W (HP)- 80 - 100 меш. Скорость газа-носителя - 45 мл/ мин азота для ТАД и 40 мл/мин гелия для NPD. Температура детектора 300ºС. Температура испарителя 250ºС. Температура термостата колонки изменяется по линейной программе от 130 до 290ºС со скоростью 20ºС в минуту. Выдерживание при конечной температуре занимает до 15 минут общего анализа. Объем вводимой пробы - 2,5 мкл. Подготовка пробы: 0,2 мл плазмы/мочи + 1,3 мл воды и ацетатного буфера + смесь этилацетат/диэтиловый эфир à встряхивание 5 минут à центрифугирование à отделение органики à упаривание + ТМАГ à метилирование барбитуратов ВЭЖХ -анализ Условия хроматографирования: • хроматограф жидкостный • хроматографическая колонка (6282 мм), заполненная обращено-фазным сорбентом Сепарон • подвижная фаза - элюент - смесь 0,05М водного раствора двузамещенного фосфата аммония и метанола (60:40) • скорость потока элюирования - 100 мкл/мин • детектирование - при длине волны 240 нм.
Подготовка пробы: кровь/моча + стандарт + вода + ацетатный буфер à перемешивание à центрифугирование à упаривание органики à анализ
Приготовление стандартных образцов. Для приготовления эталонных растворов используется чистые субстанции барбитала, фенофарфитала, циклобарбитала, барбамила и этаминала натрия. Эти растворы служат для идентификации указанных веществ, определения их хроматографических параметров, а также для приготовления контрольных растворов при проведении количественных анализов. Градуировка хроматографа проводится по фенобарбиталу, барбамилу и этаминалу натрия. Качественный анализ. Идентификация проводится следующим образом: • сопоставляют время удерживания и коэффициент емкости определяемого компонента и образца сравнения - фенобарбитала; • сравнивают УФ-спектры предполагаемого компонента и образца сравнения; • оценивают совпадение значений времени удерживания определяемого • сопоставляют УФ-спектры определяемого компонента и образца сравнения при двух длинах волн, и оценивается их спектральное отношение. Концентрация определяемого вещества (Ci) в растворе экстракта из биопробы определяется по формуле где Ck - концентрация "добавки" в растворе подвижной фазы; Vk - объем добавленного контрольного раствора; Vi- объем раствора экстракта с определяемым веществом; hi - высота сигнала определяемого вещества в растворе экстракта из биопробы; hi+k - высота сиrnала определяемого вещества после добавки в раствор экстракта контрольного раствора. Метод внешнего стандарта В соответствии с методом внешнего стандарта и с учетом линейности зависимости выходного сигнала от массы вещества последовательно, с анализом раствора экстракта биопробы, проводят анализ контрольного раствора идентифицированного вещества. концентрация контрольного раствора (Ck) должна быть близка к концентрации определяемого вещества в растворе экстракта. Анализы контрольного раствора и экстракта биопробы должны проводитьсяв одном масштабе регистрации. Концентрация определяемого вещества в растворе экстракта (Ci) рассчитывается по формуле Ci = Ck*hi/Hk, где Ck - концентрация контрольного раствора; hi- высота сигнала определяемого наркотического вещества в растворе экстракта биопробы; hk - высота пика вещества контрольного раствора. Метод внутреннего стандарта В соответствии с методом внутреннего стандарта в биообьект до операции пробоподготовки добавляется известное количество вещества, принятого за стандарт. В анализе барбитуратов в количестве внутренних стандартов рекомендуется использовать одно изследующих веществ: апробарбитал, метилфенобарбитал, фенилubдантоин и другне вещества, которые в данных условиях xpoмaтoграфического разделения должны полностью отделяться от других компонентов образца, должны элюироваться близко к пику анализируемого соединения, не реагировать с другими компонентами, т.