Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Питательные среды и реактивыСодержание книги
Похожие статьи вашей тематики
Поиск на нашем сайте
КОНСЕРВАНТЫ Глицериновая смесь Состав: Натрий хлорид (NaCl) (0,85% раствор) — 1000 мл Глицерин нейтральный — 500 мл Натрий гидрофосфат безводный (Na2HPO4) 20% раствор — 150 мл Приготовление: смешивают первые два ингредиента и добавляют раствор натрия гидрофосфата в таком количестве, чтобы довести рН до 7,8—8,0, затем разливают в пробирки или флаконы по 10 мл, стерилизуют в автоклаве при 112 0С в течение 15 мин или текучим паром 3 дня подряд. После стерилизации рН 7,6—7,8. Фосфатно-буферная смесь Состав: Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 0,45 г Натрий гидрофосфат безводный(Na2HPO4) — 5,34 г Вода дистиллированная — 1000 мл Приготовление: ингредиенты смешивают, разливают по 10 мл в пробирки или флаконы, стерилизуют в автоклаве при 120 °С 30 мин. Буферная глицерино-солевая смесь [Teague О., Clurmann A., 1916] в модификации Сакса [Sachs A., I934] Состав: Натрий хлорид (NaCl) — 4,2 г Калий гидрофосфат (К2НРО4) — 3,1 г Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 1 г Глицерин нейтральный — 300 мл Вода дистиллированная — 700 мл Приготовление: ингредиенты растворяют, перемешивают, смесь разливают в стерильные пробирки по 5 мл и автоклавируют при 112°С 30 мин. Рекомендуется с целью лучшего прocмотpa раствор слабо подкрашивать феноловым красным. Изотонический раствор натрия хлорида Состав: Натрий хлорид (NaCl) — 8,5 г Вода дистиллированная — 1000 мл Приготовление: соль растворяют при подогревании, фильтруют, устанавливают рН 7,0—7,2, разливают в пробирки по 5—7 мл, стерилизуют при 121 °С 30 мин. СРЕДЫ ОБОГАЩЕНИЯ Селенитовая среда [Leifson E., 1936], модификация Среда предназначена для накопления в материале сальмонелл. Принцип действия: пептон является питательной основой, натрий гидроселенит — ингибитором сопутствующей микрофлоры; фосфаты обеспечивают буферные свойства, а лактоза служит компонентом, влияющим на реакцию среды. Состав: Натрий гидроселенит (NaHSeO3) без примеси теллура — 4 г Пептон (желательно венгерский «Рихтер» или чехословацкий «Спофа») — 5 г Натрий гидрофосфат безводный (Na2HPO4) — 7 г Натрий дигидрофосфат безводный (NaH2PО4) — 3 г Лактоза — 4 г Вода дистиллированная — 1000 мл Приготовление: среду готовят из двух растворов. I раствор. Предварительно определяют количественные соотношения фосфатов при данном образце пептона (гидроселенита натрия) с тем, чтобы готовая среда имела рН 6,9—7,1. Такая подтитровка нужна всегда при изменении серии любого из входящих в среду основных ингредиентов. После установления количественных соотношений фосфатов к раствору добавляют пептон и лактозу. Разливают во флаконы по 50 мл и стерилизуют текучим паром два дня по 30 мин или такой же срок при 112°С. Количество фосфатов в рецепте среды дано в расчете на безводные препараты. При отсутствии таковых заранее заготовленные навески «выветривают» в термостате в течение 15—16 сут. II раствор. 10% раствор натрия гидроселенита готовят на стерильной дистиллированной воде ex tempore. Перед началом работы в каждый флакон с 50 мл основного (I) раствора добавляют 2 мл раствора натрия гидроселенита (раствора II), асептически разливают по 5—7 мл в стерильные пробирки и закрывают плотно пробками. Дальнейшая стерилизация не требуется. Основной (I) раствор среды можно хранить в холодильнике 1—2 мес. Для приготовления среды следует использовать высококачественный пептон. Магниевая среда. [Rappaport E., Konforti N., Navon В., 1956]. Модифицирована В. Л. Шигановой и Г. П. Калиной в 1972 г. (среда М) Среда предназначена для накопления сальмонелл и содержит три раствора. Принцип действия: ингибирующий эффект среды для сопутствующей микрофлоры основан на влиянии бриллиантового зеленого и дегидратирующем действии магния хлорида, при этом на рост сальмонелл указанные вещества в данных количествах не влияют; пептон с дрожжевым диализатом