Вопрос 5. Ферменты микробов, их классификация

Ферменты – белки, участвующие в метаболизме бактерий: распознают соответствующие им метаболиты, вступают с ними во взаимодействие и ускоряют течение химических реакций
Механизм действия	1. Оксидоредуктазы (оксидазы, пероксидазы, каталазы, дегидрогеназы) – окислительно-восстановительные ферменты
2. Трансферазы – переносят отдельные радикалы и атомы от одних соединений к другим
3. Гидролазы (эстеразы, фосфатазы, глюкозидазы) – ускоряют реакции гидролиза = расщепление веществ на более простые с присоединениеммолекулы воды
4. Лиазы (карбоксилазы) – отщепляют от субстратов химические группы негидролитическим путем
5. Изомеразы (фосфогексоизомераза) – превращают органические соединения в их изомеры
6. Лигазы = синтетазы (аспарагинсинтетаза, глутаминсинтетаза) – ускоряют синтез сложных соединений из простых
Связь с клеткой	Эндоферменты– связаны со структурами клетки; катализируют метаболизм, проходящий внутри клетки: 1) окислительно-восстановительные ферменты локализуются в цитоплазматической мембране, участвуют в дыхании, питании и делении клетки; 2) ферменты деления и аутолиза локализуются в клеточной стенке
Экзоферменты – выделяются клеткой в окружающую среду, расщепляют макромолекулы питательных субстратов до простых соединений, которые усваиваются клеткой. Некоторые выполняют защитную функцию – инактивируют антибиотики (пенициллиназа). Ферменты агрессии (гиалуронидаза, коллагеназа, ДНКаза, нейраминидаза, лецитиназа) – разрушают ткань и клетки, обусловливая распространение бактерий и их токсинов в инфицированной ткани
Наличие субстрата	Конститутивные – синтезируются клеткой непрерывно, независимо от наличия в питательной среде соответствующего субстрата
Индуцибельные(адаптивные) – синтезируются только при наличии в среде субстрата данного фермента (β-галактозидаза, фосфатаза, пенициллиназа)

Вопрос 6. Принципы культивирования и идентификации бактерий:

1. Наличие питательной среды, содержащей все необходимые питательные вещества и факторы роста бактерий

2. Создание оптимальной концентрации водородных ионов (рН) = 7,2-7,4; некоторые бактерии растут в щелочной среде (для холерного вибриона рН = 7,8-8,6); другие – в кислой (для ацидофильных бактерий рН = 4,0-6,0)

3. Оптимальная температура для большинства бактерий (мезофилы) составляет 37⁰; некоторые (психрофилы) предпочитают температуру 15-20⁰ (возбудители чумы и лептоспироза); другие (термофилы) – 50-60⁰ (бактерии, обитающие в горячих источниках)

4. Длительность культивирования для большинства бактерий составляет 24-48 ч; некоторые растут дольше (бактерии коклюша – 2-3 сут, микробактерии туберкулеза – 3-4 нед.)

5. Среды должны быть стерильными.

6. Создание аэробных или анаэробных условий.

Вопрос 7. Рост и размножение микроорганизмов на жидких и плотных питательных средах. Деление. Фазы развития бактериальной популяции.

Рост и размножение бактерий

Рост – координированное воспроизведение всех клеточных компонентов и структур, ведущее к увеличению массы клетки
Размножение – увеличение числа клеток в популяции
Бактерии	Бинарное деление: 1. Репликация бактериальной хромосомы полуконсервативным способом (двунитевая цепь ДНК раскрывается и каждая нить достраивается комплементарной нитью). 2. Образование межклеточной перегородки: а) врастание двух слоев цитоплазматической мембраны; б) между ними синтезируется пептидогликан; в) синтезируются биополимеры, входящие в состав цитоплазматической мембраны, цитоплазмы, рибосом; у грамотрицательных бактерий образуется наружная мембрана; г) дочерние клетки отделяются друг от друга или сохраняют межклеточные связи, образуя цепочки
Актиномицеты	Поперечное деление, прорастание спор и гиф, почкование
Спирохеты	Поперечное деление
Риккетсии	В цитоплазме или ядре клеток: бинарным делением, фрагментацией клеток, поэтапным отшнуровыванием
Микоплазмы	Фрагментация: основная репродуцирующая единица = элементарное тельце, из него вырастают 4-5 ветвящихся нитей, которые впоследствии превращаются в цепочки, состоящие из мелких зерен. В результате дезинтеграции цепочек образуются элементарные тельца. Могут размножаться почкованием, поперечным делением
Хламидии	В цитоплазматических вакуолях: элементарные тельца в вакуолях преобразуются в ретикулярные, которые несколько раз бинарно делятся, образуя промежуточные формы. Из промежуточных форм формируются элементарные тельца, которые выходят наружу после гибели клетки
Возрастная изменчивость – способность к изменению особей в разных стадиях роста, созревания и старения