е. удовлетворять требованиям, предъявляемым к внутреннему стандарту. Можно использовать одновременно два и более внутренних стандарта. Концентрация определяемогo вещесгва (CI) рассчитывается по формуле Ci = Cbc * Hi /Hbc *1/Fi/bc, где Свс - концентрация внутреннего стандарта; hi - высота пика (или площадь) определяемого вещества; hвс - высота пика (или площадь) стандарта; Fi/вc - относительный калибровочный фактор. Относительный калибровочный фактор компонента Fi/вc вычисляется по формуле Fi/bc = Hi * Cbc/Ci * Hbc, где hl- высота пика (или площадь) компонента известной концентрации (калибровочный раствор); CI - концентрация калибровочного раствора определяемого компонента; hвс - высота пика (или площадь) внутреннего стандарта; Сbc - концентрация внутреннего стандарта УФ-спектрофотометрия. Спектрофотометрическое определение основано на способности фенобарбитала к лактим-лактамной (амидоимидольной) таутомерии. При pH=2,0 барбитурат находится в растворе в лактамной форме, не обладающей специфической абсорбцией в пределах 200-300 нм. При pH=10,0 образуется монолактимная форма, в гетероциклическом ядре возникает двойная связь, наблюдается поглощение при 240 нм. При pH=13 и выше в растворе присутствует дилактимная форма с двумя двойными связями в кольце. Абсорбция наблюдается при 255-260 нм. Для определения рекомендованы методы прямого и дифференциального спектрофотометрирования. Прямая СФМ: проводится при pH=10 и 240 нм. Дифференциальные методы: - при pH=2,0-10,0 и 239 нм - если исследуются внутренние органы трупа; - при pH=10,0-13,0 и 260 нм - если исследуется кровь и моча. Дифференциальные методы дают более надежные результаты, т.к. исключают влияние посторонних веществ, экстрагируемых хлороформом из кислого раствора вместе с фенобарбиталом. УФ-спектральные характеристики фенобарбитала: при pH = 9,2 наблюдается поглощение при 239 нм (εа = 452); при pH = 13,0 поглощение при 254 нм (εа = 342). Для расчета содержания барбитурата пользуются калибровочным графиком или значениями показателя удельного поглощения. В сочетании с хроматографией метод УФ-спектрофотометрии является достаточно специфичным, быстрым и чувствительным. Определяются микрограммовые количества фенобарбитала. Фенобарбитал Депрессант центральной нервной системы. Кристаллическое вещество с температурой плавления 245°. Вещество кислого характера, pKa=7,3. Плохо растворимо в воде, хорошо растворимо в этаноле и в водных растворах щелочей. УФ-спектр имеет два максимума поглощения при щелочных значениях pH (при pH=9,2 λнм=239; при pH=13,0 λнм=254). ИК-спектр имеет следующие характеристические частоты: 1684, 1712, 1770, 1310. Соединение быстро всасывается после орального введения, экскретируется в неизменном виде до 30%. Препарат пролонгированного действия (10-18 часов), период полувыведения 3 дня. Фенобарбитал используется как снотворное и противосудорожное средство. Фенобарбитал дает длительный сон, мало изменяется в организме и выводится в значительной степени почками в неизменном состоянии. В относительно больших дозах фенобарбитал способен вызывать смертельное отравление. (0,6 – 1 г.). ВРД 0,2, ВСД 0,5. В организме человека фенобарбитал подвергается, в основном, в печени ряду превращений: 1) Окислению одного из радикалов 2) Окислению до кислот и кетонов 3) Десульфированию 4) Демитилированию 5) Гидролизу Метод Валова 100 г измельченного биологического материала + 180 мл воды и 20 мл 10 %-го раствора гидроксида натрияà 30 мин при частом перемешиванииà центрифугируют 30 минà надосадочная жидкость + 120 мл 10 %-го раствора вольфрамата натрия и 1 н. раствор серной кислоты (до рН=2)à нагревают на кипящей водяной бане 20 минà центрифугированиеà центрифугат процеживают через ватный тампонà собирают в делительную воронку + диэтиловый эфирàэфирный слой + 50 мл 10%-го гидроксида натрияà водный слой отделяют + 25 %-ным раствор серной кислоты до рН=2 + диэтиловый эфирà эфирная вытяжка Подтверждающие исследования Цветные реакции: • с аммиачным раствором нитрата или ацетата кобальта. При наличии барбитуратов появляется розово-фиолетовое окрашивание. • мурексидная проба. Через некоторое время по краям сухого остатка появляется розовое и красное окрашивание, которое становится интенсивней при смачивании остатка 25% раствором гидрата окиси аммония. Микрокристаллоскопические реакции: • перекристаллизация: на предметное стекло помещают сухой остаток. Через 24 часа наблюдают форму осадка – сферолиты, в виде «ежиков». • с железоиодидным комплексом. Раствор хлорида окисного железа + концентрированная соляная кислота + калия иодид. Через 10 минут наблюдают образование сростков кристаллов.