создают достаточную питательную основу для активного размножения сальмонелл, а КН2РО4 — буферность среды. Состав: Раствор I Пептон — 4,2 г Натрий хлорид (NaCl) — 7,15 г Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 1,43 г Дрожжевой диализат — 9 мл Вода дистиллированная — 890 мл Раствор II Магний хлорид (МgСl26Н2О) — 35,7 г Вода дистиллированная — 90 мл Раствор III Бриллиантовый зеленый 0,5% водный раствор — 0,9 мл Приготовление: все три раствора смешивают, разливают определенные объемы в колбы, флаконы или пробирки, стерилизуют при 112 0С 30 мин. Среда Мюллера [Muller L., 1923] Тетратионатовый бульон Мюллера является средой накопления для сальмонелл. Принцип действия: в среде при добавлении к ней тиосульфата натрия и раствора Люголя ex tempore образуется тетратионат натрия (Na2S4O6). Реакция его образования протекает по уравнению: 21 + 2Na2S2О3 = Nа2S4О6 + 2NаI. Это вещество, не влияя на развитие большинства сальмонелл, является ингибитором для эшерихий и другой микрофлоры кишечника. В среде бульон обеспечивает питательные вещества, мел обладает буферными свойствами. Состав: Мел, стерилизованный сухим жаром, или — 45 г Кальций карбонат (СаСО3), сухой, стерильный — 25 г Бульон Хоттингера, содержащий 1,2—1,3% аминного азоnа — 900 мл Раствор Люголя — 20 мл Натрий тиосульфат (Na2S2O3•5Н2О) 50% стерильный раствор — 100 мл Приготовление: в стерильные флаконы помещают по 4,5 г мела, стерилизуют сухим жаром, после чего в каждый флакон наливают по 90 мл бульона Хоттингера. Стерилизуют при 121 °С 30 мин. рН 7,2—7,4. Затем ex tempore асептически добавляют в каждый флакон точно по 2 мл раствора Люголя [калий йодид (KI) 20 г, йод кристаллический 25 г, вода дистиллированная 100 мл] и по 10 мл раствора натрия тиосульфата (натрий тиосульфат 50 г, вода дистиллированная 100 мл), хорошо смешивают и разливают по пробиркам. Готовая среда стерилизации не подлежит. Приготовление: в измерительный цилиндр насыпают натрий тиосульфат и добавляют воду по 100 мл, растворяют, переливают во флакон, стерилизуют текучим паром 30 миy. Среда Кауфмана [Kauffmann F., 1935] Состав: Среда Мюллера (стерильная) — 500 мл Желчь бычья (стерильная) — 250 мл Бриллиантовый зеленый (0,1% водный раствор) — 50 мл Приготовление: ингредиенты смешивают, асептически разливают в стерильные пробирки по 10 мл. Не стерилизуют. Желчный бульон Состав: бульон мясопептонный Хоттингера — 800 мл Желчь бычья нативпая — 200 мл Приготовление: рН должен быть равен 7,6. Разливают в стерильные пробирки или флаконы. Стерилизуют текучим паром 2 дня по 30 мин. Среда Рапопорт [Рапопорт М. и Вайнтрауб Л., 1935] Состав: бульон мясопептонный или Хоттингера — 900 мл Желчь бычья — 100 мл Глюкоза — 20 г Индикатор Андреде — мл Приготовление: ингредиенты смешивают, разливают во флаконы с поплавками по 50 мл. Стерилизуют текучим паром три дня по 30 мин. Среда обогащения ЕЕ [Mossel D. et al., 1963], в модификации Г. П. Калины (1981) Среда ЕЕ предназначена для накопления сальмонелл и эдвардсиелл. Принцип действия: желчные соли и относительно токсичный краситель подавляют развитие сопутствующей микрофлоры. Состав:Пептон — 10 г Глюкоза — 5 г Натрий гидрофосфат (Na2HPО4H20) — 8 г Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 2 г Желчь бычья — 20 мл или Желчные соли (по Олькеницкому) — 3 г Бриллиантовый зеленый 0,5% водный раствор — 3 мл Вода дистиллированная — 1000 мл Приготовление: все ингредиенты, кроме красителя, растворяют в воде, стерилизуют при 112°С 15 мин. Затем добавляют бриллиантовый зеленый и разливают в стерильные пробирки по 10 мл. Приготовление желчных солей по И. С. Олькеницкому (1957) К 1000 мл желчи (бычьей или свиной) добавляют 40 г гидроокиси натрия (NaOH), перемешивают и помещают в автоклав. Гидролиз проводят при 1,5 атм в течение 3 ч (можно дважды по 2 ч). К гидролизату для осаждения жирных кислот прибавляют 100 мл 20% раствора бария хлорида (ВаСl22H2O) и прогревают в автоклаве 1 ч. На следующий день гидролизаn сливают