Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: Археология Биология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Техника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ? Влияние общества на человека Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления	Главная Избранные Случайная статья Познавательные Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу Темы для реферативных сообщений ↑ ▷ Содержание ⇐ ПредыдущаяСтр 25 из 37Следующая ⇒ Содержание книги Исследование химической денатурации белков Темы для реферативных сообщений. 1) Актин, миозин ‑ особенности строения и функции мышечных белков. Цветные реакции на компоненты нуклеопротеинов Подкласс – анаэробные дегидрогеназы Реакция на токоферол (витамин Е) Реакции на аскорбиновую кислоту (витамин С) Нормальная (1), гипергликемическая (2), гипогликемическая (3) Темы для реферативных сообщений. 1. Липиды в качестве лекарственных препаратов и биологически активных добавок Экспресс метод с применением индикаторных полосок Темы для реферативных сообщений. 1. Иммуноферментный анализ (ИФА), пути практического использования. Схема проведения иммунофлюоресцентного анализа Схема гибридизации ДНК с праймерами Обмен аминокислот и белков. Аммиак Флуоресценция продуктов окисления адреналина Темы для реферативных сообщений. 1. Гликолипиды мембран: структура, функции, нарушения обмена. Нервная и мышечная ткани. Медиаторы Проба с цетилтриметиламмониумбромидом Обнаружение белков в гидролизатах кости и тканей зуба Определение активности фермента в ротовой жидкости Работа относится к категории учебно-исследовательских (УИРС). Минерализованные ткани и минерализация Темы для реферативных сообщений. 1. Белки — положительные реактанты острой фазы воспаления. Оценка концентрации альбуминов в сыворотке крови Осадочная проба Вельтмана в модификации Тайфля Темы для реферативных сообщений Темы для реферативных сообщений. 1. Сочетанные нарушения кислотно-основного состояния. Определение относительной плотности мочи Определение содержания хлоридов в плазме крови колориметрическим методом Жидкости полости рта и пародонт Аминокислоты, Белки, нуклеиновые кислоты. Азотистый обмен Строение и обмен углеводов и липидов Соединительная и костная ткани, ткани и жидкости полости рта Раздел 1 « Белки, нуклеиновые кислоты: Строение, свойства, функции» РАЗДЕЛ 10 «Соединительная, костная и зубные ткани» Классификация и номенклатура ферментов Индивидуальные белки плазмы крови Понятие нормальной (референтной) величины Поиск на нашем сайте 1) Железодефицитные состояния: причины, проявления, диагностика, последствия, основы лечения. 2) Врожденные и приобретенные метгемоглобинемии: причины, недостаточность НАДН–метгемоглобинредуктазы, клинические проявления, лечение. 3) Порфирии: классификация, причины, патогенез, клинические проявления, основы лечения. Самостоятельная работа Дополнить схему углеводно-энергетического обмена (см. темы 3.1, 4.1, 4.2), представив реакции синтеза 2,3‑дифосфоглицерата, связанные с гликолизом. Лабораторная работа 1. Определение концентрации гемоглобина в крови Актуальность Концентрация гемоглобина в крови является одним из важнейших показателей организма. На поддержание этого показателя и своевременную доставку кислорода в ткани направлено множество регуляторных механизмов. При недостатке железа в организме концентрация гемоглобина в крови уменьшается в последнюю очередь, когда в организме уже понижено содержание всех иных железосодержащих белков (трансферрина в крови, ферритина в тканях и др.) и гемопротеинов (миоглобина в мышцах, цитохромов в дыхательной цепи и цепях микросомального окисления, и др.). При повышении и оптимизации поступления железа в организм, концентрация гемоглобина в крови восстанавливается в первую очередь, а уже затем восстанавливается общая железосвязывающая способность сыворотки крови и постепенно нарастают запасы железа в тканях. Принцип