Газохроматографическим методом (алкилнитритным).

Сущность метода заключается в превращении спиртов, содержащихся в пробе, в соответствующие алкилнитриты, более летучие, чем спирты соединения, которые затем подвергаются хроматографическому разделению.

На хроматографической колонке компоненты смеси разделяются и поочередно поступают в детектор по теплопроводности (ДТП), сигналы которого регистрируются в виде хроматографических пиков и обрабатываются регистрирующей системой. Система обнаруживает пики, определяет их высоты и идентифицирует путём сравнения параметров удерживания с параметрами, полученными при анализе стандартной смеси. Расчёт концентрации этилового спирта производится после градуировки с использованием внутреннего стандарта. Детектор по теплопроводности по своему типу является дифференциальным концентрационным детектором, передающим мгновенное значение одной из характеристик (концентрации) во времени и фиксирующее изменение концентрации вещества на выходе из колонки. В концентрационном детекторе площадь пика обратно пропорциональна скорости потока газа носителя и прямо пропорциональна количеству вещества. Отсюда следует, что с изменением скорости потока изменяется и площадь пика, высота же остаётся постоянной. Поэтому в концентрационных детекторах концентрацию вещества следует рассчитывать по высоте хроматографического пика. Внутренним стандартом служит водный раствор пропилового спирта известной концентрации. В качестве газа-носителя целесообразно использовать гелий, так как при этом во всем диапазоне определяемых концентраций обеспечивается удовлетворительная зависимость сигнала детектора от концентрации этилового спирта.

При определении этилового спирта качественный анализ заканчивается идентификацией н-пропилового спирта.

При проведении исследования на наличие суррогатов алкоголя или летучих ядов, качественное обнаружение включает в себя идентификацию алкилнитритов метанола, этанола, изо-пропанола, н-пропанола, изо-бутанола, н-бутанола, изо-амилового и амилового спиртов только как предварительная проба.

1.Условия ПРИ ПРОВЕДЕНИИ измерений

 

При выполнении измерений в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

- температура воздуха 22 ± 4°С;

- влажность воздуха не более 80% при температуре 25°С;

- электропитание в соответствии с паспортом хроматографа и системы регистрации;

Параметры прибора для проведения анализа задаются, исходя из вида используемой колонки. Ориентировочные значения параметров приведены в таблице 1.

 

Таблица 1. Диапазоны параметров анализа

Наименование	условия
Термостат колонки: Начальная температура Программирование температуры	40-105^0С - нет
Инжектор: температура объем вводимой пробы	70-120^0С 0,5 см^3
Детектор: тип температура	ДТП 100-170^0С
Газ-носитель: тип расход через колонку	Гелий 20-30 см^3/мин

 

 

2.Подготовка ОБОРУДОВАНИЯ к выполнению измерений

При подготовке к выполнению измерений проводят следующие работы:

- готовят измерительную аппаратуру, рабочие растворы, вспомогательный материал;

- включают хроматограф и выводят его на режим работы, в соответствии с техническим описанием и инструкцией по эксплуатации;

- задают оптимальные условия анализа.

 

Таблица 2. Оптимальные параметры анализа

Наименование	условия
Термостат колонки насадочной колонки – длина 2м, диаметр 3мм, сорбент: фаза 7% ПФМС-4, твёрдый носитель хроматон АW-DMCS фракция 0,16 – 0,20 мм.: начальная температура программирование температуры	60^0С нет
Инжектор: температура объем вводимой пробы	70^0С 0,5 см^3
Детектор: тип температура	ДТП 100^0С
Газ-носитель Тип Расход через колонку при 60^0С	Гелий 25 мл\мин

 

3.ПОДГОТОВКА РАБОЧИХ РАСТВОРОВ

(Температура в помещении на момент приготовления рабочих расторов должна составлять 22 ±4^оС).

3.1.ПРИГОТОВЛЕНИЕ 100 МЛ РАСТВОРА 30 % НАТРИЯ НИТРИТА.

Взвешивают 30 г натрия нитрита и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в деионизированной воде. После полного растворения натрия нитрита, объём раствора доводят деионизированной водой до метки и перемешивают.