Бензонал Кристаллическое вещество с температурой плавления 137°. Вещество кислого характера, pKa=7,3. Бензонал трудно растворяется в воде и этиловом спирте, легче — в диэтиловом эфире, хлороформе и диметилформамиде. Экстрагируется органическими растворителями из кислых водных растворов. Бензонал в основном применяется для лечения судорожных форм эпилепсии. Иногда он применяется для лечения больных, страдающих припадками, не сопровождающимися судорогами. ВРД 0,3, ВСД 0,6. Метаболитами бензонала являются бензойная кислота и фенобарбитал, который, в свою очередь, подвергается метаболизму. Бензонал и его метаболиты в основном выделяются с мочой.
Выделение бензонала из биологического материала. 100 г измельченного биологического материала + 10 мл р-ра соляной кислоты + 50 г сульфата аммонияà перемешивают + 200 мл смеси равных объемов этилового спирта и хлороформаà настаивают 2 ч при перемешиванииàвытяжку сливают и фильтруют через плотный бумажный фильтрà промывают смесью этилового спирта и хлороформа (1: 1)à водную фазу, насыщенную сульфатом аммония, отделяют и не исследуют. Слой органических растворителей выпаривают досуха + 200 мл горячей воды àперемешивают и фильтруютà + три порции хлороформаàхлороформные вытяжки + фосфатный раствор (рН = 7,4) à хлороформный слой фильтруют через бумажный фильтрà хлороформную вытяжку используют для идентификации и количественного определения бензонала. Поскольку бензонал частично разлагается в организме на фенобарбитал и бензойную кислоту, наличие последней определяют в водной фазе. С этой целью водную фазу подкисляют раствором соляной кислоты (1: 1) до рН = 2 и взбалтывают с 10 мл хлороформа. От водной фазы отделяют хлороформную вытяжку, которую исследуют на наличие бензойной кислоты. Подтверждающие исследования 1. Бензонал с изопропиламином и солями кобальта дает фиолетовую окраску 2. С солями кобальта и щелочами бензонал дает сине-фиолетовую окраску 3. Бензонал можно обнаружить по форме кристаллов, которые образуются после прибавления к нему метилового спирта и концентрированной соляной кислоты. Через несколько минут в поле зрения под микроскопом появляются ромбической формы кристаллы или сростки из них. 4. Обнаружение методом хроматографии. НФ: силикагель ПФ: хлороформ:н-бутанол:25% раствор аммиака Д: 0,02 %-м хлороформным раствором дифенилкарбазида, затем раствором сульфата ртути. Пятна бензонала на пластинке имеют Rf =* 0,40...0,45. 10. При наличии барбамила пятна на хроматограмме приобретают сине-фиолетовую или красно-фиолетовую окраску.
Гексенал Хорошо растворяется в воде, этиловом спирте и хлороформе, слабо — в диэтиловом эфире. Гексенал экстрагируется органическими растворителями из кислых водных растворов. Гексенал проявляет снотворное действие, а в больших дозах он имеет наркотические свойства. Его применяют для наркоза в сочетании с оксидом азота (I), фторотаиом и с некоторыми другими веществами. Гексенал и сам может применяться для кратковременного наркоза (продолжительностью 15—20 мин). Гексенал относится к барбитуратам короткого периода действия. В организме он подвергается метаболизму несколькими путями: · Гидроксилирование циклогексильной группы à окисление с образованием 3'-кетогексабарбитала à N-деметилирование. · N-деметилирования при атоме азота в третьем положенииà норгексабарбитал. · Определенное количество гексенала, поступившего в организм, метаболизируется путем разрыва цикла барбитуровой кислоты.
Подтверждающие исследования 1. От прибавления солей кобальта и изопропиламина к гексеналу появляется фиолетовая окраска. 2. Гексенал с солями кобальта и щелочью дает розовую или красную окраску. 3. От прибавления концентрированной серной кислоты к гексеналу образуется осадок, состоящий из сростков игольчатых кристаллов. 4. Гексенал с подкисленным спиртовым раствором иодида калия образует кристаллический осадок. 5. Обнаружение гексенала по УФ-спектрам. Гексенал в ходе В ИК-области спектра гексенал (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1712, 1660, 1390, 1358 см-1,
Тиопентал-натрий
Легко растворим в воде, практически нерастворим в бензоле и эфире. Средство для внутривенного наркоза.
Анализ см. «Общая информация»
|
||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-19; просмотров: 1605; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.147.6.122 (0.01 с.) |