Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Лабораторная диагностика поверхностных микозовСодержание книги
Поиск на нашем сайте
При поверхностных микозах (кератомикозах) патологический процесс локализуется преимущественно в поверхностных слоях эпидермиса, не вызывая при этом видимой воспалительной реакции в дерме. В эту группу входят следующие микозы. Разноцветный лишай (отрубевидный лишай). Возбудителем является дрожжеподобный гриб Pityrosporum orbicutare (Malasseria furfur). Заболевание чаще возникает у лиц молодого возраста при чрезмерной потливости, при сахарном диабете, ожирении, длительной лихорадке. Очаги поражения локализуются на коже груди, спины, живота, шеи, плечах, проявляясь в виде коричнево-красных пятен, сопровождающихся шелушением. Диагностика проводится микроскопическим методом. В нативных препаратах соскоба кожи элементы гриба в чешуйках рогового слоя выглядят в виде коротких нитей мицелия, а также скоплений округлых почкующихся клеток с толстой стенкой, размером до 8мкм в диаметре. При посеве материала от больного на среду Сабуро при на 4-8-й день культивирования при температуре 370 С появляются белые или кремовые колонии с блестящей поверхностью, состоящие из почкующихся дрожжеподобных клеток. Черный микоз (кладоспориоз). Возбудитель - Cladosporium werneckii вызывает появление на коже ладоней или подошв светло-коричневых или черных пятен, шелушение отсутствует. При микроскопии нативных препаратов элементы гриба обнаруживаются в роговом слое эпидермиса в виде коричневого ветвящегося септированного мицелия и почкующихся клеток. Пьедра. Заболевание кутикулы волоса, характеризующееся образованием на волосе узелков белого или черного цвета. Белая пьедра (трихоспороз), встречаетсяв виде спорадических случаев в странах с умеренным климатом, возбудителем является Trichosporon beigelii (Trichosporon cutaneum). При микроскопии пораженных волос находят мицелий и артроспоры, прямоугольной, овальной или круглой формы, а также скопления спор. Узелки локализуются на волосах подмышечной и паховой областей, на бороде и волосистой части головы. Черная пьедра, наоборот, встречается в странах с жарким климатом. Возбудитель — Piedraia hortai — имеет аски, в которых находятся от 2 до 8 аскоспор размером от 5 до 80мкм. Лабораторная диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами (оппортунистические микозы) Условно-патогенные грибы обычно являются сапрофитами, обитающими во внешней среде, а также на коже и слизистых оболочках человека. Оппортунистические микозы возникают при длительном контакте человека с возбудителем, на фоне иммунодефицита, нерациональной антибиотико- и химиотерапии, приводящей к дисбактериозу и т. д. Некоторые грибы в благоприятных для них условиях способны размножаться в пищевых продуктах (например, в злаках) и накапливать сильнодействующие микотоксины, вызывающие тяжелые пищевые отравления (алиментарные микотоксикозы). Кандидоз (кандидамикоз) Возбудителями кандидоза – повсеместно распространенного заболевания являются дрожжеподобные грибы рода Candida ( наиболее часто встречается вид Candida albicans, реже - Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis, Candida krusei, Candida glabrata и т.д.). Кандидоз относится к типичным аутоинфекциям, проявляясь избыточным ростом дрожжеподобных грибов, заселяющих кожу, ногти, слизистые оболочки, внутренние органы. Обычно это заболевание возникает при патологии, связанной с формированием иммунодефицита (сахарный диабет, другие эндокринные болезни, гипо- и авитаминозы, иммунодепрессивная и лучевая терапия, СПИД и т.д.), при дисбактериозе, обусловленном длительным приемом антибиотиков. Наиболее подвержены кандидозу дети и старики. Выделяют поверхностный кандидоз слизистых оболочек, кожи, ногтевых валиков и ногтей. Кандидоз слизистых оболочек полости рта или влагалища (молочница) характеризуется появлением белого налета, напоминающего свернутое молоко Хронический генерализованный кандидоз обычно развивается у детей с иммунодефицитными состояниями, имеет медленно прогрессирующее течение с возникновением пневмоний, гастритов, гепатитов и др. При висцеральном кандидозе поражаются желудочно-кишечный тракт, органы дыхания, мочевыделительная система, ЦНС. Аллергические формы кандидоза развиваются на фоне имеющегося первичного очага кандидомикоза в результате сенсибилизация организма, при этом могут возникать новые очаги воспаления, в которых возбудитель отсутствует. Материалом для исследования при кандидозе являются чешуйки кожи и соскоб с ногтей, отделяемое и пленки со слизистой оболочки губ, полости рта, влагалища, мочеиспускательного канала, наружного слухового прохода, а также с конъюнктивы. При висцеральном кандидозе исследуют кровь, спинномозговую жидкость, мокроту, испражнения, мочу, желчь, мазки со слизистых оболочек, биоптаты тканей, пунктаты абсцессов, секционный материал. Лабораторная диагностика кандидоза включает микроскопию нативных препаратов, выделение чистой культуры гриба, обнаружение в материалах антигенов или нуклеиновых кислот, постановку серологических реакций, аллергических проб. Микроскопический