 

3.2. ПРИГОТОВЛЕНИЕ 100 МЛ РАСТВОРА 4 ‰ Н-ПРОПИЛОВОГО СПИРТА.

В мерную колбу вместимостью 100 мл, вносят 1-2 мл деионизированной воды, затем 0,4 мл н-пропилового спирта и доводят объем раствора деионизированной водой до метки (температура воды и н-пропилового спирта должна быть 20 ⁰С ±2^оС).

 

3.3. ПРИГОТОВЛЕНИЕ 100 МЛ РАСТВОРА 50% ТРИХЛОРУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ.

Взвешивают 50 г трихлоруксусной кислоты и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл. Трихлоруксусную кислоту растворяют в деионизированной воде и доводят объем раствора деионизированной водой до метки, тщательно перемешивают.

 

4. ПРИГОТОВЛЕНИЕ СТАНДАРТНЫХ РАСТВОРОВ.

4.1. ПРИГОТОВЛЕНИЕ 100 МЛ РАСТВОРА 1% ЭТИЛОВОГО СПИТРА.

Для приготовления раствора берут этиловый спирт с объёмной концентрацией этанола не менее 75 об % (исходный раствор). По объёмной концентрации этанола в исходном растворе определяют массовую концентрацию С₀ и плотность раствора r_0. По массовой концентрации С₁=1% определяют плотность 1% раствора этанола р₁= 0.9964. Рассчитывают объём исходного раствора V₀ необходимый для приготовления 1% раствора этанола в объеме V₁ =500 мл но формуле:

(1)

Используя пипетку вместимостью 10 мл, переносят рассчитанный объем V₀ исходного раствора в мерную колбу и доводят объем раствора деионизированной водой до 500 мл.

 

4.2. ПРИГОТОВЛЕНИЕ 50 МЛ ЭТАЛОННЫХ РАСТВОРОВ 0,1‰, 0,3‰_, 1‰, 2‰, 4‰, 6‰ ЭТИЛОВОГО СПИТРА

Приготовление растворов проводят в соответствии с данными указанными в таблице 3.

Необходимый объем 1‰ раствора этанола переносят пипеткой в мерную колбу емкостью 50 мл содержащею небольшое количество деионизированной воды и доводят объем раствора деионизированной водой до метки.

 

Таблица 3. Таблица исходных объёмов рабочего - 1%, водного раствора этилового спирта для эталонных растворов.

Приготавливаемая Концентрация,‰	Объем исходного раствора, мл	Емкость пипетки,мл
0,1 0,3	0,5 1,5	10 10

Раствор переносят в два приема по 10 мл каждый.

Раствор переносят в три приема по 10 мл каждый

 

 

5.ТРЕБОВАНИЯ МАРКИРОВКИ И УСЛОВИЙ ХРАНЕНИЯ РАСТВОРОВ.

5.1. На ёмкостях с готовыми растворами должны быть наклеены этикетки с указанием наименования раствора, его концентрации, даты приготовления и срока хранения.

5.2. Раствор натрия нитрита хранят в ёмкостях из темного стекла с притертой пробкой при температуре от 0⁰ до 5°С, срок хранения 1 месяц.

5.3. Раствор трихлоруксусной кислоты, хранят в ёмкостях из стекла с притертой пробкой при температуре от 0⁰С до 5°С, срок хранения 1 месяц.

5.4. Раствор н-пропанола хранят в ёмкостях из темного стекла с притертой пробкой при температуре 0⁰С до 5⁰С, срок хранения 5 суток.

5.5. Растворы этанола хранят в ёмкостях из стекла с притертой пробкой при температуре от 0⁰С до 5⁰С, срок хранения 5 суток

 

6.МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ КОНЦЕНТРАЦИЙ ВЕЩЕСТВ

При приготовлении эталонных растворов устанавливают метрологические характеристики концентраций веществ согласно данных таблицы 4.

 

Таблица 4. Границы абсолютной погрешности _х значения аттестованной характеристики при доверительной вероятности 0,95.

