Загальні вимоги до проведення посівів досліджуваного матеріалу

1. Всі маніпуляції, пов’язані з посівом, проводять в асептичних умовах

2. Необхідно ретельно виконувати правила техніки безпеки при роботі із заразним матеріалом та дотримуватись правил протипожежної безпеки

3. Чашки Петрі з посівами підписують відповідно до Державних санітарних правил (ДСП 9.9.5.-080-02): на кришці – назва середовища і дата виготовлення;

на дні – номер аналізу, дата посіву, назва культури за бінарною номенклатурою.

 

Обсяг самостійної роботи студентів на занятті

Студенти ознайомлюються з поживними середовищами, їх використанням, з видами тампонів, які використовуються для взяття патологічного матеріалу. Здійснюють взяття матеріалу для мікробіологічного та санітарно-бактеріологічного дослідження. Опрацьовують техніку посіву досліджуваного матеріалу на поживні середовища бактеріологічною петлею, тампоном, шпателем. Вивчають етапи виділення чистої культури мікроорганізмів, їх ідентифікацію за морфотинкторіальними, культуральними, ферментативними, антигенними та іншими властивостями.

Розглядають демонстраційний ріст мікроорганізмів на поживних середовищах: рідких, напіврідких, щільних, оцінюють його.

 

Перелік практичних навичок

1. Проведення взяття та висівання патогенного матеріалу на поживні середовища

2. Характеристика росту мікроорганізмів на поживних середовищах

3. Дотримання правил охорони праці, техніки безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи з інфікованим матеріалом, культурами мікроорганізмів, обладнанням, пальниками, дезінфекційними розчинами

 

Алгоритми виконання практичних навичок:

І. Посів бактеріологічною петлею на скошений агар

1. Запаліть пальник

2. Візьміть у ліву руку між великим і вказівним пальцями пробірку із скошеним агаром

3. У праву руку, як перо, візьміть бактеріологічну петлю

4. Петлю зафламбуйте у полум’ї пальника у вертикальному положенні

5. Внесіть її у посудину з досліджуваним матеріалом

Обережно, щоб не торкнутись зовнішньої поверхні посудини

Петлю попередньо охолодіть, торкаючись внутрішньої

поверхні посудини.

6. Наберіть петлею досліджуваний матеріал.

7. Корок із пробірки вийміть правою рукою, затискаючи його між мізинцем і долонею.

Увага! Корки виймайте плавно, без ривків!

8. Зафламбуйте край пробірки.

9. Внесіть петлю з досліджуваним матеріалом у пробірку з середовищем

Уважно, щоб не торкнутись зовнішньої поверхні пробірки!

10. Матеріал зигзагоподібними рухами розітріть на поверхні агару знизу догори

Посів здійснюйте обережно, щоб не пошкодити поверхню середовища

11. Закрийте пробірку корком, одночасно фламбуючи край пробірки і корок над полум'ям пальника

12. Пробірку поставте у штатив

13. Петлю зафламбуйте, поставте у ємність.

 

ІІ. Посів тампоном у чашку Петрі

1. Візьміть чашку Петрі з середовищем у ліву руку.

2. Тампон візьміть у праву руку, як перо.

3. Злегка привідкрийте чашку Петрі.

4. Внесіть тампон з досліджуваним матеріалом.

Уважно, щоб не торкатись країв чашки Петрі!

5. Втирайте вміст тампона у поверхню середовища, обертаючи його навколо осі.

6. Чашку Петрі закрийте і переверніть дном вгору.

7. Тампон помістіть у пробірку або в лоток для відпрацьованого матеріалу.

Ш. Посів шпателем у чашку Петрі

1. Запаліть пальник.

2. Приготуйте шпатель.

3. Візьміть у ліву руку чашку Петрі.

4. У праву руку - бактеріологічну петлю.

5. Зафламбуйте її у полум'ї пальника у вертикальному положенні.

6. Наберіть петлею досліджуваний матеріал, внесіть у чашку Петрі

і розмістіть на поверхні живильного середовища біля краю чашки

Досліджуваний матеріал можна внести також пастерівською піпеткою.

7. Петлю зафламбуйте.

8. Візьміть шпатель у праву руку.

9. Внесіть його у чашку Петрі, злегка привідкривши її.

10. Поступальними рухами розітріть досліджуваний матеріал по поверхні середовища.

11. Вийміть шпатель, чашку закрийте і переверніть дном вгору.

12. Шпатель опустіть у дезінфектант.

 

IV. Посів бактеріологічною петлею на рідке живильне середовище

І. Запаліть пальник.