Гемоглобинцианидный метод основан на способности гемоглобина при взаимодействии с гексацианоферратом калия (красная кровяная соль) окисляться в метгемоглобин, образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность его окраски пропорциональна количеству гемоглобина. Реактивы 1) Трансформирующий реактив (смесь растворов ацетонциангидрина, Na2CO3, гексацианоферрата калия K3[Fe(CN)6]), 2) 150 г/л стандартный раствор гемоглобинцианида. Материал исследования Свежая кровь. Проведение анализа   Опыт, мл Стандарт, мл Кровь Стандартный раствор 0,02 — — 0,02 Трансформирующий раствор 5,0 5,0   Инкубируют 10 мин, измеряют оптическую плотность опытной и стандартной проб против воды при длине волны 540 нм (зелёный светофильтр) в кювете 10 мм Расчет Содержание гемоглобина [г/л] = , где ЕОП и ЕСТ — оптическая плотность опытной и стандартной проб, ССТ — концентрация гемоглобина в стандартном растворе. Нормальные величины Свежая кровь женщины 120‑140 г/л   мужчины 130‑160 г/л Клинико-диагностическое значение Снижение концентрации гемоглобина наблюдается при анемиях – железодефицитной (до 60 г/л), геморрагической, гипопластической, гемолитической, В12-дефицитной. Увеличение концентрации гемоглобина наблюдается при миелопролиферативных заболеваниях – эритремии (до 210 г/л), симптоматических эритроцитозах – пролиферации элементов эритропоэза, при обезвоживании. Оформление работы Указывают принцип метода, регистрируют результаты, делают расчёты, вывод. Лабораторная работа 2. Определение концентрации общего билирубина и его фракций в сыворотке крови Актуальность Определение концентрации билирубина и его фракций в крови служит важным критерием при определении типа желтухи и выбора стратегии лечения. Принцип Сульфаниловая кислота с азотистым натрием дает диазофенилсульфоновую кислоту, образующую с билирубином окрашенные азопигменты (диазореакция Эрлиха). Связанный (прямой) билирубин реагирует быстро, и о его концентрации судят по первоначальной интенсивности окраски. Несвязанный билирубин вступает в реакцию после добавления акселератора (кофеин), который освобождает билирубин из комплекса с белками, чем ускоряет реакцию азосочетания. Материал исследования Сыворотка крови. Реактивы 1) 5 мкмоль/л стандартный раствор билирубина, 2)сульфаниловая кислота в HCl (реагент 1), 3) раствор NaNO2 (реагент 2), 4) кофеиновый реактив (реагент 3), 5) 0,9% раствор NaCl, 6) буферный раствор (реагент 4). Проведение анализа   Общий билирубин, мл Прямой билирубин, мл Стандартная проба, мл Контроль, мл     Сульфаниловая кислота 0,2 0,2 0,2 —   NaNO2 1 капля 1 капля 1 капля —   Кофеиновый реактив 1,0 — 1,0 1,0   NaCl — 1,0 — 0,2   Сыворотка крови 0,2 0,2 — 0,2   Стандарт билирубина — — 0,2 —       Перемешивают и инкубируют 10 минут Буферный раствор 1,0 1,0 1,0 1,0                   Измеряют экстинкцию стандартной пробы и пробы на прямой билирубин против контроля при 540 нм (зеленый светофильтр) в кювете 5 мм. Еще через 10 мин измеряют экстинкцию стандартной пробы и пробы на общий билирубин. Расчет Рассчитывают концентрацию общего и прямого билирубина по формуле: Билирубин [мкмоль/л] = , где ЕОП и ЕСТ — оптическая плотность опытной и стандартной проб,  ССТ — концентрация билирубина в стандартном растворе, 5 мкмоль/л Непрямой билирубин [мкмоль/л] = общий билирубин ‑ прямой билирубин Нормальные величины Сыворотка крови общий билирубин 8,5‑20,5 мкмоль/л   прямой билирубин 2,2‑5,1 мкмоль/л Клинико-диагностическое значение В таблице отражены сдвиги содержания основных пигментов в сыворотке крови, моче и кале людей при различных типах желтухи (­ ‑ увеличение, ¯ ‑ снижение, N ‑ нормальные значения):     Типы желтухи   Гемолитическая	Паренхиматозная		Обтурационная
	Билирубин крови
‑ Общий		­		­		­­
‑ Непрямой		­­		­		N или ­
‑ Прямой		N или ­		­		­­
	Билирубин мочи		N		N или ­		­
	Уробилин мочи		­­		­		¯
	Стеркобилин кала		­­		N или ¯		Отсутствует