Характеристика	Границы абсолютной погрешности
Объемная концентрация пропанола об %	±0,007
Массовая концентрация этанола в 1% растворе, мас %	±0,017
Содержание этанола в контрольных растворах, ‰ 0,1 0,3	±0,002 ±0,007 ±0,02 ±0,04 ±0,07 ±0,11

 

7. СТАНДАРТИЗАЦИИ ОБОРУДОВАНИЯ ПО ИДЕНТИФИКАЦИИ СПИРТОВ

7.1. Раствор смеси спиртов для качественного определения.

7.1.1.Приготовление стандартной смеси: В колбу вместимостью 100 мл вносят по 0,06 мл метилового и этилового спирта, и по 0,12 мл н-амилового, изоамилового, н-бутилового, изобутилового, н-пропилового, изопропилового спиртов. Доводят до метки деионизированной водой и перемешивают. Смесь хранят в ёмкостях из темного стекла с притертой пробкой при температуре от 0⁰ до 5°С, срок хранения 1 месяц.

13.2. Анализ смеси спиртов проводится по следующей методике: В пенициллиновый флакон содержащий 0,5 мл 50% раствора ТХУ вносят 0,5 мл смеси восьми спиртов. Флакон закрывают стандартной резиновой пробкой, фиксируют пробку к горловине и тщательно перемешивают. Затем во флакон шприцем через пробку добавляют 0,3 мл раствора нитрита натрия и встряхивают маятникообразными движениями 20-30 раз, Флакон оставляют на 1 минуту. После чего из флакона шприцем путем прокола пробки отбирают 1 мл паро-газовой фазы, которую тотчас вводят в прибор. Фиксируют времена выхода пиков алкилнитритов. В дальнейшем идентификацию проводят по полученным временам удерживания. Исследуемую пробу исследуют в тех же условиях и по той же методике.

8.КАЛИБРОВКА ОБОРУДОВАНИЯ.

Калибровка выполняется каждый раз после перерыва в измерениях более 1 недели, установки, настройки и ремонта хроматографа, замены колонки.

Калибровка выполняется по методу внутреннего стандарта, при этом для расчета используется отношение высот или площадей пика этилнитрита к пику пропилнитрита.

Для каждой концентрации проводят 3 измерения.

Калибровку проводят используя смесь эталонных растворов этилового спирта и внутреннего стандарта, которую готовят непосредственно перед калибровкой путём смешения точно измеренных равных объёмов эталонного раствора и внутреннего стандарта (см.примечание п.1).

8.1. Во флакон вносят 0,5 мл раствора трихлоруксусной кислоты. В другом флаконе смешивается 2 мл исследуемой пробы и 2 мл 0,4% раствора пропанола. Из этого флакона отбирается 1 мл смеси и переносится во флакон с трихлоруксусной кислотой. Флакон закрывают резиновой пробкой и фиксируют в горловине флакона, перемешивают.

8.2. После перемешиваний за минуту до начала измерения во флакон шприцом вводят 0,3 мл 50% раствора нитрита натрия. Содержимое флакона встряхивают (около 30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 минуту.

8.3. Из флакона шприцем путем прокола пробки отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, вводят в хроматограф и начинают анализ. Регистрируют хроматограмму.

После сбора данных 12 измерений, для трёх проб каждой концентрации, проводится градуировка с помощью программного обеспечения в зависимости от типа используемого хроматографа.

 

9. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФАКТОРА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ

Определение фактора чувствительности проводится перед каждой серией измерений, по одной пробе каждой концентрации ежедневно. Средствами контроля служат эталонные растворы этилового спирта с внутренним стандартом (н-пропилового спирта) с содержанием этилового спирта 0,1‰, 0,3‰ и 6‰, которые подвергаются газохроматографическому исследованию в тех же условиях, что и исследуемые пробы.

9.1. Во флакон вносят 0,5 мл раствора трихлоруксусной кислоты. В другом флаконе смешивается 2 мл исследуемой пробы и 2 мл 0,4% раствора пропанола. Из этого флакона отбирается 1 мл смеси и переносится во флакон с трихлоруксусной кислотой. Флакон закрывают резиновой пробкой и фиксируют в горловине флакона, перемешивают.

9.2. После перемешивания за минуту до начала измерения во флакон шприцом вводят 0,3 мл 50% раствора нитрита натрия. Содержимое флакона встряхивают (около 30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 минуту.

9.3. Из флакона шприцем путем прокола пробки отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, вводят в хроматограф и начинают анализ. Регистрируют хроматограмму.

