Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ:  Археология Биология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия ЭкологияТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву 
Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Определение относительной плотности мочи
Принцип Относительная плотность (удельный вес) мочи пропорциональна концентрации растворенных в ней веществ (органических соединений и электролитов) и отражает концентрационную способность почек. Оборудование Урометры двух типов (со шкалой 1,000‑1,030 и шкалой 1,030‑1,060), высокий цилиндр для мочи. Проведение анализа При наличии пены на поверхности мочи удаляют её фильтровальной бумагой. Если мочи мало, то перед исследованием её можно развести в 2‑3 раза дистиллированной водой, а потом полученный результат умножить на степень разведения. В высокий узкий цилиндр наливают по стенке мочу и осторожно погружают в неё урометр так, чтобы он не касался стенок и дна цилиндра. Производят отсчёт по шкале урометра, используя нижний мениск жидкости. В случае большой относительной плотности мочи берут второй тип урометра (шкала 1,030‑1,060). Если моча имеет температуру, не соответствующую условиям, отмеченным на урометре, то на каждые 3°С выше или ниже этой температуры соответственно добавляют или отнимают по 0,001 от показаний шкалы урометра. Нормальные величины Моча 1,008‑1,026 Клинико-диагностическое значение У здорового человека относительная плотность мочи зависит от многих условий, но в основном от суточного диуреза - чем выше диурез, тем она ниже. У здоровых людей сумма первых двух цифр суточного диуреза и последующих двух цифр относительной плотности мочи обычно составляет 30 (например, если суточный диурез 1100 мл и относительная плотность 1019 г/л, то 11+19= 30). Относительная плотность нормальной мочи прямо зависит от концентрации растворимых веществ и находится в обратной зависимости от количества выделяемой мочи. Увеличение относительной плотности мочи отмечается при сахарном диабете (глюкозурия), поражении гломерулярного фильтра (протеинурия). Снижение плотности связано с полиурией любой этиологии. Оценка окраски (цвета) мочи Принцип Цвет мочи в норме зависит от содержания пигментов (урохрома, уробилина, порфирина) и тесно связан с её плотностью (обусловленной концентрацией растворенных в ней веществ и реакцией), более интенсивную окраску имеет концентрированная моча и моча с кислой реакцией. Необычную окраску моча может приобрести при употреблении овощей и фруктов с яркой окраской (свекла, земляника, морковь и др.), лекарственных (амидопирин, рибофлавин) и других веществ.
Проведение анализа Окраску образца мочи оценивают визуально в процессе измерения относительной плотности, когда моча находится в длинном прозрачном цилиндре. Нормальные величины Моча от янтарно‑желтого до соломенно‑желтого. Клинико-диагностическое значение Повышение интенсивности окраски мочи (гиперхромурия) ‑ при уменьшении её выделения за счет потери жидкости при поносах, рвоте, лихорадочных состояниях. Снижение интенсивности окраски мочи (гипохромурия) ‑ при различных видах полиурии (особенно сахарном и несахарном диабете), нефросклерозе. Характерное изменение окраски мочи может свидетельствовать о патологии: зеленовато-бурый (цвет «пива») – механическая желтуха вследствие билирубинурии; зеленовато-желтый – паренхиматозная желтуха вследствие билирубинурии, уробилиногенурии; от зеленовато-желтого до грязно-коричневого – пиурия; цвет «мясных помоев» – гематурия и гемоглобинурия при органических заболеваниях почек (острый нефрит); красно-коричневый – метгемоглобинурия; красно-бурый – миоглобинурия и острый инфаркт миокарда; синий – индиканурия, употребление метиленовой сини; молочно-белый – липурия и хилурия при поражении канальцев почек; чёрно-бурый – алкаптонурия, меланоз, малярия; чёрный – меланинурия при меланосаркоме, гемоглобинурия при острой гемолитической почке. Оценка прозрачности мочи Проведение анализа Прозрачность образца мочи оценивают визуально в процессе измерения относительной плотности, когда моча находится в длинном прозрачном цилиндре. Нормальные величины Моча прозрачна. Клинико-диагностическое значение Помутнение мочи практически всегда обусловлено выпадением в осадок солей, большим количеством лейкоцитов, бактерий, эпителиальных клеток, почечных цилиндров, слизи, свидетельствуя о наличии воспалительного процесса в мочевыводящей системе. Определение рН
Принцип Основан на изменении цвета индикатора в соответствии со значением рН определяемого раствора. Проведение анализа Полоску индикаторной бумаги опускают в пробирку с мочой и по изменению цвета, сравнивая с эталонной шкалой на упаковке, устанавливают рН исследуемой мочи. Нормальные величины Моча 5,0‑6,5 Клинико-диагностическое значение См. лабораторную работу 2, тема 34. Оформление работы Указывают принцип метода, регистрируют результаты в таблице и далее используют их для формулирования выводов в лабораторной работе 2.