Накопление билирубина в крови свыше 43 мкмоль/л ведет к его связыванию эластическими волокнами кожи и конъюнктивы, проявляется желтухой. Для дифференциальной диагностики типа желтухи определяют, за счет какой фракции билирубина возникает билирубинемия.

1. Гемолитическая (надпеченочная) желтуха — ускорено образование билирубина в итоге гемолиза. Гипербилирубинемия развивается за счет фракции непрямого билирубина. В моче резко возрастает содержание уробилина, билирубина нет. В кале увеличено содержание стеркобилина.

Данный тип желтухи может развиваться при В₁₂‑дефицитной анемии, гемолитических анемиях различного происхождения (порфирии, несовместимость крови, дефект глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, лекарства).

2. Паренхиматозная (печеночно‑клеточная) желтуха — нарушено извлечение билирубина печеночными клетками, его конъюгирование и выведение. Гипербилирубинемия за счет обеих фракций: непрямой билиру­бин возрастает за счет функциональной недостаточности гепатоцитов или снижения их количества, а прямой — за счет цитолиза гепатоцитов. В моче определяется билирубин, умеренно увеличена концентрация уробилина. В кале уровень стеркобилина в норме или снижен. Паренхиматозный тип желтухи отмечается при вирусных и иных формах гепатитов, циррозе, опухолях, жировой дистрофии печени и других состояниях.

3. Механическая (подпеченочная) желтуха развивается вследствие нарушения оттока желчи при закупорке желчного протока. Из-за застоя желчи растягиваются желчные капилляры, растет их проницаемость. Не имея оттока в желчь, прямой билирубин поступает в кровь (гипербилирубинемия). В тяжелых случаях переполнение гепатоцитов прямым билирубином нарушает конъюгацию с глюкуроновой кислотой, в крови растет уровень несвязанного билирубина. В моче резко повышен уровень билирубина. В кале нет стеркобилина. Такую желтуху выявляют при желчнокаменной болезни, опухолях поджелудочной железы, гельминтозах.

Оформление работы

Указывают принцип метода, регистрируют результаты, производят расчёты, делают вывод о наличии/отсутствии возможной патологии.

Лабораторная работа 3.
Обнаружение билирубина и желчных пигментов в моче

Реактивы

1) диагностические полоски «Билифан», 2) концентрированная H₂SO₄, 3) концентрированная HNO₃ с примесью HNO₃, 4) сухой порошок аммония молибдата, 5) 1% спиртовый раствор J₂

Материал для исследования

1) Нормальная моча, 2) патологическая моча с желчью.

Экспресс-метод

Принцип

Полуколичественное определение билирубина в моче диагностическими полосками «билифан» основано его качественной реакции, дающей продукты с характерным розовым окрашиванием.

Проведение анализа

Диагностическую полоску погружают в мочу и немедленно вынимают. Через 1 мин сравнивают окраску зоны индикации с цветной шкалой сравнения на этикетке. Примерную концентрацию билирубина в моче определяют согласно оттенкам зоны индикации в соответствии с таблицей:

Обозначения на шкале	Содержание билирубина
	мкмоль/л	мг/л
1	5‑10	3‑6
2	10‑21	6‑12
3	21‑41	12‑24
4	51	30

Проба с молибдатом аммония

Принцип

Желчные пигменты билирубина и биливердина окисляются молибдатом аммония в присутствии H₂SO₄ с образованием синего билицианина.

Проведение анализа

На предметное стекло отдельно наносят соль аммония молибдата, каплю мочи с желчью, каплю концентрированной H₂SO₄, смешивают стеклянной палочкой. В присутствии билирубина развивается синяя окраска.

Проба Гмелина

Принцип

Под действием HNO₃ с примесью HNO₂ билирубин окисляется в биливердин (зелёный), билицианин (сине-фиолетовый), холетелин (жёлтый).

Проведение анализа

В пробирку с 5‑10 каплями концентрированной HNO₃ по стенке осторожно наслаивают равный объём исследуемой мочи. При наличии в моче желчных пигментов на границе жидкостей появляются цветные кольца. Первым появляется зелёное кольцо биливердина.

Нормальные величины

Моча	отсутствие билирубина

Клинико-диагностическое значение

Билирубинурия характерна для обтурационной и паренхиматозной желтухи при повышении уровня прямого билирубина в крови, но отсутствует при гемолитической желтухе. При гепатите билирубин может быть обнаружен в моче до появления желтухи.

Оформление работы

Указывают принципы методов, результаты заносят в таблицу, делают вывод о наличии билирубина и возможной патологии.

