Принципиальная схема бактериологического выделения пневмококков

 

 

Принципиальная схема бактериологического выделения Neisseria gonorrhoeae

 

 

Принципиальная схема бактериологического выделения

Neisseria meningitidis

Занятие 28 Дата___________

АНАЭРОБЫ. ЛАБОРОТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА КЛОСТРИДИАЛЬНЫХ И НЕКЛОСТРИДИАЛЬНЫХ АНАЭРОБНЫХ ИНФЕКЦИЙ

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ:

1. Выработать четкое понятие об анаэробных инфекциях.

2. Изучить принципы лабораторной диагностики анаэробных инфекций.

3. Научиться подбирать антимикробные препараты для идентификации, лечения и

профилактики анаэробных инфекций.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:

1. Характеристику биологических свойств возбудителей.

2. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость и иммунитет при
анаэробных инфекциях.

3. Основные клинические проявления заболеваний при анаэробных
инфекциях.

4. Принципы лабораторной диагностики.

5. Препараты для идентификации, лечения и профилактики заболеваний.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:

■ дифференцировать возбудителей анаэробных инфекций по
морфологическим, биохимическим, агглютинабельным,
фаголизабельным свойствам;

■ интерпретировать результаты серологических реакций;

■ классифицировать препараты в соответствии с их назначением.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ПРЕДСТАВЛЕНИЕ:

о дифференциации возбудителей по различным видам и сероварам.

 

Дата____________

Работа № 1. Принципиальная схема лабораторной диагностики клостридиальных инфекций

См. теоретическую справку

Цель: Разобрать особенности лабораторной диагностики газовой гангрены, столбняка и ботулизма

I. Диагностика СТОЛБНЯКА:

Клиника + прямая РИФ (экспресс-диагностика)

II. Диагностика ГАЗОВОЙ ГАНГРЕНЫ:

Исследуемый материал:

____________________

____________________

 

Работа № 2. Морфологические и тинкториальные свойства

Цель: микроскопировать готовые препараты-мазки. Зарисовать. Сделать вывод.

 

 

а) Возбудители газовой гангрены (Cl. perfringens, Cl. novyi, Cl. septicum)

Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________

 

б) Возбудитель столбняка (Cl. tetani)

Результат:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________

в) Возбудитель ботулизма (Cl. botulinum)

Результат:___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________

Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 3. Культуральные и биохимические свойства

Цель: Зарегистрировать характер изменений в питательных средах, наблюдаемых при росте анаэробов.

А) Среда тиогликолевая

Результат:_______________________________________________________

________________________________________________________________ ________________________________________________________________

«К» «О» ________________________________________________________________

________________________________________________________________

________________________________________________________________

Б) Метод Веньяль-Вейона

 

Результат:_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

В) Среда Цейсслера (гемолитическая активность)

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________

 

 

Г) Молоко (свертывание или пептонизация молока)

Результат:_________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

«К» «О»

 

 

Д) Среда Вильсон-Блера

Результат:_________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

__________________________________________________________

«К» «О»

Ж) Среда желточный агар (лецитиназная активность)

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Вывод:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 4. Методы выявления токсинов возбудителей (на примере ботулинического токсина)

Цель: Определить наличие и тип ботулинического токсина в исследуемом материале.

РН на белых мышах

I. Этап: Подготовка исследуемого материала.

экстракт

II. Этап: Обнаружение токсина

экстракт

экстракт

экстракт +

поливалентная

противоботулиническая

сыворотка

Экспозиция 30-40 мин

По 0,5 млПо 0,5 мл

Лабораторные животные Лабораторные животные

выживают погибают

Результат: обнаружен ботулинический токсин

 

III. Этап: Определение типа ботулинического токсина.

Экстракт

+ противоботулиническая экспозиция 30-40 мин

Сыворотка тип тип тип тип тип тип

А В С Д Е F

мышь	мышь	мышь	мышь	мышь	мышь
гибель	гибель	гибель	гибель	живая	гибель

Результат: обнаружен ботулинический токсин, тип Е.

Описать препараты:

Цель: Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением - профилактические, диагностические, лечебные.

1.АКДС

2.______________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

 

1.АДС

2.______________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6._____________________________________________________________________________

1.Столбнячный эритроцитарный диагностикум 2._____________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

1. Противостолбнячная сыворотка 3000 МЕ

2.______________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

 

1.Противогангренозная лошадиная сыворотка 5000 МЕ

2._____________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

 

1. Ботулиническая сыворотка 400 МЕ 2._____________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

Иммуноглобулин человеческий противостолбнячный

2.______________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

 

1.Эритромицин

2._____________________________________________________________________________

3.______________________________________________________________________________

4.______________________________________________________________________________

5.______________________________________________________________________________

6.______________________________________________________________________________

Выполните задания для самоконтроля:

Таксономия возбудителя:

ГАЗОВАЯ ГАНГРЕНА

Таксономия возбудителя:

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Морфологические и тинкториальные свойства ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и ферментативные свойства _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Резистентность ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции___________________________________________________________________

Механизм передачи___________________________________________________________________

Пути передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенность для животных _____________________________________________________________________

 

Патогенез и клиника

Входные ворота________________________________________________________________

Места первичной локализации___________________________________________________________________

Инкубационный период_________________________________________________________

Клинические симптомы_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вид инфекции (генерализованная, локальная)__________________________________________________________________