2. Візьміть у ліву руку флакон (пробірку) з рідким живильним середовищем.

3. У праву руку візьміть бактеріологічну петлю, як перо.

4. Зафламбуйте її у полум’ї пальника у вертикальному положенні.

5. Наберіть досліджуваний матеріал за відомими Вам правилами.

6. Вийміть корок з флакона (пробірки) правою рукою, затискаючи його між долонею і мізинцем.

Корок виймайте плавно, без різких рухів!

7. Край флакона (пробірки) зафламбуйте у полум'ї пальника.

8. Петлю погрузіть злегка у живильне середовище і розітріть посівний матеріал на стінці флакона (пробірки) на межі повітря і середовища.

Петлю вносьте уважно, щоб не торкатись країв флакона!

9. Змийте середовищем зроблений посів.

Обережно, щоб не замочити корок!

10. Вийміть петлю з флакона (пробірки).

11. Закрийте флакон (пробірку), одночасно фламбуючи його край і корок.

Працюйте з пальником уважно, щоб застерегтися від пожежі.

12. Петлю зафламбуйте, поставте у ємність.

 

V. Посів бактеріологічною петлею у чашку Петрі

1. Запаліть пальник

2. Візьміть у ліву руку чашку Петрі

3. У праву руку, як перо, бактеріологічну петлю

4. Петлю зафламбуйте у полум’ї пальника у вертикальному положенні

5. Наберіть досліджуваний матеріал за вище вказаними правилами

6. Привідкрийте чашку Петрі

7. Внесіть петлю з досліджуваним матеріалом біля краю чашки

Уважно! Щоб не торкатись країв чашки!

8. Петлю вийміть, зафламбуйте

9. Повторно внесіть петлю у чашку Петрі, горизонтально покладіть на поверхню агару, де був внесений досліджуваний матеріал

10. Проведіть петлею кілька разів по поверхні середовища

11. Потім зигзагоподібними рухами здійсніть посів досліджуваного матеріалу по поверхні середовища

Штрихи повинні розташовуватись від краю до краю чашки

Петрі, близько один від одного. При посіві не пошкодьте поверхню агару.

12. Петлю зафламбуйте, поставте у ємність

13. Переверніть чашку Петрі дном вгору

 

Орієнтовна карта спостереження

 

Завдання	Самостійні записи
1. Розгляньте поживні середовища: їх щільність, прозорість, визначіть їх призначення
3. Зверніть увагу на ріст мікроорганізмів на поживних середовищах: ● рідких ● щільних ● напіврідких
4. Ознайомтесь з видами тампонів, які використовують для взяття патологічного матеріалу
5. Зробіть записи та малюнки у щоденник

МЕТОДИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ

для самостійної підготовки студентів до практичного заняття № 4

Тема: Мікроби і навколишнє середовище. Антибіотики

Актуальність теми

Екологія мікроорганізмів з кожним роком набуває все більшого значення. Значну цікавість має вивчення впливу фізичних, хімічних і біологічних факторів на патогенні іта умовно-патогенні мікроби. Тема має велике практичне значення у роботі молодшого медичного спеціаліста, якому необхідні чіткі і повні знання правил асептики й антисептики, методів стерилізації та дезінфекції. Порушення цих важливих вимог, породжує важкі ускладнення, поширення інфекційних хвороб, виникнення нозокоміальних інфекцій. Сучасна медицина у своїй практичній діяльності не може нехтувати вимогами щодо боротьби з мікросвітом - використовує наявні і шукає нові методи та засоби впливу на мікроорганізми.

Величезним досягненням ХХ століття, яке суттєво вплинуло на розробку

методів етіотропної терапії інфекційних захворювань, було відкриття і впровадження у медичну практику антибіотиків. Використання антибіотиків захистило життя мільйонів людей. Завдяки їм знизилась кількість післяопераційних ускладнень, захворюваність і смертність від гнійних інфекцій, підвищилась ефективність лікування багатьох хвороб, збільшився середній вік людини. Разом з тим, антибіотикотерапія і антибіотикопрофілактика може призвести до негативних наслідків - виникнення побічних ефектів в організмі людини, формування резистентності мікроорганізмів до антибіотиків, можливості спалахів внутрішньолікарняної інфекції.

Таким чином, знання основних принципів антибіотикотерапії та уміння визначити чутливість мікроорганізмів до антибіотиків,оцінити результати антибіотикограми необхідні молодшому медичному спеціалісту для його професійної діяльності та запобігання можливих побічних явищ.