Лабораторная работа 2. Материал для исследования 1) Нормальная моча, 2) образцы патологической мочи № 1, 2, 3. Оборудование Тест-полоски "Глюкофан", "Кетофан", "Диафан", "Альбуфан", "Билифан", "Иктофан", "Пентафан". Проведение анализа Не прикасаясь руками к зоне индикации, из упаковки берут полоску, погружают зону индикации на 1‑2 сек в образец мочи. Капли удаляют, проведя полоской по краю сосуда. Полоски оставляют в горизонтальном положении. Через 1 мин по цветной шкале упаковки определяют концентрацию искомого вещества. Определение глюкозы тест-полосками "Глюкофан" Принцип Принцип определения глюкозы основан на глюкозооксидазной реакции. Зона индикации пропитана растворами ферментов глюкозооксидазы, пероксидазы и красителем тетраметилбензидином. Глюкоза с помощью глюкозооксидазы окисляется кислородом воздуха до глюконовой кислоты с образованием перекиси водорода. Перекись водорода в присутствии фермента пероксидазы окисляет краситель, в результате чего желтая окраска переходит в зеленую. Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение Содержание глюкозы в моче возрастает при всех случаях гипергликемии свыше 10 ммоль/л (почечного порога). Глюкозурии могут быть физиологическими и патологическими. К физиологическим относятся алиментарная глюкозурия, глюкозурия беременных и нейрогенная глюкозурия на почве стрессовых состояний. Патологическая глюкозурия обнаруживается при гипергликемии (сахарный диабет, тиреотоксикоз, акромегалия, гиперплазия коры надпочечников, инфаркт миокарда, отравления морфином, фосфором, кровоизлияния во внутренние органы, острые инфекции и нервные заболевания), повреждениях почечных канальцев (пиело‑ и гломерулонефриты, токсические поражения почек, почечный диабет (семейная почечная глюкозурия)), нефропатии. Определение кетоновых тел тест-полосками "Кетофан" Принцип Тест основан на реакции Легаля. Жёлтая зона индикации на полосках содержит щелочной буфер в смеси с нитропруссидом натрия, дающий с ацетоном и ацетоуксусной кислотой красное, вишневое или фиолетовое окрашивание. Проба более чувствительна к ацетоуксусной кислоте, чем к ацетону, с b‑гидроксимасляной кислотой индикатор не реагирует. Интенсивность окраски отражает только концентрацию ацетоуксусной кислоты в моче.
Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение Кетоновые тела в моче (кетонурия) появляются при кетонемии, которая возникает при голодании, сахарном диабете, повышении концентрации жиромобилизующих гормонов в крови. Определение белка тест-полосками "Альбуфан" Принцип Тест основан на изменении цвета с желтого до зелено‑голубого кислотно-основных индикаторов (тетрабромфенолового синего и эфира тетрабромфенолфталеина) под влиянием белков. Проба наиболее чувствительна к альбуминам, значительно менее чувствительна к глобулинам, мукопротеинам, гемоглобину. При сильно щелочном рН мочи проба может давать ложноположительные результаты. Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение Небольшое количество белка в суточной моче обнаруживают и у практически здоровых лиц, однако в разовой порции мочи такие концентрации обычными методами не выявляются. Часть этих белков сывороточного происхождения, другая часть ‑ продукт клеток мочевыводящих путей. В зависимости от места возникновения протеинурию подразделяют на преренальную (связана с усиленным распадом белка тканей или выраженным гемолизом), ренальную (обусловлена патологией клубочков или канальцев почек) и постренальную (связана с воспалением мочевыводящих путей). Определение билирубина и уробилиногена тест-полосками "Иктофан" Принцип Полоски содержат две зоны индикации – для билирубина и для уробилиногена. Первый тест основан на реакции сочетания билирубина со стабилизированным диазореактивом. Реакционная зона содержит п-нитрофенилдиазониевый п-толуолсульфонат, натриевый бикарбонат и сульфосалициловую кислоту. При контакте с конъюгированным (прямым) билирубином через 30 сек появляется сиреневато-бежевая (сиреневато-розовая) окраска, интенсивность которой зависит от количества определяемого билирубина. Во втором тесте определение уробилиногена основано на реакции азосочетания уробилиногена со стабилизированной солью диазония. Реакционная зона меняет цвет в присутствии уробилиногена на розовый или красный. Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение
Появление билирубина в моче связано с возникновением механической или паренхиматозной желтухи, при которых из крови в мочу фильтруется прямой билирубин. Повышение концентрации уробилиногена в моче наблюдается при паренхиматозных заболеваниях печени (гепатиты, циррозы, отравления), при гемолитических состояниях, кишечных заболеваниях, связанных с избыточным всасыванием стеркобилиногена слизистой оболочкой кишечника (энтероколиты, запоры). Определение гемоглобина и эритроцитов тест-полосками "Гемофан" Кровь в моче может находиться в двух видах – в виде клеток крови (гематурия, эритроцитурия) или в виде кровяного пигмента (гемоглобинурия). Принцип Зона индикации тест-полосок содержит органический гидропероксид (куменовая перекись водорода) и индикатор тетраметилбензидин. Гемоглобин катализирует окисление индикатора гидропероксидом с образованием окрашенных в сине-зеленый цвет продуктов. При отрицательной реакции зона индикации остается желтоватой (без зеленого оттенка). В присутствии свободного гемоглобина (гемоглобинурия или гемолиз присутствовавших первично эритроцитов) вся сенсорная зона окрашивается в достаточно гомогенный сине‑зеленый цвет. Неизмененные (целые) эритроциты (микрогематурия) проявляются интенсивно окрашенными сине‑зелеными точками или пятнышками на неокрашенной реагентной зоне или равномерной сине-зеленой окраской всей зоны (макрогематурия). Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение Единичные эритроциты обнаруживаются в моче даже абсолютно здоровых людей. У практически здоровых людей в сутки выделяется до 1 миллиона эритроцитов, что соответствует содержанию в 1 мкл мочи 1 эритроцита. Гематурию обнаруживают при поражении паренхимы почки (гломеруло‑ или пиелонефрит, опухоли), тяжелой физической нагрузке, поражении мочевыводящих путей. Определение кетоновых тел и глюкозы тест-полосками Принцип Полоски содержат две зоны индикации – для кетоновых тел и для глюкозы. Принцип определения кетоновых тел такой же, как в случае полосок "Кетофан". Принцип определения глюкозы такой же, как в случае полосок "Глюкофан". Нормальные величины
Клинико-диагностическое значение Значение соответствует таковому у приведенных выше экспресс‑тестов "Глюкофан" и "Кетофан". Определение рН, глюкозы, кетоновых тел, белка и крови Принцип Диагностические полоски "Пентафан" имеют 5 зон индикации для определения кетоновых тел, крови, глюкозы, белка и величины рН. Принцип определения рН заключается в переходе цвета смешанного кислотно-основного индикатора в диапазоне рН 5,0‑9,0 от оранжевой окраски в желтую, далее в зеленую до появления синего цвета.