Если расхождения во временах удерживания спиртов превышают 5%, вносят соответствующие изменения в идентификационную таблицу компонентов.

Контрольное измерение признают удовлетворительным, если для всех растворов модуль разности измеренного и истинного значения содержания не превосходит абсолютной погрешности измерения ∂ (для раствора с содержанием этилового спирта 0,1‰±0,04; 0,3‰±0,05; 6‰±0,3).

При получении результатов измерений, не удовлетворяющих нормам абсолютной погрешности, выясняют причину и устраняют ее. В случае необходимости градуируют прибор.

 

10.МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Исследование проводится для установления наличия в анализируемых пробах этилового спирта и н-пропилового спирта. В случае обнаружения н-пропилового спирта необходимо использовать в качестве внутреннего стандарта другой спирт, например изо-пропиловый (О.С.Ч).

10.1. Измерение без внесения внутреннего стандарта.

Во флакон вносят 0,5 мл 50% раствора трихлоруксусной кислоты, после чего – 0,5 мл исследуемой пробы. Флакон закрывают резиновой пробкой, пробку фиксируют в горловине флакона, смесь перемешивают.

10.2. После перемешиваний за минуту до начала измерения во флакон шприцом вводят 0,3 мл 30% раствора натрия нитрита. Содержимое флакона встряхивают (около 30 маятникообразных движений) и оставляют на 1 минуту.

10.3. Из флакона шприцем путем прокола пробки отбирают 0,5 мл парогазовой фазы, вводят в хроматограф и начинают анализ. Анализ проводится в течение того времени, которое должно быть не менее времени выхода используемого внутреннего стандарта (при использовании в качестве внутреннего стандарта н-пропанола обычно среднее значение времени анализа составляет 2 минуты).

При обнаружении пиков регистрируют времена удерживания компонентов, идентифицируют алкилнитриты по временам удерживания в соответствии с компонентами тестовой смеси спиртов, фиксируют их высоты. Регистрируют результат.

 

10.4. Измерение с внутренним стандартом (первое измерение).

Во флакон вносят 2 мл исследуемой пробы и 2 мл 0,4% раствора пропанола, тщательно перемешивают.

10.5. Далее отбирают 1 мл смеси и переносят во флакон, содержащий 0,5 мл 50% раствора трихлоруксусной кислотой. Флакон закрывают резиновой пробкой и фиксируют в горловине флакона, перемешивают. Далее выполняют действия согласно п.п. 10.2, 10.3.

Если измерения без внутреннего стандарта и первого измерения с внутренним стандартом показали отсутствие этилового спирта в пробе, то повторное измерение с внутренним стандартом не проводится. Констатируют отсутствие этилового спирта, регистрируют результат.

Если измерение показало присутствие этилового спирта в пробе необходимо провести второе измерение с внутренним стандартом согласно п.10.5.

При судебно-медицинской экспертизе трупного материала в случаях, когда забор крови не представляется возможным, на судебно-химическое исследование направляют ликвор, стекловидное тело, перикардиальную жидкость, которые исследуются по той же методике описанной выше.

Также могут направляться на исследования ткани глубоких мышц бедра, и ткань почки (средняя проба). Исследования тканей мышц и органов проводится по той же методике, их навеска берётся в граммах.

10.6. Измерение без внесения внутреннего стандарта (1-е измерение). Во флакон вносят 0,5 мл 30% раствора трихлоруксусной кислоты, после чего вносят 0,5 грамм гомогенизата средней пробы ткани (мышцы или почки). Флакон закрывают резиновой пробкой, пробку фиксируют в горловине флакона, смесь перемешивают. Далее выполняют действия согласно п.п. 10.2, 10.3.

10.7. Измерение с внутренним стандартом (первое измерение). Во флакон вносят 0,5 мл 30% раствора трихлоруксусной кислоты, после чего - 0,5 грамм гомогенизата средней пробы ткани и 0,5 мл 0,4% раствора пропанола. Флакон закрывают резиновой пробкой и фиксируют в горловине флакона, перемешивают. Далее выполняют действия согласно п.п. 10.2, 10.3.

