Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Южноамериканский бластомикоз (паракокцидиоидоз)
Встречается только в странах Южной Америки, возбудителем является двухфазный гриб Paracoccidioides brasiliensis,поражающий кожу, слизистую оболочку полости рта и носовой части глотки, внутренние органы, лимфатические узлы. Возбудитель заболевания обитает на растениях и в почве. Заражение происходит аэрогенным путем или при проникновении гриба через слизистую оболочку полости рта в результате ее травмировании при чистке зубов веточкой растения. Микроскопический метод – изучение нативных или окрашенных по Граму, Романовскому—Гимзе и другими методами мазков из гноя, мокроты, отделяемого свищей, биоптатов и т.д. Клетки гриба круглые или эллипсоидные, крупные (от 30 до 60 мкм), окруженные толстой оболочкой. Материнская клетка окружена мелкими (2—10 мкм) дочерними бластоконидиями, приобретая характерный вид короны или корабельного штурвала. В отличие от возбудителя бластомикоза место соединения дочерних клеток с материнской узкое. Окончательный диагноз устанавливают после выделения и идентификации возбудителя. Микологический метод. Гриб медленно растет на питательных средах, образуя через 3-4 недели культивирования при 370 С белые или кремовые колонии, в мазках из которых обнаруживают дрожжевые клетки, размером 40-50 мкм, окруженные большим числом бластоконидий на узком основании (вид «корабельного штурвала»). При более длительном культивировании появляются признаки мицелиального роста. Идентификация гриба проводится с помощью реакции иммунодиффузии с использованием диагностической иммунной сыворотки для определения типа экстрагируемого экзоантигена. Дрожжевая форма возникает при выращивании культуры гриба при 370 С, колонии в этой форме гладкие или складчатые, сходные с колониями дрожжеподобных грибов. В мазках из колоний видны овальные и круглые клетки крупного размера, с единичными или множественными почками или без них, напоминая тканевые формы гриба. Мицелиальная форма возникает при выращивании культуры при температуре до 250 С, характеризуется ростом складчатых колоний, покрытых в центре беловато-сероватым, а затем - желтоватым пушком. Под микроскопом видны ветвящийся мицелий и овальные конидии, диаметром 3,0-3,5мкм, которые располагаются по бокам мицелиальных клеток.
Для лабораторной диагностики южноамериканского бластомикоза (паракокцидиоидоза) применяют также методы серологической и аллергической диагностики, биопробу, ПЦР. Гистоплазмоз Возбудитель гистоплазмоза - диморфный гриб Histoplasma capsulatum вызывает широко распространенный природно-очаговый микоз в регионах с теплым климатом. В России гистоплазмоз встречается в виде спорадических случаев. Совершенная стадия гриба является аскомицетом и имеет название Emmonsietla capsulata. Возбудитель гистоплазмоза может иметь дрожжевую (паразитарная форма, встречается в организме человека и животных или развивается на соответствующих искусственных средах), а также мицелиальную форму, свойственную природным и лабораторным штаммам. Дрожжевая форма в тканях и патологическом материале имеет вид одноядерных клеток округлой или грушевидной формы, размером 2-4мкм, с клеточной оболочкой, капсулой и почкой на более узком конце клетки и ядром, которое вдвое меньше клетки. Характерным для тканевой формы является расположение внутри макрофагов, гигантских клеток и клеток ретикулоэндотелиальной системы; реже клетки гриба лежат свободно и напоминают тканевые формы лейшманий. Гистоплазма обитает в почве, загрязненной пометом птиц и летучих мышей, а также в гнездах птиц. Заражение происходит аэрогенным путем при вдыхании пыли со спорами гриба. Для гистоплазмоза типичны острая или хроническая пневмония, поражение кожных покровов и слизистых оболочек, внутренних органов, развитие анемии, перитонита, менингоэнцефалита и т.д. Гистоплазмы поражают мононуклеарные фагоциты с формированием очагов казеозного некроза, последующим фиброзом и кальцинацией. Материалом для исследования является отделяемое язвенных поражений кожи и слизистой оболочки, мокрота, кровь, моча, спинномозговая жидкость, пунктаты костного мозга, подкожной клетчатки. Применяются следующие методы лабораторной диагностики. Микроскопический метод - исследование мазков из патологического материала или гистологических срезов позволяет выявить овальные дрожжеподобные одиночные или почкующиеся клетки гриба, размером 10—15 мкм (рис. 34), а также микроконидии, размером 3-5 мкм. Результаты микроскопического исследования должны быть подтверждены выделением чистой культуры гриба.
Рис. 34. Возбудитель гистоплазмоза (Histoplasma capsulatum) в исследуемом материале. Микологический метод. Исследуемый материал засевают на среду Сабуро, или другие питательные среды для грибов, посевы инкубируют при температуре 25-300 С и 370 С в течение 3-6 недель. Гистоплазмы образуют блестящие беловатые или коричневатые дрожжеподобные колонии мягкой консистенции, которые состоят из округлых клеток диаметром 4 — 5 мкм с мелкими почками на тонких ножках. При более низкой температуре инкубирования возбудитель образует белый волокнистый мицелий, образованный в зрелых колониях бугорчатыми макроконидиями и/или мелкими каплевидными конидиями. Выделенную культуру идентифицируют по морфологическим и культуральным признакам, а также по антигенной структуре (реакция иммунодиффузии с диагностической сывороткой к антигенам гриба). На среде Сабуро при температуре 25-300 С характерен рост аэробной мицелиальной формы в виде пушистых колоний, цвет которых варьирует от белого до коричневого. Мицелий в этих колониях септированный, ветвистый, многоядерный, диаметром до 5мкм. Макроконидии крупные, круглые или грушевидные, диаметром 10-25мкм, с шиловидными выростами, располагаются на концах воздушных нитей мицелия. Имеются хламидоспоры. Микроконидии гладкостенные, округлые, грушевидные или сигарообразные, размером 2-6мкм. Дрожжевая форма гистоплазмы относится к факультативным анаэробам или микроаэрофилам и вырастает на кровяных средах с глюкозой при температуре 35-370 С и рН 7,2-7,6. Колонии дрожжевой формы мелкие, блестящие, выпуклые, иногда складчатые, плотной консистенции, окрашенные в белый, серый, желтый, коричневый цвет. Клетки гриба овальной формы, размером 1,5-3,5мкм, размножаются только почкованием; почки образуются на одном или на двух полюсах, иногда аполярно. Может образовываться псевдомицелий: почкующиеся дрожжеподобные клетки располагаются цепочками и нитями. Серологический метод - постановка РИФ, РА, РИД и РСК с сывороткой крови больного гистоплазмозом и антигенами возбудителя гистоплазмоза (гистоплазмином, полученным из гифов гриба, или антигенами дрожжевой формы гриба) с целью определения антител к Histoplasma capsulatum. Аллергический метод - постановка внутрикожной аллергической пробыс гистоплазмином. Методы иммунодиагностики имеют второстепенное значение в связи с наличием перекрестных реакций и позднего появления положительного результата. Биопроба -внутрибрюшинное заражение исследуемым материалом белых мышей или золотистых хомячков. Через 1 мес после заражения животных умерщвляют и внутренние органы исследуют микологическим методом с целью выделения и идентификации чистой культуры гриба Генодиагностика. Разработаны методы ПЦР-диагностики гистоплазмоза. Кокцидиомикоз
Возбудителем эндемичного микоза - кокцидиоидоза является почвенный гриб Coccidioides immitis, который относится к диморфным грибам класса фикомицетов и встречается в тканевой, паразитарной форме в организме больных, а также в мицелиальной (весьма контагиозной форме) в почве и в чистых культурах на искусственных питательных средах. Заражение кокцидиоидозом происходит при вдыхании артроспор, находящихся в воздухе. Гриб вызывает тяжелые системные микозы у людей в виде гриппоподобного заболевания, кавернозного поражения легких, кожи, подкожной клетчатки, мозговых оболочек и других тканей организма.
Исследуемым материалом являются гной, мокрота, кровь, спинномозговая жидкость, биопсийный (операционный) материал. Микроскопический метод -исследование нативных и окрашенных (по Романовскому-Гимзе и т.д.) препаратов с целью выявления шаровидных образований (сферул), размером 20-60 мкм, с двухконтурной оболочкой, наполненных мелкими (2-4 мкм) округлыми эндоспорами (рис. 35). Встречаются также разрушенные сферулы. В биопсийном материале обнаруживаются гранулемы, состоящие из полиморфноядерных лейкоцитов, лимфоцитов, эпителиоидных и гигантских клеток.
Рис. 35. Возбудитель кокцидиомикоза (Coccidioides immitis) в исследуемом материале.