Принцип определения крови такой же, как полосками "Гемофан", белка ‑ такой же, как полосками "Альбуфан", кетоновых тел ‑ такой же, как полосками "Кетофан", глюкозы такой же, как полосками "Глюкофан". Нормальные величины
Оформление работы Указывают принципы методов, регистрируют полученные результаты исследования образцов мочи в виде таблицы и, учитывая результаты "Лабораторной работы 1", делают общие выводы о возможной патологии. (Для анализа мочи на патологические компоненты можно использовать другие варианты существующих экспресс-тестов, соответствующих выполнению поставленной задачи исследования).
Показатель |
Вид теста |
Образцы мочи | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Норма | № 1 | № 2 | № 3 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| рН | Пентафан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Глюкоза | Глюкофан Диафан Пентафан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Белок | Альбуфан Пентафан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Кетоновые тела | Кетофан Диафан Пентафан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Билирубин | Билифан Иктофан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Уробилиноген | Иктофан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Гемоглобин | Гемофан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Эритроциты | Гемофан | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Лабораторная работа 3.
Определение содержания креатинина в моче
Принцип
Креатинин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой пират креатинина оранжевого цвета; интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации креатинина.
Реактивы
1) 10 % раствор NaOH, 2) насыщенный раствор пикриновой кислоты,
3) стандартный раствор креатинина (0,177 ммоль/л).
Материал для исследования
Моча (разведение 1:50)
Проведение анализа
| Опыт, мл | Стандарт, мл | |
| Моча Стандартный раствор креатинина Дистиллированная вода NaOH Насыщенный р-р пикриновой кислоты | 0,5 ‑ 0,5 0,5 0,5 | ‑ 0,5 0,5 0,5 0,5 |
| Перемешивают, инкубируют 20 мин, измеряют оптическую плотность пробы против Н2О, длина волны 500‑560 нм, кювета 0,5 см | ||
Расчет
Креатинин [ммоль/л] = 
.,
где: ЕОП ‑ оптическая плотность пробы, ЕСТ ‑ оптическая плотность стандарта, ССТ ‑ концентрация стандартного р-ра, 50 ‑ разведение мочи.
Нормальные величины
Сыворотка женщины 44‑88 мкмоль/л
мужчины 44‑100 мкмоль/л
Суточная моча 4,4‑17,7 ммоль/сут
Клинико‑диагностическое значение
Увеличение концентрации креатинина в моче: при повышенной физической активности, лихорадочных состояниях, выраженной недостаточности функции печени, сахарном и несахарном диабете, синдроме длительного раздавливания, острых инфекциях. Снижение показателя: при хроническом нефрите, мышечной атрофии, дегенерации и амилоидозе почек, лейкемии, голодании. Содержание креатинина не является чувствительным тестом в ранней стадии заболевания почек.
Оформление работы
Указывают принцип метода, регистрируют результаты анализа, сравнивают полученные данные с нормальными значениями, делают вывод о наличии патологических отклонений, отмечают практическую значимость работы.
Лабораторная работа 4.
Проба Реберга: определение клиренса креатинина (теоретически)
Материал для исследования
1) Сыворотка крови. 2) моча.
Принцип
Если вещество присутствует в плазме в стабильной концентрации, физиологически инертно, свободно фильтруется в клубочках, а также не секретируется, не реабсорбируется, не синтезируется и не превращается в почках, то количество этого вещества, профильтрованного в клубочках, равно количеству, выведенному с мочой. Образовавшийся в организме креатинин практически полностью фильтруется в почечных клубочках и не подвергается реабсорбции в почечных канальцах. Соотношение концентраций креатинина в моче и плазме крови за определенный промежуток времени позволяет судить о фильтрующей способности почек.
Проведение анализа
Обследуемый выпивает натощак 400‑500 мл воды или слабого чая. Немедленно идет в туалет. После мочеиспускания отмечают точное время. Ровно через 30 мин из вены берут кровь и определяют в ней концентрацию креатинина. Через час полностью собирают мочу и определяют её общий объем, вычисляют минутный диурез, определяют концентрацию креатинина в моче (см "Определение содержания креатинина в сыворотке крови и моче").
