Антигенная система резус-фактора

6 антигенов: Rh₀(D) (наиболее активный), rh’(C), rh’’(E), Hr₀(d), hr’(c), hr’’(e) – относятся к липопротеидам.

Характеристика: иммунные, неполные, моновалентные: вызывают аггютинацию в присутствии коллоидных растворов, протеолитических ферментов

У реципиента определяют наличие антигена Rh₀(D): его нет? => Rg(-)

У Rh(-) донора должны отсуствовать все три Ag: Rh₀(D), rh’(C), rh’’(E)

 

2. Методы определения групп крови.

Определение группы крови:

¢ По стандартным сывороткам

¢ По стандартным сывороткам и стандартным эритроцитам (перекрёстный способ)

¢ С помощью моноклональных антител (цоликлоны анти-А и анти-В)

 

Порядок определения группы крови

• Плановое исследование – врач определяет группу крови с помощью стандартных сывороток или цоликлонов – отправляет в серологическую лабораторию – проверка перекрёстным методом – получение подтверждения – возможность переливать кровь и её компоненты

• Экстренное исследование – врач определяет группу крови с помощью стандартных сывороток или цоликлонов – переливает кровь и её компоненты / отправляет в серологическую лабораторию – подтверждение приходит постфактум

 

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК

¢ На планшету наносят две серии стандартных сывороток I, II, III групп по 0,1 мл (одна большая капля)

¢ Кровь больного (эритроциты) по 0,01 мл (10:1) добавляют в стандартную сыворотку

¢ Перемешивают, покачивают

¢ Результат оценивают через 5 минут (песочные часы)

¢ При сомнении добавляют физ. раствор

 

Отрицательная реакция – капля остаётся равномерно окрашенной

Положительная реакция – агглютинация (в течении 10-30 секунд)

 

Перекрёстный способ

¢ На планшету капают шесть капель (0,1 мл) сыворотки больного

¢ Наносят стандартные эритроциты I, II, III групп по 0,01 мл

¢ Перемешивают, покачивают

¢ Результат оценивают через 5 минут (песочные часы)

¢ При сомнении добавляют физ. Раствор

¢ Интерпретация аналогична использованию стандартных сывороток

 

Определение групп крови с помощью цоликлонов

¢ Цоликлон анти-А и анти-В наносят на планшет по 0,1 мл

¢ Рядом наносят каплю крови больного (0,01 мл)

¢ Перемешивают

¢ Результат оценивают через 2-3 минуты

 

Определение резус-фактора на плоскости

¢ На планшете помещают каплю реактива анти-резус (0,1 мл) и каплю контрольной сыворотки AB(IV)Rh(-)

¢ Добавляют кровь больного (0,01 мл)

¢ Перемешивают

¢ Результат оценивают через 3 минуты

 

Определение Rh в пробирке

¢ На дно пробирки вносят 1 капю стандартного универсального реагента

¢ Добавляют кровь больного (1 каплю)

¢ Перемешивают вращением пробирки так, чтобы содержимое растеклось по стенкам

¢ Результат оценивают через 3 минуты

¢ Добавляют 4 мл физ. р-ра

 

ОШИБКИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ ГРУППЫ КРОВИ

¢ Низкое качество реагентов: контроль срока годности, условий хранения, органолептических свойств

¢ Технические ошибки:

а) плохая освещенность, изменение t (выше 25˚ - замедление агглютинации, менее 15˚ – неспецифическая агглютинация, а именно холодовая панагглютинация)

б) неправильное проведение реакции, ранняя оценка результатов

в) недобавление физ. раствора (распознавание псевдоагглютинации)

¢ Особенности исследуемой крови: панагглютинация при бактериальном заражении крови (феномен Томсона), аутоагглютинация (агглютинация сыворотки со всеми э/ц, даже с собственными) при болезнях крови, циррозе печени, спленомегалии, инфекциях.

 

Правила определения группы крови

1) Не допускать определения группы крови при t ниже 15˚

2) При наличии агглютинации с сыворотками групп О(I), A(II), B(III) всегда проводят реакцию с сывороткой AB(IV). Отсутствие агглютинации позволяет исключить панагглютинацию (т.е. кровь AB(IV) группы).

3) При наличии агглютинации с сывороткой AB(IV) кровь следует нагреть до 37˚

4) Во всех случаях нечеткого или сомнительного результата необходимо повторное определение группы крови при помощи стандартных сывороток других серий, а также перекрестным способом

 

 

3. Показания к переливанию крови.

Переливание крови

Правило Оттенберга

Агглютинируются только эритроциты переливаемой крови (так как агглютинины переливаемой сыворотки разводятся в крови реципиента) => можно переливать кровь, эритроциты которой не могут быть агглютинированы сывороткой реципиента.

