Микробиологическая диагностика бартонеллезов

Бартонеллы, в отличие от риккетсий, растут на искусственных пита­тельных средах. Бартонеллы поражают эндотелий сосудов и эритроциты, приводя к разви­тию ангиоматоза или анемии. У человека бартонеллы вызывают острые(волынская или окопная пятидневная лихорадка,возбудитель Bartonella quintana; болезнь Карриона или лихорадка Оройя с эндемическим распространением, возбудитель Bartonella bacilliformis), подострые(болезнь кошачьих царапин, возбудитель Bartonella henselae) и хронические(бациллярный ангиоматоз, перуанская бородав­ка, пурпурный гепатит, эндокардиты и др., возбудитель Bartonella bacilliformis) инфекции.

Микроскопический метод. Бартонеллы могут быть обнаружены в исследуемом материале от больного с помощью РИФ.

Бактериологический метод заключается в посеве крови от больного на специальные полужидкие и плотные питательные среды с гемином и 5-10% крови человека или животных (бара­на, кролика). Посевы выращивают при 37⁰ С (В. bacillifomis — при 21-30⁰ С) в атмосфере с 5-10% СО₂ в течение длительного времени (45-60 дней). Идентификацию бартонелл осуществляют на основании изучения морфологических (подвижность) и биохимических (наличие каталазы, оксидазы, нитратредуктазы и др.) свойств.

Серологический метод играет важную роль в постановке диагноза бартонеллеза. Для определения в крови больных антител к бартонеллам применяют ИФА, РНГА, РИФ.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопический метод. Изучение морфологии риккетсий Провачека, Музера и Бернета (демонстрационные микропрепарата). Окраска по Романовскому-Гимзе. Препараты описать, зарисовать.

2. Методы культивирования риккетсий. Длякультивирования риккетсий при­меняют развивающиеся куриные эмбрионы (РКЭ). Заражение проводят в желточный мешок. Риккетсии также можно культивировать в первично-трипсинизированных и перевиваемых тканевых культурах, а также в организме чувствительных лабораторных животных. Морских свинок заражают внутрибрюшинно, риккетсии накапливается в мезотелии оболочек яичка и вызывают специфический периорхит.

Морфологию выделенных риккетсий изучают в препаратахиз со­держимого РКЭ и культур тканей, окрашивают по Романовскому-Гимзе или по Здродовскому. Применяется также иммунофлюоресцентный метод.

Для диагностики риккетсиозов в обычных лабораториях применяют серологический метод, а в клинике - кожные аллер­гические пробы.

3. Серологический метод диагностики сыпного тифа:

· Учет демонстрационной РА риккетсий с целью выявления антител в крови больных сыпным тифом. Диагностический титр I:I60.

· Учет РНГА с сывороткой крови больного сыпным тифом. В реакции используется растворимый риккетсиозный антиген, адсор­бированный на эритроцитах. Диагностический титр 1/200. (Демонстрация).

· Учет РCK, поставленной с целью дифференцировки первичного сыпного тифа и болезни Брилля, основанную натом, что при первичном сыпном тифе формируются антитела иммуноглобулинакласса М, а при рецидиве сыпного тифа (болезнь Брилля) - класса G. РСК ставят с цельной сывороткой крови и сывороткой, обра­ботанной цистеином, который вызывает распад молекулы IgM. В результате реакции при первичном сыпном тифе антитела в обработанной цистеином сыворотке определяются в более низком титре, чем в цельной сыворотке. При болезни Брилля выше количество Ig Gи поэтому титры антител в обработанной цистеином и необработанной сыворотках существенно не отличаются.

4. Диагностика Ку-лихорадки. Серологический метод:

· Учет демонстрационной РА с парными сыворотками больного сыпным тифом с целью определения нарастания титра сыпнотифозных антител. Диаг­ностический титр 1:100. На 3 - 5 неделе заболевания титры анти­тел увеличивается в 10 и более раз.

· Учет демонстрационной РСК, поставленной с парными сыворотками крови больного Ку-лихорадкой. Диагностический титр 1:100.

5. Изучение препаратов, используемых для диагностики, специфической профилактики и лечения риккетсиозов, хламидиозов, микоплазмозов.

· риккетсиозные диагностикумы (Провачека, Музера, Бернета) - взвесь убитых риккетсий, применяющиеся для постановки реакции агглю­тинации с целью выявления антител в сыворотке крови больных риккетсиозами.

· живая комбинированная сухая сыпнотифозная вакцина для специфической профилактики сыпного тифа.

· сухая живая вакцина для профилактики Ку-лихорадки.

· ку-аллерген - взвесь убитых нагреванием риккетсий для постановки кожной аллергической пробы. Вводится внутрикожно, учет реакции через 24-48 часов.

Педиатрические аспекты темы

 

1. Сыпной тиф у детей протекает значительно легче, чем у взрослых. Типична кратковременная лихорадка (до I недели), сыпи часто не бывает. В связи со стертой клинической картиной мик­робиологическая диагностика приобретает большое практическое значение.

2. Дети заражаются Ку-лихорадкой черезнекипяченое молокои молочные продукты, при купаниив водоемах, загрязненныхбольными животными. Возможно заражение Кy-лихорадкой через мо­локо больной матери.

3. Кy-лихорадка у детей протекаетпо типу тифо-паратифозного заболевания у 50% больных или сходно с гриппом (у 30%). Иног­да этот риккетсиоз протекает в виде пневмонии или в стертой форме.

После изучения темы студент должен знать: таксономию, морфологические и биологические свойства возбудителей риккетсиозов, а также патогенез, эпидемиологию, основные клинические проявления и иммунитет; основные методы диагностики, специфической профилактики и лечения этих инфекций.

Изучив тему, студент должен уметь: ставить РА при риккетсиозах, оценивать результаты микробиологических анализов при риккетсиозах.