метод -изучение неокрашенных и окрашенных по Граму, Романовскому-Гимзе, Цилю-Нильсену препаратов из исследуемого материала, в которых обнаруживают круглые или овальные почкующиеся дрожжеподобные клетки, размером от 3-6 мкм, и псевдомицелий в виде цепочек удлиненных клеток (рис. 37). Некоторые виды дрожжеподобных грибов (C.albicans ) образуют терминальные хламидоспоры. По Граму грибы рода Candida окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, по Цилю-Нильсену - в синий с розово-желтыми включениями липидов, по Романовскому-Гимзе — в розовато-желтый цвет с темно-фиолетовыми включениями волютина и красным хроматиновым веществом. Микологическое исследование. Выделение чистой культуры дрожжеподобных грибов производят на плотных средах (обычно среде Сабуро, сусло-агаре, Кандида-агаре или др.) с добавлением антибиотиков (пенициллин, стрептомицин и т.д.) для подавления роста сопутствующих бактерий. Через 2-3 дня культивирования при 30-370 С образуются круглые, диаметром до 1 см, выпуклые сметанообразные гладкие колонии белого цвета с ровными краями и глубоким врастанием в среду ветвистого древовидного псевдомицелия. Выделенную чистую культуру пересевают в жидкие среды (картофельную, кукурузную среды, морковно-картофельный отвар и др.) для выявления псевдомицелия, появляющегося обычно на 3-5 день культивирования (реже на 10-15 день и позже) В жидких питательных средах Candida образуют равномерное помутнение, осадок или пленку на поверхности среды. Наряду с псевдомицелием, у этих грибов можно найти истинный мицелий и хламидоспоры (крупные двухконтурные споры с зернистым содержимым) при посеве на рисовый или Хламидоспор-агар с последующим культивированием гриба в условиях пониженной температуры и концентрации кислорода..
Рис. 37. Возбудитель кандидамикоза (Candida albicans) в исследуемом материале
Бластоспоры (почки) у дрожжеподобных грибов рода Candida располагаются нерегулярно по обеим сторонам мицелия, хламидоспоры круглые, крупные (10-20мкм), двухконтурные. C.albicans сбраживает глюкозу, мальтозу, левулезу и частично галактозу; молоко не изменяет. Идентификация дрожжеподобных грибов рода Candida до уровня вида основывается на определении типа филаментации, наличия хламидоспор, ферментативной активности (табл. 24).
Таблица 24. Сахаролитические свойства дрожжеподобных грибов рода Candida.
Обозначения: кг – расщепление субстрата с образованием кислоты и газа
Характерным дифференциальным признаком, отличающим вид С. Albicans от других видов дрожжеподобных грибов рода Candida, является их способность образовывать ростовые трубки - трубкообразные выросты бластоспор (признак РТ). Для этого часть колонии грибов переносят в 0,5 мл стерильной сыворотки теленка, пробирки помещают в термостат при 370 С на 2,5-3,0 часа, после чего готовят препарат раздавленной капли и микроскопируют под большим увеличением микроскопа (объектив х40). У ростовых трубок отсутствует перемычка или сужение на месте соединения с бластоспорой, они тоньше, чем удлиненная бластоспора или псевдомицелий у С. tropicalis. Для дифференциации с другими грибами у культур дрожжеподобных грибов определяют наличие капсулы и уреазы (у кандид они отсутствуют), определяют способность ассимилировать и ферментировать углеводы (глюкозу, мальтозу, сахарозу, галактозу и др.). Для быстрой идентификации С. albicans разработаныспециальные диски с хромогенными субстратами, позволяющие выявить специфичные для этого вида грибов ферменты L-пролинаминопептидазу и 3-галактозамидазу. На диск наносят суточную культуру гриба, инкубируют 30 мин при 35 °С, затем добавляют 1 каплю 0,3%-го раствора гидроксида натрия. Появление желтого окрашивания свидетельствует об активности L-пролинаминопептидазы. Затем добавляют 1 каплю коричного альдегида; развитие в течение 1 мин розово-красного окрашивания свидетельствует о наличии 3-галактозамидазы. Положительный тест на оба фермента в сочетании с наличием ростовых трубок считаются достаточными для идентификации С. albicans. Серологический метод (постановкаРСК, РА, ИФА. РНГА, ВИЭФ и др. с парными сыворотками крови больных с целью определения специфических антител) обычно проводится при висцеральных формах кандидоза. Результаты исследования считают положительными при нарастании титра антител более чем в 4 раза в динамике заболевания. Для РА используются корпускулярные антигены, для РСК очищенные полисахариды, лизаты или ультразвуковые дезинтеграты дрожжеподобных грибов. Аллергологический метод (преимущественно у больных висцеральным кандидозом) - постановка внутрикожной аллергической пробы со стандартным кандидозным аллергеном, представляющим взвесь клеток грибов, прогретую при 800 С в течение 2 ч. Результаты реакции (гиперемия, папула) учитывают через 24 — 48 ч. В связи с широким распространением сенсибилизации к антигенам грибов аллергопроба имеет ограниченное диагностическое значение. Генодиагностика - разработана ПЦР для инидикации видоспецифического фрагмента ДНК С. albicans.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-23; просмотров: 875; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.142.194.55 (0.01 с.) |