 

Навчальні цілі

Одержати поняття про:

♦ Асептику та антисептику

Знати: ♦ Застосування дезінфекції та стерилізації

♦ Антибіотики, їх природу та механізм дії

♦ Підготовку матеріалу до стерилізації та його стерилізацію

♦ Правила техніки безпеки, протиепідемічного режиму під час роботи з апаратурою, дезінфекційними засобами

Вміти: ♦ Виготовляти дезінфекційні розчини та застосовувати їх

♦ Проводитидезінфекцію посуду, інфікованого матеріалу, робочого

місця, рук

♦ Проводити стерилізацію медичних інструментів, перев’язувального матеріалу, лабораторного посуду, живильних середовищ.

♦ Визначити чутливість мікроорганізмів до антибіотиків диско-дифузійним

методом

♦ Врахувати результати визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків

♦ Дотримуватись правил охорони праці, техніки безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи з інфікованим матеріалом, культурами мікроорганізмів, обладнанням, пальниками, дезінфекційними розчинами

Ознайомитись з:

♦ Апаратурою для термічної стерилізації та тестами контролю якості роботи стерилізаторів

♦ Методами контролю якості стерилізації

Матеріали доаудиторної самостійної підготовки студентів

Міждисциплінарна інтеграція

№ з/п	Назва дисципліни	Знати	Вміти
1.	Основи екології та профілактичної медицини	Проблеми забруднення навколишнього середовища Особисту гігієну Методи санітарно-освітньої роботи Причини виникнення внутрішньолікарняних інфекцій Санітарно-показові мікроорганізми довкілля та медичних установ	Формувати навички дотримання особистої гігієни Проводити санітарно-освітню роботу з пропаганди здорового способу життя Визначати санітарно- показові мікроорганізми довкілля та медичних установ
2.	Основи латинської мови з медичною термінологією	Терміноелементи Словотворення Грецькі еквіваленти	Орієнтуватися в структурі термінів і визначати граматичні форми слів, які їх утворюють Аналізувати і утворювати із заданим значенням різні словотворчі структуриВміти свідомо користуватись науковою латинсько-грецькою термінологією
3.	Медична хімія	Водневий показник Осмотичний тиск Окисно-відновні реакції	Робити висновки щодо кислотності біологічних рідин на основі водневого показника
4.	Англійська мова	Походження термінів	Визначати значення термінів
5.	Біологія (предмет загальнох школи)	Неклітинні форми життя Хімічний склад клітини Ферменти Обмін речовин
6.	Медична біологія	Генетика та мінливість Біотехнології	Аналізувати прояви мінливості
7.	Основи психології та міжособове спілкування	Методи спілкування з пацієнтом	Спілкуватись з пацієнтом, дотримуючись правил етики та деонтології
8.	Основи медсестринства	Дезінфекцію, стерилізацію Асептику, антисептику Контроль за якістю стерилізації Санітарно-протиепідемічний режим закладів охорони здоров’я, визначення, мету, засоби забезпечення Методи оброблення рук медичного персоналу	Проводити дезінфекцію та стерилізацію чинників навколишнього середовища, інструментарію, перев’язувального матеріалу Проводити гігієнічну антисептику рук
9.	Фармакологія та медична рецептура	Дезінфікуючі засоби Антисептичні середники антибіотики	Застосовувати дезінфектанти та антисептичні засоби в залежності від механізму їх дії Дотримуватись принципів застосування антибіотиків, визначати їх можливу побічну дію та надавати невідкладну допомогу
10.	Медсестринство в інфектології	Причини виникнення дисбактеріозу, діагностику та профілактику Методи дезінфекції та стерилізації Правила дотримання протиепідемічного режиму	Вміти провести дезінфекцію та стерилізацію з метою профілактики внутрішньолікарняної інфекції
11.	Ріст та розвиток людини	Особливості мікрофлори організму у новонароджених
12.	Дисципліни циклу практичної та професійної підготовки	Методи дезінфекції та стерилізації Правила дотримання протиепідемічного режиму	Вміти провести дезінфекцію та стерилізацію з метою профілактики внутрішньолікарняної інфекції

Орієнтовна карта для самостійної роботи з літературою

Завдання	Вказівки до завдання	Самостійні записи
1. Ознайомтесь з:	1.1. Поширенням мікробів у природі 1.2. Взаємодією мікробів у навколишньому середовищі 1.3. Апаратурою для термічної стерилізації 1.4.Тестами контролю якості роботи стерилізаторів
2. Отримайте:	2.1. Поняття про асептику та антисептику
3. Закріпіть знання з питань:	3.1. Дотримання протиепідемічних заходів у закладах охорони здоров’я 3.2. Вплив фізичних, хімічних та біологічних чинників на мікроби 3.3. Дезінфекція, стерилізація 3.4. Контроль за якістю стерилізації 3.5. Виготовлення дезінфекційних розчинів та їх застосування
4. Повторіть:	4.1. Поняття: антагонізм, антибіотики
5. Опрацюйте:	5.1. Професійні алгоритми формування умінь та навичок: ● підготовка матеріалу до стерилізації та його стерилізація ● контроль за якістю стерилізації 5.2. Спосіб дезінфекції посуду, інфікованого матеріалу, робочого місця, рук 5.3. Техніку визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків диско-дифузійним методом 5.4. Врахування результатів визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків

Вивчення питання «Змиви з об’єктів довкілля, проби води, повітря тощо», «Аналіз антибіотикограми» пропонується для самостійної позааудиторної роботи студентів. Програмний матеріал необхідно опрацювати, користуючись «Орієнтовною картою самостійного вивчення студентами навчальної літератури» (див. Методичні рекомендації для псрс з навчальної дисципліни «Мікробіологія»), виконати запропоновані завдання для самоконтролю знань-умінь.

Питання для самоконтролю:

1. Поширення мікробів у природі:

● грунті

● воді

● повітрі

2. Нормальна мікрофлора людського організму

3. Поняття про асептику й антисептику

4. Вплив фізичних факторів на мікроби, їх значення у медицині

5. Вплив хімічних чинників на мікроорганізми, застосування у практичній медицині

6. Вплив біологічних чинників на мікроби

7. Що таке дезінфекція? Її види

8. Стерилізація. Які існують види стерилізації?

9. Як проводять контроль якості стерилізації?

10. Протиепідемічні заходи у лікарняних установах

11. Санітарно-показові мікроорганізми довкілля, медичних установ

12. Антибіотики, їх природа, механізм дії

13. Вплив антибіотиків на мінливість мікроорганізмів

14. З якою метою визначають чутливість мікроорганізмів до антибіотиків?

!5. Аналіз антибіотикограми

Обсяг самостійної роботи студентів на занятті

Студенти одержують поняття про асептику та антисептику. Вивчають види дезінфекції, стерилізації. Виготовляють дезінфекційні розчини та застосовують їх за призначенням: дезінфекції піпеток, інфікованого матеріалу, рук, робочого місця. Закріплюють знання з методів стерилізації медичного інструментарію, перев'язувального матеріалу, лабораторного посуду, поживних середовищ. Ознайомлюються з апаратурою для термічної стерилізації та тестами контролю якості роботи стерилізаторів. Визначають чутливість мікроорганізмів до антибіотиків диско-дифузійним методом, оцінюють результати антибіотикограми

 

Перелік практичних навичок

1. Підготовка матеріалу до стерилізації та його стерилізація

2. Контроль за якістю стерилізації

3. Виготовлення дезінфекційних розчинів

4. Дезінфекція посуду, рук, робочого місця, відпрацьованого матеріалу

5. Врахування результатів визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків

6. Дотримання правил охорони праці, техніки безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи з інфікованим матеріалом, культурами мікроорганізмів, лабораторним посудом, апаратурою, дезінфекційними засобами, антисептиками, пальниками

Алгоритми виконання практичних навичок:

І. Підготовка медичного інструментарію до стерилізації та його стерилізація

Медичний інструментарій багаторазового користування після використання:

● замочують у дезінфікуючий розчин*

● промивають під протічною водою

● висушують

● складають у бікси

● оформляють супровідну документацію

● відправляють у стерилізаційну

● у стерилізаційній здають під розписку

У стерилізаційній після реєстрації:

● інструментарій кип'ятять у 2% розчині натрію гідрокарбонату 15хв.

● замочують у миючий розчин при температурі 50-52°С на 15-20 хв.

● у миючому розчині ретельно миють щітками, йоршиками

● промивають під протічною водою

● роблять проби на залишки миючого засобу та приховану кров -

● кип'ятять у дистильованій воді 5хв. з метою знесолення

● висушують

● загортають у папір, тканину або вміщують у крафт-пакети і складають у бікси

● автоклавують при тиску 2 атм. 20 хв. або стерилізують у сухожаровій шафі при температурі 180°С 1годину.

*3астосування дезінфектантів регламентується методичними вказівками (рекомендаціями) МОЗ України, затвердженими Головним санітарним лікарем України або інструкціями, прикладеними до ліцензованих засобів.

II. Стерилізація перев'язувального матеріалу

Ватні кульки, марлеві серветки вкладають у полотняні мішечки або зв'язують у марлеву серветку, складають у бікс. Стерилізують в автоклаві при тиску 2атм 20хв.