Расчет
,
где: С – показатель клиренса (мл/мин), D – минутный диурез (мл/мин),
U и P – концентрация креатинина в моче и плазме, соответственно.
Нормальные величины
| Скорость клубочковой фильтрации по креатинину | 80‑120 мл/мин |
Клинико-диагностическое значение
Креатинин является единственным веществом, полностью фильтруемым почками и не подвергаемым реабсорбции, поэтому клиренс креатинина принимают за 100% и сравнивают с ним клиренс любого иного вещества.
Повышение скорости клубочковой фильтрации наблюдается при увеличении сердечного выброса, при беременности, отравлении окисью углерода, белковой диете и гиперкатаболических состояниях, анемии.
Снижение показателя клиренса выявляется при шоке, кровотечении, дегидратации, сердечной недостаточности, различных патологиях почек, гипофункции коры надпочечников.
Оформление работы
Отмечают принцип метода, указывают ценность показателя и клинико-диагностическое значение анализа.
Вопросы для самоконтроля
1) Функции почек, роль коркового и мозгового вещества. Нефрон, противоточно-умножительный механизм образования мочи. Состав, параметры мочи.
2) Секреция и реабсорбция (глюкоза, натрий, вода и др.). Почечный порог.
3) Гормоны, регулирующие водно-электролитный обмен, строение и эффекты. Места и химизм синтеза альдостерона, механизм действия на клетку, роль. Ренин‑ангиотензин‑альдостероновая система и антидиуретический гормон.
4) Гормоны, регулирующие минеральный обмен, их строение и эффект в организме. Места и химизм синтеза паратгормона, кальцитонина, кальцитриолов, механизм действия на клетку, взаимодействие в организме.
5) Детоксикационная функция почек по утилизации и выведению аммиака и других азотистых продуктов. Остаточный азот мочи. Почки в синтезе креатина, роль креатинфосфата, клиренс креатинина и др
6) Химизм аммониогенеза и сопряжение с ацидогенезом и реабсорбцией натрия. КОС и почки, буферные системы организма и аммиачный буфер.
7) Патологические компоненты мочи. Моча при сахарном диабете, патологии почек. Виды протеинурии. Появление билирубина, желчных кислот, крови.
Тестовые задания
Выбрать один правильный ответ.
1. Функцией фракции альбуминов в плазме крови является
1) транспорт эндогенных метаболитов
2) участие в острофазных реакциях
3) участие в свертывании крови
4) регуляция белкового обмена
5) участие в иммунных реакциях
2. Для плазмы крови при гемолитической желтухе характерно
1) повышение концентрации прямого билирубина
2) увеличение количества желчных кислот
3) накопление непрямого билирубина
4) повышение концентрации гемоглобина
5) увеличение количества гемосидерина
3. К ингибиторам протеиназ плазмы крови относят
1) фибронектин
2) α2-макроглобулин
3) гаптоглобин
4) церулоплазмин
5) реагин
4. Белками плазмы крови, активно участвующими в реакциях иммунитета, являются
1) альбумины
2) фетопротеины
3) компоненты системы комплемента
4) церулоплазмины
5) трансферрины
5. Собственно плазменным (плазмоспецифичным функциональным) ферментом является
1) аланинаминотрансфераза
2) аспартатаминотрансфераза
3) щелочная фосфатаза
4) холинэстераза
5) лактатдегидрогеназа
6. Развитие метаболического алкалоза может быть связано
1) с гемолитической анемией
2) с неукротимой рвотой
3) с сахарным диабетом
4) с гипервентиляцией легких
5) с гипофункцией почек
7. Среди регуляторов водно-солевого баланса организма отсутствует
1) антидиуретический гормон
2) ренин–альдостероновая система
3) атриопептиновая система
4) гипоталамо–гипофизарно–надпочечниковая система
5) система ангиотензин I – ангиотензин II
8. В почках регулируемая реабсорбция ионов кальция происходит
1) в проксимальных канальцах
2) в дистальных канальцах
3) в восходящей части петли Генле
4) в собирательных трубочках
5) на всем протяжении нефрона
9. Почки участвуют в повышении уровня рН крови благодаря активации
1) секреции мочевины
2) реабсорбции натрия
3) реабсорбции Н2О
4) секреции урата
5) аммониогенеза
10. Снижение содержания креатинина в моче происходит
1) при нарушении функции почек со снижением фильтрации
2) в случае угнетения реабсорбции воды и глюкозы
3) при нарушении синтетической функции печени
4) при нарушении синтетической функции почек
5) в случае усиления распада нуклеопротеинов в тканях
Ситуационные задачи
Ответы подробно пояснить.