с осадка и фильтруют. Затем при постоянном помешивании добавляют 20% раствор соляной кислоты (до кислой реакции) и оставляют на 18—20 ч. После этого сливают, промывают водой и прибавляют, нагревая 40% раствор гидроокиси натрия (до щелочной реакции). Полученные натриевые соля желчных кислот выливают на противень и высушивают до порошкообразного состояния в сушильном шкафу при 115 0С. Среда Эт-1 (Калина Г. П., 1981) Среда Эт-1 описана как среда обогащения для эдвардсиелл. Принцип действия: основан на относительной устойчивости эдвардсиелл к полимиксину. Состав: Бульон слабощелочной (стерильный) — 1000 мл Глюкоза — 2 г Розоловая кислота 5% спиртовой раствор) — 2 мл Полимиксин — 25 000 ЕД Приготовление: глюкозу и розоловую кислоту растворяют в бульоне при подогревании, затем кипятят в водяной бане 15—20 мин, добавляют полимиксин и разливают асептически в стерильные пробирки или колбы. Среда обогащения для протеев — П-1 [Калина Г. П., 1975] Среда П-1 предназначена для преимущественного обнаружения протеев в патологическом материале и объектах окружающей среды. Принцип действия: протеи устойчивы к полимиксину, желчным солям и токсичным красителям, подавляющим рост сопутствующей микрофлоры. Мючевина использована в качестве дополнительного источника азота. Состав: Бульон питательный сухой — 15 г Вода дистиллированная — 1000 мл или Бульон Хоттингера, стерильный — 1000 мл Маннит — 1 г Желчные соли (по Ольксницкому) — 5 г Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 0,8 г Кристаллический фиолетовый (0,01% водный раствор) — 20 мл или Бриллиантовый зеленый (0,1%водный раствор) — 5 мл Мочевина (50% раствор) — 10 мл Полимиксин — 1 000 000 ЕД Приготовление: все ингредиенты, кроме мочевины и антибиотика, растворить, хорошо перемешать, профильтровать и стерилизовать кипячением в водяной бане (15 мин). Затем добавить полимиксин, мочевину, тщательно смешать и асептически разлить в стерильные пробирки по 5—6 мл. Среда обогащения для клебсиелл — К-1 [Калина Г. П.1980] Среда К-1 узконаправленного действия для обнаружения клебсиелл в патологическом материале или объектах окружающей среды. Принцип действия: в среду ограниченного минерального состава введены рафиноза (в качестве единственного источника углерода) и мочевина (как единственный источник азота). Указанные вещества не усваиваются многими грамотрицателытыми бактериями или усваиваются лишь в присутствии дополнительных питательных ингредиентов, что делает среду высокоэлективной для клебсиелл. Развитие грамположительной микрофлоры иигибируется введением в среду кристаллического фиолетового. Состав: Натрий хлорид (NaCl) — 5 г Магний сульфат (MgSO47H2O) — 0,2 г Калий дигидрофосфат (КН2РО4) — 2 г Калий гидрофосфат (К2НРО4) — 2 г Раффиноза — 2 г Бромтимоловый синий (1,6% щелочной раствор) — 2 мл Кристаллический фиолетовый (0,01% водный раствор) — 20 мл Мочевина (50% раствор) — 4 мл Вода деионизированная или дистиллированная — 1000 мл Приготовление: после растворения ингредиентов (кроме мочевины) и кипячения их в водяной бане 15 мин добавляют раствор мочевины и асептично разливают по 4—5 мл в стерильные пробирки. Буферная среда обогащения для иерсиний [Ющенко Г. В., Дунаев В. И., 1980] Среда служит при выделении иерсиний для подращивания материала перед высевом на пластинчатые дифференциальные среды. Состав Натрий хлорид (NaCl) — 8,5 г Натрий гидрофосфат (Na2HPО412H20) 1/15 М-раствор — 3 мл Калий дигидрофосфат (КН2РО4) 1/15 М-раствор — 7 мл Вода дистиллированная — 990 мл Приготовление: предварительно готовят по 100 мл 1/15 М-растворов указанных солей. Затем к изотоническому раствору натрия хлорида добавляют указанное количество приготовленных растворов, смешивают, фильтруют, разливают в пробирки по 5—6 мл и стерилизуют при 116 0С 10 мин или 30 мин текучим паром рН среды 7,2.
|
||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-09-13; просмотров: 656; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 18.224.44.207 (0.01 с.) |