Название метода	Материал для исследования		Результат реакции (наличие окраски)
Экспресс- метод	моча	нормальная
		с желчью
Проба с молибдатом аммония	моча	нормальная
		с желчью
Проба Гмелина	моча	нормальная
		с желчью

Вопросы для самоконтроля

1) Строение, функции, метаболизм эритроцита. Значение гликолиза и 2,3-ди­фосфоглицерата, пентозофосфатного пути и НАДФН. Мембрана эритроцитов: белки, мишени окисления  и роль витаминов-антиоксидантов и НАДФН.

2) Гемоглобин как гемопротеин, типы гемоглобина. Транспорт газов эритроцитом, участие О₂ и СО₂ (схемы: в капиллярах легких и в тканях), кооперативность и эффект Бора. Гликозилированный гемоглобин и сахарный диабет.

3) Функции и локализация других гемопротеинов (миоглобин, цитохромы, пероксидаза и каталаза). Гемопротеины и гипоксия.

4) Железо, роль, токсичность. Обмен Fe, нарушения (анемия, гемохроматоз).

5) Синтез и распад гема, гемоглобина, регуляция и нарушения. Роль РЭС, печени и почек в обмене гемоглобина. Заболевания: талассемии, порфирии и др.

6) Желтуха, виды, причины, диагностика. Прямой и непрямой билирубин.

ТЕМА 11.3.
Неорганические вещества крови.
Кислотно-основное состояние

Актуальность

Кровь занимает особое место в метаболизме благодаря ряду специфических функций, принадлежащих ее компонентам. Незаменима роль крови в газообмене и регуляции кислотно-основного состояния организма, нарушения которых часто встречаются в клинической практике.

Цель

1. Изучить кислотно-основное состояние крови, механизмы его обеспечения.

2. Освоить методы оценки буферной ёмкости сыворотки крови, содержания хлоридов в сыворотке крови и моче, показателя рН мочи и их клинико-диагностическое значение.

Вопросы для самоподготовки

1) Электролиты плазмы крови:

~макроэлементы (Na, K, Ca, P, Fe, Cl), распределение и значение в организме, нормальные концентрации в плазме крови и факторы, от которых зависит их концентрация в плазме крови;

~микроэлементы (J, Cu, Zn, Co, Se), примеры участия в обмене веществ.

2) Роль эритроцита в изменении концентрации бикарбонат-ионов плазмы, карбоангидраза.

3) Механизм транспорта кислорода. Связывание кислорода с гемоглобином. Кривая насыщения гемоглобина кислородом / диссоциации гемоглобина.

4) Схема реакций, происходящих в эритроците, в капиллярах легких и тканей.

5) Показатели кислотно-основного состояния, нормальные величины (Приложение).

6) Химические механизмы регуляции кислотно-основного состояния. Каким образом работают буферные системы крови – фосфатная, белковая, бикарбонатная, гемоглобиновая. Химические реакции. Буферная емкость крови, клинико-диагностическое значение и нормальные показатели.

7) Характеристика и механизмы основных физиологических систем компенсации нарушения кислотно-основного состояния, роль легких и почек. Определение рН мочи, клинико-диагностическое значение.

8) Значение печени и костной ткани в реакциях компенсации нарушений КОС. Механизмы их работы.

9) Влияние секреции желудка и поджелудочной железы на кислотно-основное состояние организма. Роль печени. Определение концентрации ионов хлора в сыворотке крови и моче. Клинико-диагностическое значение и нормальные величины.

10) Основные виды нарушений кислотно-основного состояния – респираторный (дыхательный) ацидоз и алкалоз, метаболический ацидоз и алкалоз, причины, их вызывающие. Изменение показателей кислотно-основного состояния при данных нарушениях. Способы компенсации нарушений.

11) Причины сдвигов кислотно-основного равновесия при нижеперечисленных состояниях, способы их химической и физиологической компенсации:

~сахарный диабет, ~пневмония, ~тканевая гипоксия, ~приступ бронхиальной астмы, ~хронический бронхит, ~отравление этанолом, ~неукротимая рвота, ~диарея,

~хроническая почечная недостаточность (снижение функции почек), ~черепно-мозговая травма с возбуждением дыхательного центра, ~подъем высоко в горы, ~правожелудочковая сердечная недостаточность.

⇐ Предыдущая20212223242526272829Следующая ⇒

Поделиться: