Дифференциальные биохимические свойства видов рода Fusobacterium

	Индол	Гидролиз эскулина	Продукция газа из глюкозы	Манноза	Лактоза
F.mortiferum	-	+	сильная	+	+
F. пис1еаtum	+	-	слабая	-	-
F.russi	-	-	слабая	-	-
F.varium	+	-	сильная	+	-
F.песгоforum	+	+	сильная	-	-
F..песгоgеnеs	+	+	сильная	-	-

 

 

Культуральные свойства.

На жидких питательных средах образуют осадок.

Для культивирования предпочтительны среды Columbia agar, Schaedler agar с добавлением крови, кристаллического фиолетового и эритромицина.

На кровяном питательном агаре образуют мелкие (1-2 мм) выпуклые жёлтоватые колонии, окружённые зоной a- гемолиза (колонии напоминают хлебные крошки). Рост фузобактерий ингибируют желчные соли, колистин, канамицин, но не ванкомицин, устойчивы к бриллиантовому зеленому. Дифференциальным критерием для отличия фузобактерий от бактероидов может служить посев на среды с добавлением фосфомицина (300 мкг/мл). На средах с такой концентрацией этого антибиотика рост фузобактерий отсутствует.

F.nucleatum не растёт на средах с 20% содержанием желчи. Характерной особенностью культивирования является гнилостный запах, обусловленный образованием большого количества масляной кислоты, как продукта метаболизма и индола.

Лечение - фузобактерии чувствительны к левомицетину, клиндамицину, имипинему, цефокситину, метронидазолу, полимиксину В. Чувствительность к канамицину отличает фузобактерии от бактероидов, т.к. большинство видов бактероидов устойчивы к канамицину.

Микроорганизмы рода Veillonella.

Анаэробные грамотрицательные бактерии. Типовой вид – V. parvula, паразитирует в полости рта, кишечнике, дыхательных путях.

Морфология

неподвижные кокковидные клетки (диаметром 0,3-0,5 мкм), располагаются парами, скоплениями, короткими цепочкамию.

Биохимические свойства

Каталазоотрицательны. Метаболизм ферментативный, расщепляют пируват, лактат, малат и.т.д. Инертны к углеводам, не гидролизуют желатин, не сворачивают молоко, не образуют индол, восстанавливают нитраты.

Культивирование. Оптимум роста – 30-37⁰ С, рН – 6,5-8,0. На молочном агаре образуют мелкие прозрачные звездчатые блестящие колонии диаметром 1-3 мм. Не нуждается для роста в путресцине или кодаверине (в отличие от других видов веллонелл).

Чувствительны к канамицину, полимиксину В, желчи.

 

Микроорганизмы рода Prevotella

Существует 11 видов. Типовой вид – P.melaninogenica.

Морфология – полиморфные неподвижные палочки, спор не образуют.

Биохимические свойства

Имеют умереннную сахаролитическую активность. Образуют кислоту при ферментации глюкозы. Большинство штаммов гидролизует крахмал, разжижает желатину.

Культуральные свойства

Облигатные анаэробы, хемоорганотрофы. Бактерии этой группы не растут в присутствии желчи и бриллиантового зеленого, но резистентны к канамицину. P.melaninogenica на кровяном агаре образуют пигментированнные колонии.

P. melaninogenica, P. denticola образуют мелкие коричневые гладкие, блестящие колонии (из-за наличия капсул). Пигмент накапливается при культивировании на агаре с кроличьей плазмой через 5-14 сут.

P. intermedia на кровяном агаре образует коричнево-чёрные сухие колонии. В первые сутки культивирования при проходящем ультрафиолетовом облучении флюоресцируют ярко-красным светом. 20% желчная соль ингибирует их рост, чувствительны к колистину, резистентны к ванкомицину и канамицину.

Лечение

Превотеллы устойчивы к пенициллинам и цефалоспоринам. Чувствительны к левомицетину, метронидазолу, имипинему и клиндамицину.

Микроорганизмы рода Actinomyces

Анаэробные грамположительные бактерии. В настоящее время относят к бактериям, ранее относили к грибам.

Отличия актиномицет от грибов:

1. Не содержат в клеточной стенке хитина;

2. Не обладают способностью к фотосинтезу;

3. Образуют примитивный мицелий;

4. размножение осуществляется бесполым путём.