1. У больного диагностирован сахарный диабет I типа. Содержание глюкозы в плазме крови пациента, взятой натощак, оказалось равным 15 ммоль/л, гликированного гемоглобина 8,5 %. Указать, следствием чего является гликирование гемоглобина. Пояснить, есть ли глюкоза в моче и каковы возможные причины её появления. Назвать характерные изменения биохимических показателей, выявляемые в крови и моче при сахарном диабете.
2. У больного выявлено значительное увеличение показателя остаточного азота крови. Пояснить, можно ли на основании этого анализа говорить о заболевании почек.
3. У больного затруднено дыхание, оно становится поверхностным, рН крови 7,31, рСО2 равен 52 ммоль/л, показатель [HCO3–] равен 37 ммоль/л, щелочной резерв увеличен. Пояснить, какой вид нарушения кислотно-основного состояния имеется у больного. Указать механизмы компенсации.
4. При неправильной эксплуатации печного отопления у людей часто происходит отравление угарным газом. Объяснить, что происходит с гемоглобином крови при отравлении СО. Показать, как влияет структура гемоглобина на его функцию. Назвать, какие ферменты плазмы крови с четвертичной структурой имеют диагностическое значение, и пояснить, какие из их изоферментов используют в диагностике инфаркта миокарда и почему.
Раздел 12.
Ротовая жидкость.
Десневая жидкость и пародонт
ТЕМА 12.1.
Ротовая жидкость. Десневая жидкость и пародонт
Актуальность
Ротовая жидкость (в обиходе слюна) ‑ многокомпонентная биологическая жидкость, оказывающая влияние на органы и ткани полости рта. Ротовая жидкость содержит органические соединения (белки, ферменты, полипептиды, липиды, витамины, гормоны, кислоты), низкомолекулярные азотистые вещества (мочевина, нитраты, нитриты, аммиак, тиоцианаты/роданиды) и другие неорганические компоненты (кальций, калий, натрий, магний, фосфаты, хлориды, карбонаты), уровень которых зависит от состояния полости рта.
Компоненты слюны защищают мягкие и твёрдые ткани полости рта. Муцины защищают ткани от повреждения и придают термоустойчивость, предотвращают адгезию бактерий на слизистой оболочке и зубах, стабилизируют мицеллы слюны. В ротовой жидкости активны более 100 ферментов. Высоко значимые гликозидазы – a-амилаза паротидной железы и лизоцим. Цитолиз при паротите ведёт к росту активности a‑амилазы в крови и моче. При пародонтите, гингивите в слюне увеличивается активность щелочной и кислой фосфатаз слюнных желёз (и поступающих из бактерий, лейкоцитов, эпителия).
Ионы Са2+ и гидрофосфаты мицелл слюны способствуют минерализации эмали. Дестабилизация КОС и снижение рН превращает слюну из минерализующей жидкости в деминерализующую, снижает устойчивость к кариесу. Пероксидаза слюны катализирует окисление роданидов (тиоцианатов) в присутствии Н2О2 до ионов OSCN– и гипотиоцианата (HOSCN), антибактериальная активность которых выше, чем у пероксида водорода. Максимум окисления роданидов приходится на рН=5‑6, когда велика опасность деминерализации тканей зуба.