Микологический метод – выделение чистой культуры Coccidioides immitis проводят в специализированных лабораториях с соблюдением особых правил противоэпидемического режима безопасности. Посевы делают на среды Сабуро, МПА и МПБ с глюкозой. Через 1 неделю при температуре 370 С С. immitis образует кожистые дрожжеподобные колонии, желтовато-коричневого цвета, врастающие в субстрат. При температуре 250 С развивается мицелиальная форма гриба в виде пушистых, беловатых, на высоте спорообразования мучнистых колоний с характерными артроспорами. В некоторых колониях наблюдаются концентрические зоны пушистого мицелия. Мицелий септированный, артроконидии крупные толстостенные, размером 2-3x4-6 мкм, чередуются в гифах с тонкостенными клетками. В молодых культурах на плотных средах преобладает мицелий с интеркаларными хламидоспорами. Старые культуры богаты хламидоспорами, артроспорами, обрывками мицелия. При разрыве гифов артроспоры, обладающие высокой контагиозностью, освобождаются, легко переносятся током воздуха и при вдыхании людьми легко трансформируются в тканевые сферулы. Кокцидиоидный гриб является аэробом, ферментирует моно-, ди- и полисахара, обладает выраженной протеолитической активностью (разжижает желатин и казеин, свернутую лошадиную сыворотку, пептонизирует и коагулирует молоко). Не восстанавливает нитраты в нитриты, не образует индола и сероводорода. Для идентификации С. immitis применяют реакцию иммунодиффузии или прямую РИФ с сыворотками к антигенам кокцидий, а также методы генной идентификации.
Биопроба – заражение белых мышей, хомяков и самцов морских свинок (интратестикулярно или интраперитонеально), у которых единичные артроконидии вызывают летальную инфекцию. Серологический метод - постановка РП, РСК, РИФ, ИФА, позволяющих выявить специфические антитела классов IgM и IgG в сыворотке крови больных кокцидиомикозом. При кокцидиоидном менингите антитела можно обнаружить в ликворе больных. Аллергический метод – постановка кожных аллергических проб с кокцидиоидными аллергенами кокцидиоидином (аллергеном мицелиальной формы) и сферулином (аллергеном тканевой формы). При положительной пробе через 24-48 часов отмечаются гиперемия, припухлость, папула в месте введения аллергена.
Лабораторная диагностика подкожных (субкутанных) микозов Споротрихоз Встречается почти во всех странах мира (чаще во Франции и США), возбудитель - Sporotrichumschenckii обладает диморфизмом, относится к нитчатым грибам, гифомицетам. Споротрихоз регистрируется преимущественно в странах с тропическим и субтропическим климатом, а в зонах с умеренным климатом - в теплое время года. Гриб обитает в почве, вегетирует на растениях. Грибы проникают чаще всего в кожу конечностей при травме, реже - через слизистые оболочки дыхательных путей или желудочно-кишечного тракта. Как правило, заболевают лица, работающие с растениями и древесиной. В месте поражения грибом развивается поражение в виде пустулы, абсцесса или язвы, лимфатические сосуды утолщаются и уплотняются. Заболевание характеризуется поражением подкожной клетчатки и лимфатических узлов, образованием гумм в глотке, гортани, мышцах, синовиальных оболочках, костях, суставах, возникновением абсцессов в мышцах и внутренних органах, развитием пневмонии, пиелонефрита. Иногда может происходить диссеминация возбудителя с поражением внутренних органов и костей. Материалом для исследования служат гной из свищей и язвенных поражений, соскобы с краев язв, пунктаты закрытых воспалительных очагов, биоптаты пораженных тканей. Микроскопический метод. Тканевые формы в виде мелких грамположительных почкующихся клеток округлой или сигарообразной формы, напоминающих челнок, размерами 2—5мкм и покрытых слоем слизи, обнаруживают обычно внутри макрофагов. Однако эти находки в срезах тканей и в патологическом материале встречаются сравнительно редко. Иногда встречаются дрожжеподобные почкующиеся клетки, диаметром 2-8мкм, и так называемые «астроидные» тела — грибковые клетки, окруженные эозинофильными комплексами антиген-антитело. При микроскопическом исследовании обнаруживают также септированный мицелий, размером 10-50 мкм, с характерными конидиями споротриксов в виде гроздей, напоминающих цветки маргаритки, а также небольшие (2-5 мкм), заостренные на концах, овоидные или сигароподобные конидии, расположенные попарно или в виде розеток на концах мицелия.
Для экспресс-диагностики споротрихоза также применяется РИФ. Микологическое исследование. Для выделения чистой культуры посевы производят на плотные и жидкие питательные среды, которые инкубируют при температуре 250 С или 370 С. В культурах споротрихум встречается в мицелиальной и дрожжевой формах. Дрожжевые формы вырастают при температуре 370 С на 4-6 день в виде гладких колоний желтого цвета, в которых при микроскопическом исследовании обнаруживают овальные и удлиненные толстостенные клетки, размером 1-2х4-8мкм; могут встречаться также круглые почкующиеся клетки, иногда связанные друг с другом длинной клеткой. Позднее колонии медленно увеличиваются в размерах, становятся серыми, складчатыми, редко сливаются. Колонии гриба вырастают на 20 —25-е сутки. При бактериоскопии обнаруживают ветвистый, септированный мицелий шириной 2 — 6 мкм коричневого цвета и овальные споры, расположенные на стеригмах размером 2 — 5 мкм. При 370 С споротрихумы растут в дрожжевой форме — в виде единичных овальных клеток. Мицелиальная форма гриба растет при температуре 250 С в течение 20-25 дней. Встречаются складчатые, крупнобугристые, многопетлистые, возвышающиеся колонии, окрашенные водонерастворимым пигментом сначала в кремовый, затем в желтый, коричневый и черный цвет. Мицелий гриба ветвистый, септированный, диаметром 1,0-2,5х10-30 мкм. Конидии овальные, круглые, грушевидные или цилиндрические, часть из них имеют заостренные концы, размеры конидий 2-8х1,5-З,0 мкм мкм. Конидии располагаются обычно попарно одна против другой по бокам мицелия или группами по 5-10 спор на конце, иногда в виде розетки. Встречаются также коремии - анастомозирующие нити мицелия в виде тонких усиков или завитков с микроконидиями на воздушных концах. В старых культурах обнаруживаются хламидоспоры. Биопроба – интратестикулярное заражение белых мышей. При микроскопии пораженных тканей отмечается трансформация мицелиальной формы гриба в дрожжевую. Мышей, крыс, морских свинок можно заражать также внутрикожно. Хороший результат дают аллергические пробы со споротрихином. Серологический метод - выявление антител в сыворотке крови больных к антигенам возбудителя споротрихоза с помощью РА, РСК и ИФА. Аллергический метод – постановка внутрикожной аллергической пробы с аллергеном гриба - споротрихином Хромомикоз Возбудителями хромомикоза являются «черные плесени», Phialophora verrucosa, Fonsecaea compacta, Fonsecaea pedrosoi, Exophiala jeanselmei - диморфные грибы, относящиеся к дейтеромицетам. Гриб обнаруживается в почве, а также на растениях. Заболевание у человека имеет хроническое течение (от10 до 30 лет), характеризуясь возникновением на конечностях бородавчатых и папилломатозных разрастаний (наподобие цветной капусты), покрытых корками, а также наличием мелких и крупных абсцессов, гранулематозных очагов. Заболевание спорадическое, встречается преимущественно в тропической и субтропической зонах. Материалом для исследования служат гной, соскобы пораженной ткани, биоптаты. Микроскопический метод. При исследовании нативных препаратов из материала от больного микроскопии обнаруживают золотисто-коричневые округлые клетки гриба с толстой двухконтурной оболочкой, размером 4-15 мкм, часто в окружении гигантских склероциев - клеток с продольными и поперечными перегородками. Между клетками можно обнаружить нити мицелия. В препаратах, окрашенных по Романовскому—Гимзе стенки клеток окрашиваются в зеленый цвет, по Цилю—Нильсену — в красный. Микологический метод -выделение культур на среде Сабуро или других средах при температуре 25-280 С. Рост колоний появляется на 3-5-й день в виде темно-серых пушистых точек, к 10-17-му дню колонии становятся округлыми, конусовидными, ворсистыми или пушистыми, приобретая зеленовато-сероватый цвет. Колонии могут сливаться в сплошную массу, окруженную мелкими пушистыми разбросанными колониями темного цвета. В жидкой среде образуется складчатая пленка и рыхлый войлоко-подобный осадок в виде черного комка на дне пробирки. Выделенные культуры идентифицируют на основании морфологических свойств и характеру спорообразования. Мицелий гриба септирован мало, конидиеносцы более септированы и на их расширенных концах располагаются конидии. Скопления спор кистеподобные, встречаются также одиночные или расположенные группами желто-бурые хламидоспоры, диаметром 10-12мкм, с толстыми темными стенками. Выделяют следующие типы споруляции возбудителя хромомикоза: hormodendrum, acrotheca, phialophora. Тип hormodendrum имеет концевые конидиофоры с усеченными мелкими выпуклостями, к которым прикреплены яйцевидные, одно- или двухклеточные споры оливкового цвета, размерами 1,5-3,0x3,0-5,0 мкм, расположенные в виде цепочек. Тип acrotheca также представлен концевыми конидиофорами, однако они напоминают по форме дубинку и образуют латеральные конидии, диаметром 2-З мкм. Тип phialophora характеризуется овальными или удлиненными конидиями, расположенными в бокаловидных конидиеносцах. Культивирование гриба при температуре 370 С приводит к формированию на 5-6 сутки желтоватых колоний, состоящих из дрожжеподобных клеток гриба, размером 2-7 мкм. Другие методы исследования. Применяются также методы серологической диагностики (с сыворотками крови больных ставят РП и РСК, используя специфические антигены возбудителя хромомикоза); применяют также аллергические пробы.В ряде случаев используют биопробу - интратестикулярное заражение самцов морских свинок.
|
|||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-04-23; просмотров: 273; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.142.197.198 (0.026 с.) |