Если измерения без внутреннего стандарта и первого измерения с внутренним стандартом показали отсутствие этилового спирта в пробе, то второе измерение с внутренним стандартом не проводится. Констатируют отсутствие этилового спирта, регистрируют результат.

Если измерение показало присутствие этилового спирта в пробе необходимо провести второе измерение с внутренним стандартом согласно п.10.7.

 

11.НОРМЫ ПОГРЕШНОСТЕЙ

За окончательный результат измерений принимают среднее арифметическое значение результатов 2-х параллельных измерений, если расхождение между результатами параллельных измерений не превышает 2_ст (табл.5).

 

Таблица 5. Нормы погрешности измерения содержания этилового спирта

Диапазон массовой концентрации С, ^0/00	Показатель сходимости ст не более	Границы погрешности r при Р = 0,95 не более
0,3 –6,0	0,050^. +0,035	(0,081^.С+0,01)

- среднее значение концентрации параллельных измерений

С- концентрация стандартного раствора этилового спирта используемого для проверки градуировочной характеристики.

В случае расхождения между результатами параллельных измерений больше указанных в таблице, измерения повторяют дважды и окончательный результат рассчитывают исходя из результатов четырех измерений.

Если разность между максимальной и минимальной концентрациями определенными при четырех параллельных измерениях меньше или равна 3,6_ст, то за конечный результат принимают среднее арифметическое значение.

12. ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ.

При результате определения концентрации этилового спирта более 6 ‰, необходимо проводить разбавление пробы. Разбавление пробы проводят деионизированной водой, и учитывают соотношение разбавления при расчёте содержания этилового спирта.

Например: При разбавлении пробы в соотношении 1:2, результаты повторных измерений пробы соответственно увеличивают в два раза.

Вследствие не однородности исследуемых биологических жидкостей для расчёта концентрации этилового спирта используются коэффициенты пересчета: для крови - 0,95, для мочи - 1,05. При разбавлении проб при расчетах коэффициенты пересчета не используют.

Для ликвора, стекловидного тела, содержимого желудка, тканей глубоких мышц бедра, ткани почки (средняя проба) коэффициент пересчета принимают за 1,0.

 

13. ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ

Учитывая высокие разрешающие возможности метода и литературные данные о физиологических нормах, а также влияние начальных гнилостных процессов на результаты, в случае содержания этилового спирта в пробе до 0,1‰ включительно, дается заключение об отсутствии в исследуемых объектах этилового спирта.

При обнаружении содержания этилового спирта в пробе в концентрации свыше 0,1‰, выносится заключение об его обнаружении, и результат выдаётся в числовых показателях, с точностью до сотых долей.

При длительном хранении биологических объектов, возможны процессы гниения, приводящие к получению результатов, не связанных с употреблением алкогольных напитков. В этой связи в случаях поступления биологических объектов направленных на определение содержания этилового спирта, период хранения и доставки, которых составляет более 10 дней, а также при поступлении объектов исследования с гнилостными изменениями, в выводах необходимо производить пометку об относительности результатов исследования.

Интерпретация результатов даётся лицом (органом) направившим материал.

Примечание:

1. При проведении исследований с предварительным получением смеси эталонного раствора этилового спирта и раствора внутреннего стандарта, путём смешения 2мл раствора этилового спирта и 2мл раствора внутреннего стандарта, с дальнейшим анализом трёх проб полученной смеси;

СКО (средне квадратичное отклонение) составило 0,007417,

Относительное СКО 1,562

Оценка СКО 0,002345

При проведении исследований без предварительного получения смеси эталонного раствора этилового спирта и раствора внутреннего стандарта, т.е. при анализе пробы полученной смешением во флаконах трижды по 0,5мл эталонного раствора и 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, непосредственно перед исследованием;

СКО составило 0,01092,

Относительное СКО 2,73

Оценка СКО 0,003452

Также и для любой анализируемой жидкости.

2. После проведения серии из 10-15 измерений, но не реже, чем через 1 час, и после окончания измерений устанавливают температуру термостата колонок 95⁰С на 15-20 минут для удаления из колонки воды. После чего, при необходимости продолжения измерений, вновь устанавливают оптимальную температуру в термостате (60⁰С).