При воспалениях пародонта прогрессируют окислительные процессы, особенно перекисное окисление липидов и белков. В ограничении проявлений гингивита, периодонтита и других заболеваний пародонта важны антиоксиданты, в том числе неферментативные ‑ витамины С, Е и др. Вместе с тем, аскорбат является фактором созревания коллагена, постояннно обновляющегося в связочном аппарате и других тканях пародонта. В ряде случаев исследование химического состава слюны используют для диагностики в клинике внутренних болезней.
Цель
1) Получить комплексные представления о слюне и десневой жидкости, их значении в поддержании гомеостаза полости рта и влиянии на ткани зуба в норме и при патологии для понимания природы заболеваний полости рта.
2) Оценить основные параметры слюны, значение органических и неорганических ингредиентов на примере белков (муцинов), ферментов (α-амилазы, щелочной фосфатазы), компонентов минеральной фазы (кальция, фосфатов, хлоридов, роданидов).
3) Научиться определять обеспеченность организма витамином С, известного в качестве фактора поддержания здоровья тканей пародонта.
Вопросы для самоподготовки
1) Ротовая жидкость. Происхождение. Основные параметры (объем, скорость образования, показатель рН и др.). Разнообразие химического состава. Биологические функции.
2) Состав слюны из протоков слюнных желез: основные неорганические и органические компоненты. Нестимулированная и стимулированная слюна. Основные отличия. Причины и факторы стимуляции.
3) Организация слюны. Мицеллы, их виды и строение, роль белков-муцинов, ионов кальция и фосфатов в построении мицелл.
4) Кислотно-основное состояние слюны, химические и физиологические механизмы его обеспечения, значение зубной эмали и буферных систем.
5) Значение ротовой жидкости в процессах минерализации, де‑ и реминерализации зубной эмали. Механизмы и условия поступления минеральных веществ из ротовой жидкости в эмаль.
6) Белки ротовой жидкости, происхождение, особенности строения, разнообразие, полифункциональность. Белки неспецифической защиты полости рта. Специфические белки слюны.
7) Ферменты слюны, их происхождение, разнообразие, роль в полости рта.
8) Иммуноглобулины ротовой жидкости: происхождение, строение, функции. Секреторный иммуноглобулин А: происхождение секреторного компонента, трансцитоз, значение.
9) Пелликула как поверхностное образования эмали: происхождение, химический состав. Преобразования белков ротовой жидкости и механизмы их участия в построении пелликулы.
10) Происхождение, органические и минеральные компоненты зубной бляшки. Динамика микрофлоры при созревании бляшки, биохимические особенности кариесогенных микробов, синтез углеводных полимеров матрикса бляшки из простых сахаров, использование продуктов метаболизма сахаров в жизнедеятельности микробов (муреин). Роль слюны в минерализации бляшки, состав и динамика созревания минеральных компонентов, зубной камень.
11) Десневая жидкость: образование, роль в полости рта, особенности формирования химического и клеточного состава, белки и ферменты.
12) Пародонт как комплекс тканей, особенности функционирования коллагена в связочном аппарате и других тканях пародонта. Значение десневых карманов и зубного камня в развитии заболеваний пародонта. Биохимические особенности пародонтопатогенных бактерий.
13) Нейтрофилы десневой жидкости в механизмах антимикробной защиты (О2-зависимых и независимых) в тканях полости рта. Окислительные механизмы в поддержании здоровья пародонта. Перекисное окисление липидов, синдром пероксидации и его причины.
14) Строение и роль витаминов-антиоксидантов в поддержании здоровья пародонта, их участие в метаболических реакциях. Особенности системы антиоксидантной защиты тканей пародонта.