Признаки, характерные для бактерий:

1. имеют клеточную стенку, характерную для бактерий;

2. отсутствует чётко выраженное ядро;

3. чувствительны к антибиотикам;

4. чувствительны к бактериофагам;

5. растут в слабощелочной среде.

Роль в патологии

Актиномицеты являются представителями нормальной микрофлоры организма человека, встречаются в ротовой полости, желудочно-кишечном тракте, влагалище. Вид Actinomyces israelii (A. israelii) вызывает заболевание актиномикоз. Благоприятным фоном для развития актиномикоза являются следующие факторы: периодонтиты, стоматологические манипуляции, травмы ротовой полости, снижение иммунитета, ОРЗ, сопутствующие заболевания (сахарный диабет, туберкулёз).

 

Род насчитывает 5 видов:

A.viscosus, A.naeslundii, A. israelii, A. odontolyticus, A.bovis.

Внутривидовая дифференциальная диагностика актиномицетов основана на различиях биохимических свойств видов.

Морфология - тонкие, прямые, палочки длиной до 2,5 мкм, одиночные, иногда парами, образуют нити до 50 мкм.

Биохимические свойства

Кислотонеустойчивы, хемоорганотрофы, ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа, индол не образуют. A.viscosus образуют ферменты каталазу, уреазу. A. israelii, A. odontolyticus – не образуют данные ферменты. A.viscosus, A. odontolyticus не разлагают ксилозу и маннит, инозит разлагают A.viscosus, A. israelii.

Культуральные свойства

A.viscosus, A. odontolyticus растут в аэробных условиях. A. israelii являются анаэробами. Актиномицеты растут медленно - посевы выдерживают в термостате в течение 7-14 суток при температуре 35-37 ⁰.S – форма колоний – крошковидные колонии жёлтого или красного цвета, имеющие неровную форму. A. israelii имеют белые. бугристые колонии, напоминающие молярного зуба.

A.odontolyticus на кровяном агаре образует красные колонии, окружённые зоной b- гемолиза.

• Микробиологическая диагностика актиномикоза

Материал для исследования: биоптаты ткани и пунктаты из глубоких очагов поражения, гнойное отделяемое, экссудат, мокрота, промывные воды бронхов, моча.

Методы диагностики:

Бактериоскопическое исследование.

Подозрительные плотные комочки из патологического материала переносят на предметные стекла в каплю 10—20 % раствора гидрокарбоната натрия, слегка подогревают и готовят препарат "раздавленная" капля, который исследуют под микроскопом с объективами 8х и 40х. В положительном случае в препарате обнаруживают актиномицеты в виде друз — характерных зернистых образований с плотным гиалиновым центром, окруженным лучистыми нитевидными клетками. Наряду с друзами встречаются отделные грамположительные неравномерно окрашивающиеся ветвистые бактерии. Друзы также могут быть обнаружены в гистологических срезах биоптатов органов, окрашенных стандартными (гематоксилин-эозин) или специальными методами.

 

Бактериологическое исследование

Патологический материал из очага инфекции (гной, биоптаты) засевают на тиогликолевую среду, а затем осуществляют посев на следующие питательные среды – Сабуро, кровяной агар, сахарный агар, глицериновый агар. Посевы инкубируют в анаэробных и аэробных условиях с добавлением 5 % СО₂. Через 18—24 ч на плотных питательных средах образуются микроколонии, а через 1—2 нед — зрелые колонии. Характерным признаком является "паукообразная" структура микроколонии с многочисленными ветвящимися нитями по периферии. Зрелые колонии могут быть плоскими, морщинистыми, бугристыми или пленчатыми. Характер колонии и морфология клеток во многих случаях позволяет отнести исследуемую культуру к роду Actinomyces. Исследуемые колонии отсевают на скошенный агар для накопления чистой культуры. Окончательная идентификация культуры до вида проводится на основании биохимических и антигенных свойств. Для идентификации используют также методы газожидкостной хроматографии.

Серологическая диагностика актиномикоза заключается в постановке РСК.

Для выявления гиперчувствительности замедленного типа проводится постановка кожных проб с актинолизатом.

Лечение

Актиномицеты в отличие от других анаэробов нечувствительны к метронидазолу. Для лечения используют b-лактамные антибиотики (пенициллины, карбапенемы, цефокситин), хлорамфеникол.

7. ЗАБОЛЕВАНИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА вирусной, бактериальной и грибковой этиологии