Правило применимо лишь при переливании не более 500 мл крови!!!

 

Переливание донорской крови

¢ Прямое – запрещено законом!

¢ Непрямое – после карантинизации крови и её компонентов

 

Порядок переливания крови

¢ Определить показания к гемотрансфузии

¢ Сбор трансфузиологического анамнеза

¢ Определить группу крови и резус-фактор реципиента

¢ Получить кровь и оценить ее макроскопически

¢ Перепроверить группу крови донора

¢ Провести пробу на совместимость по группе крови, резус-фактору

¢ Провести биологическую пробу

¢ Гемотрансфузия

¢ Заполнить документацию

¢ Наблюдение за больным

ПРОБА НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ

¢ По системе АВО

- На планшету наносят 0,1 мл сыворотки реципиента

- Добавляют 0,01 мл крови донора

- Смешивают

- Результат оценивают через 5 минут

¢ По резус фактору

- На дно пробирки вносят 2 капли сыворотки реципиента

- Добавляют 1 каплю крови донора

- Добавляют 1 каплю 33% раствора полиглюкина

- Вращают пробирку в течении 5 минут, распределяя содержимое по стенкам

- Добавляют 4 мл физ. Раствора

- 3 раза аккуратно наклоняют пробирку

 

ПРОБЫ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ И БИО- СОВМЕСТИМОСТЬ ГЕМОКОМПОНЕНТОВ

Оборудование:

- Полиглюкин 33%

- планшетка

- пробирка

- пипетка, палочки

- р-р NaCl 0.9%

- сыворотка крови реципиента

· на плоскости (АВ0) (агглютинация свитдетельствует о несовместимости)

· в пробирке (Rh)

· Наличие индивидуальной совместимости не освобождает от проведения биопробы / пробы Бакстера!

 

Биологическая проба

¢ Вводят 10-15 мл крови донора

¢ В течении 3 минут оценивают состояние больного (учащение пульса, дыхания, появление одышки, гиперемии лица и др.)

¢ Повторяют 3 раза

 

ПРОБА БАКСТЕРА

¢ При гемотрансфузии во время операции –

1. перелить 75 мл донорской крови,

2. из другой вены взять пробирку крови реципиента,

3. центрифугировать

4. проверить на гемолиз.

 

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ ПЕРЕЛИВАНИЯ НЕСОВМЕСТИМЫХ КОМПОНЕНТОВ КРОВИ

1. Макроскопическая оценка годности трансфузионных сред перед переливанием

2. Обязательное определение АВ0-групповой принадлежности реципиента и донора

3. Для эритроцитарных сред – определение Rh-принадлежности реципиента и донора

4. Проба на индивидуальную совместимость

5. Биологическая проба и проба Бакстера

6. Независимо от срочности гемотрансфузии!

 

Техника переливания.

¢ Перед переливанием контейнер с трансфузионной средой согревают при комнатной температуре до температуры не менее 20°С. Допустимо согревание трансфузионных сред в водяной бане при температуре не выше 37°С

¢ Гемотрансфузия проводится медленно, 30-40 капель в минуту

¢ Наблюдение за больным в течении 3 часов (оценка температуры тела, пульса, АД, первой порции мочи)

 

(!!!) Переливание несовместимой крови, приведшее к летальному исходу, согласно ст. 109 УК РФ, трактуется как причинение смерти по неосторожности и наказывается ограничением или лишением свободы до 5 лет с лишением права на лечебную деятельность до 3 лет.

 

4. Методы консервации и заготовки крови.

I. Кровь, ее компоненты и препараты

1. Цельная кровь

2. Компоненты крови

} Эритроцитарные среды

} Лейкоцитарные среды

} Тромбоцитарные среды

} Плазма

3. Препараты крови

} альбумин

} факторы свертывания

} иммуноглобулины

} церулоплазмин и т.д.

 

II. Кровезаменители

1. КЗ гемодинамического действия

} Препараты декстрана (Полиглюкин, Реополиглюкин)

} Препараты желатина (Гелофузин)

} Препараты гидроксиэтилкрахмала (Волювен)

} Препараты полиэтиленгликоля (Полиоксидин, Полиоксифумарин)

2. КЗ дезинтоксикационного действия (Гемодез, Неогемодез)

3. Кислородтранспортеры (Перфторан, Геленпол)

4. Регуляторы ВСО

} Монопрепараты (NaCl, NaHCOз и т.д.)

} Полионные препараты (р-р Рингера, Ацесоль и т.д.)

5. Препараты парентерального питания

} Растворы аминокислот (аминостерил, инфезол, аминосол и пр.)

} Углеводы (раствор глюкозы 5%, 10%, 20%, 40%)

} Жировые эмульсии (интралипид, липофундин и пр.)

6. Составные препараты (Тетраспан и т.п.)