Задания для самоподготовки
1) По приведённой информации подобрать для каждой функции один или несколько белков/ферментов ротовой жидкости.
| Функция | Белок / фермент |
| 1) Переваривание | А. Муцины |
| 2) Минерализация | Б. Амилаза |
| 3) Защита тканей | В. Белки, богатые пролином |
| 4) Защита от кариеса | Г. Лизоцим |
| 5) Смазка и обволакивание | Д. Статерины |
| 6) Антибактериальная | Е. Лактоферрин |
| 7) Антигрибковая | Ж. Пероксидазы |
| 8) Антивирусная | З. Гистатины |
| 9) Стабилизация мицелл | И. Цистатины |
| 10) Очищающая | К. Фосфатазы |
| 11) Антиоксидантная | Л. Карбоангидраза |
| 12) Поддержание кислотно-основного состояния | М. Секреторный иммуноглобулин A |
2) Представить в виде таблицы сравнительный анализ органических компонентов ротовой и десневой жидкостей.
3) Представить в виде таблицы сравнительный анализ минерального состава ротовой и десневой жидкостей.
Лабораторная работа 1.
Определение рН ротовой жидкости
Актуальность
Смешанная слюна человека имеет реакцию среды, близкую к нейтральной. В механизмах обеспечения постоянства рН принимают участие буферные системы слюны ‑ карбонатная, фосфатная, белковая. От показателя кислотно-основной реакции зависит состав, коллоидная устойчивость и минерализующий потенциал мицелл слюны, определяющий процессы минерализации, реминерализации зубной эмали и её кариесорезистентность. На кислотность слюны влияют гигиеническое состояние полости рта и характер пищи.
Материал для исследования
Слюна нестимулированная (собирают после ополаскивания рта водой).
Слюна стимулированная (в качестве стимулятора используют полоскание рта раствором сахарозы с добавлением сока лимона/лимонной кислоты).
Оборудование
1) рН-метр, 2) синяя и красная лакмусовая индикаторная бумага, 3) универсальные индикаторные тест-полоски и эталонная шкала рН.
С помощью индикаторной бумаги
Принцип
Определение рН слюны основано на изменении окраски индикаторов при взаимодействии с компонентами ротовой жидкости.
Проведение анализа
Предметное стекло кладут на лист белой бумаги, на стекло помещают образцы лакмусовой бумаги, на каждый наносят по 3 капли слюны, определяют её реакцию: 1) синяя лакмусовая бумага краснеет, красная не изменяет цвет ‑ кислая реакция слюны, 2) красная бумага синеет, синяя не изменяет цвет ‑ щелочная реакция слюны, 3) обе бумаги не изменяют цвет ‑ нейтральная реакция слюны. В работе можно использовать и другие виды индикаторных бумаг (с учётом диапазона рН).
С помощью экспресс-тестов
Принцип
Определение рН слюны основано на изменении окраски индикаторной зоны тест-полоски при взаимодействии с элементами ротовой жидкости.
Проведение анализа
Предметное стекло кладут на лист белой бумаги, на стекло помещают экспресс-полоску, в области её индикаторной зоны наносят 2 капли слюны и, выждав указанное в инструкции время, сравнивают окраску индикаторной зоны с контрольной (эталонной) шкалой рН, нанесённой на упаковку экспресс‑теста.
С помощью рН-метра
Принцип
Определение рН слюны основано на ионных процессах, происходящих на измерительном электроде рН-метра.
Проведение анализа
Стимулированную и нестимулированную слюну собирают в отдельные флаконы и измеряют значение рН этих жидкостей согласно инструкции, прилагаемой к прибору.
Нормальные величины
Значение рН смешанной слюны 6,4‑7,3.
Практическое значение работы
Сдвиг рН смешанной слюны в кислую сторону нарушает процессы минерализации и реминерализации ослабленной зубной эмали, что способствует развитию кариеса.
Сдвиг рН смешанной слюны в щелочную сторону нарушает коллоидоустойчивость мицелл слюны, что способствует осаждению фосфата кальция из состава мицелл слюны и формированию зубных камней.
Оформление работы
Сравнивают полученные результаты (стимулированная и нестимулированная слюна) с нормальными значениями, делают вывод о наличии отклонений и клиническом значении исследуемого показателя.
| Объект | |||
Показатель рН