3. Вариацией температуры термостата колонок и скорости потока газа-носителя можно повысить эффективность разделения.

4. Колонка работоспособна более одного года при условии соблюдения температурного режима (не выше 95°С) и чистоты газа-носителя. Необходимо также избегать перегрузки колонок большим количеством исследуемой пробы (не более 1 см³ парогазовой фазы или 5 мкл жидкой пробы).

 

 

Необходимые средства измерения, вспомогательные устройства, реактивы.

Средства измерений

Автоматизированный газовый роматограф «Кристаллюкс 4000М» ТУ 4300-002-41390585-2002 с детектором по теплопроводности.

Версия программного обеспечения «NetChrom v 2.1» или выше.

Колба мерная 2-500-2 ГОСТ 8.234-77.

Колба мерная 2-250-2 ГОСТ 8.234-77.

Колба мерная 2-100-2 ГОСТ 8.234-77.

Колба мерная 2-50-2 ГОСТ 8.234-77.

Цилиндр измерительный 100 ГОСТ 8.234-77.

Стаканчики для взвешивания СВ-34/12 ГОСТ 25336-82.

Дозатор пипеточный переменного объёма однокональный ДВП-1-100-1000 ГОСТ 8234-77 Меры вместимости

Пипетка мерная 1-1-2-1 ГОСТ 8.234-77.

Пипетка мерная 1-1-2-2 ГОСТ 8.234-77.

Пипетка мерная 1-1-2-5 ГОСТ 8.234-77.

Пипетка мерная 1-1-2-10 ГОСТ 8.234-77.

Ареометр для спирта АСП-Т ГОСТ 18481 -81.

Термометр лабораторный ГОСТ 28498-90.

Весы лабораторные ГОСТ 8.520-2005 высокого класса точности.

Газоплотный шприц типа «Hamilton» объемом 10 мкл; погрешность +-1%.

Линейка измерительная ГОСТ 427-75

Психрометр ТУ 25-1607-054-85 и МИ 737-83

Реактивы

Гелий газообразный очищенный марки Б ТУ 51-940-80 изм 1-5

Вода очищенная ФС 42-2619-97

Кислота трихлоруксусная ТУ 6-09-1926-77

Натрия нитрит ТУ 6-09-590-75

Спирт метиловый ГОСТ 6995-77

Спирт этиловый 95% ГФX ст. 631

Спирт изопропиловый ТУ 6-09-402-87

Спирт пропиловый ТУ 6-09-402-87

Спирт изобутиловый ГОСТ 6016-77

Спирт бутиловый ГОСТ 6006-78

Спирт изоамиловый ТУ 6-09-40-703-85

Спирт амиловый ТУ 6-09-3467-79

 

Квалификация используемых реактивов должна быть не ниже «ч.д.а».

Допускается использовать в качестве внутреннего стандарта изопропиловый спирт (о.с.ч.) вместо пропилового спирта.

Вспомогательные устройства и материалы.

Насадочная колонка – длина 2м, диаметр 3мм, фаза 7% ПФМС-4, насадка – хроматон АW-DMCS 0,16 – 0,20 мм.

Иглы к шприцам типа «Hamilton» (для отбора парогазовой фазы).

Шкаф сушильный.

Шкаф вытяжной.

Холодильник бытовой.

Мойка для мытья лабораторной посуды.

Фиксаторы для пробок. Для фиксации пробок можно использовать контейнеры с навинчивающейся крышкой

Дистиллятор.

 

Допускается использовать другие средства измерения, устройства и материалы, которые не уступают по своим характеристикам средствам измерения, устройствам и материалам.

 

МЕТОДИКА ЭКСПЕРТНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

ОБНАРУЖЕНИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ

ВЕЩЕСТВ, ИЗОЛИРУЕМЫХ ДИСТИЛЛЯЦИЕЙ

С ВОДЯНЫМ ПАРОМ.

 

 

использованы: материалы издания Всемирной организации здравоохранения «Basic analytical toxicology» Женева 1997 год., CLARKE’S ISOLATION AND IDENTIFICATION OF DRUGS London THE PHARMACEUTICAL PRESS 1986, Крамаренко В. Ф. Химико-токсикологический анализ.— К: Вища шк. Головное изд-во, 1982 г.