Длительность болезни____________________________________________________________________

Иммунитет_________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лечение (препараты) ___________________________________________________________

 

СТОЛБНЯК

Таксономия возбудителя:

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Морфологические и тинкториальные свойства ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и ферментативные свойства _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Резистентность ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции___________________________________________________________________

Механизм передачи___________________________________________________________________

Пути передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенность для животных _____________________________________________________________________

Патогенез и клиника

Входные ворота________________________________________________________________

Места первичной локализации___________________________________________________________________

Инкубационный период_________________________________________________________

Клинические симптомы_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вид инфекции (генерализованная, локальная)__________________________________________________________________

Длительность болезни____________________________________________________________________

Иммунитет_________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лечение (препараты) ___________________________________________________________

 

 

БОТУЛИЗМ

Таксономия возбудителя:

Семейство__________________________________________________________________

Род________________________________________________________________________

Вид________________________________________________________________________

Морфологические и тинкториальные свойства ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Культивирование и ферментативные свойства _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Антигенная структура ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Резистентность ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Эпидемиология

Источник инфекции___________________________________________________________________

Механизм передачи___________________________________________________________________

Пути передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Факторы передачи______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Патогенность для животных _____________________________________________________________________

Патогенез и клиника

Входные ворота________________________________________________________________

Места первичной локализации___________________________________________________________________

Инкубационный период_________________________________________________________

Клинические симптомы_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Основные фазы патогенеза___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вид инфекции (генерализованная, локальная)__________________________________________________________________

Длительность болезни____________________________________________________________________

Иммунитет_________________________________________________________________

Лабораторная диагностика _________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Неспецифическая профилактика (мероприятия) ________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Специфическая профилактика (препараты) ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Лечение (препараты) ___________________________________________________________

 

 

 

Подпись преподавателя _________________________________________________________

ЗАДАЧИ

1. В приемное отделение больницы поступила женщина с кровотечением после внебольничного аборта. Информация о вакцинации против столбняка нет. Как следует поступить в данном случае?

 

2. В инфекционную больницу поступил больной с подозрением на пищевой ботулизм. Для диагностики в целях обнаружения в крови больного токсина был использован биологический метод. Для выявления источника инфекции прове­дено бактериологическое исследование остатков рыбных кон­сервов, которые употреблялись пострадавшим в пищу. Учесть результаты бактериологического метода и биологической про­бы. Дать диагностическую оценку методов.

Выделяется следующий материал для учета результатов ис­следования: пробирка с исследуемым материалом; рисунок с результатом биологического метода; микропрепарат чистой культуры С. botulinum; пробирка с ростом палочки ботулизма на среде Китта-Тароцци.

Вопросы 1. Под­тверждается ли диагноз? Если да, то почему? 2. Какая иммуно­логическая реакция определяет результат биологической про­бы? 3. Достаточно ли представленных данных бактериологиче­ского метода, чтобы считать консервы источником заболева­ния? Ответ объяснить. 4. Что необходимо обнаружить в пище­вых продуктах, чтобы доказать, что они явились источником заболевания?

 

3.Больной поступил в хирургическое отделение с проникающим ранением брюшной полости. После операции на 2-е сутки развились симптомы перитонита. Для определения этиологии перитонита проведено микроскопическое, бактериологическое исследование перитониального экссудата путем посева на питательные среды (Эндо, ЖСА, МПА).

При микроскопии перитониального экссудата обнаружены Гр- палочки. Роста микрофлоры на питательных средах не выявлено. Учитывая наличие клинических симптомов, характерных для неклостридиальных анаэробов, проведено повторное бактериоскопическое исследование экссудата на кровяном агаре. Учтите результат бактериологического исследования.

Вопросы 1. Установить этиологию перитонита. 2. Чем объясняется отсутствие роста микрофлоры на питательных средах Эндо, ЖСА, МПА. 3. Укажите возможные пути проникновения.

 

Пример решения задачи

Пострадавшему в автомобильной катастрофе больному С, 45 лет, после оказания экстренной хирургической помощи было введено 3000 ME противостолбнячной антиток­сической сыворотки. Вопрос о давности вакцинации против столбняка не был выяснен. Спустя два месяца С. был доставлен в инфекционное отделение с диагнозом столбняка. В течение указанного срока никаких других травм не было.

 

Вопросы для студентов	Ответы
Мог ли развиться столбняк у данно­го больного в результате автоката­строфы?	Да, мог (так называемый «поздний» столбняк)
Основные клинические симптомы, позволяющие поставить диагноз столбняка	Тризм (тоническое напряжение жевательных мышц); спазм мимичес­кой мускулатуры (сардоническая улыбка); тоническое напряжение мышцзатылка; опистотонус
Возможная причина развития столб­няка у данного больного?	Введение пострадавшему только противостолбнячной сыворотки, со­здающей кратковременный пассив­ный иммунитет (до 2 месяцев); возбуди­тель мог сохраниться в организме и в дальнейшем вызвать это заболева­ние.
Укажите врачебные ошибки, кото­рые могли способствовать развитию заболевания	Необходимо было ввести столб­нячный анатоксин. Не выяснено, проводилась ли и в ка­кие сроки активная иммунизация против столбняка - противостолб­нячным анатоксином
Какой препарат используется для со­здания активного иммунитета против столбняка, какой иммунитет по на­правленности он создает и на какой срок (при однократном введении)?	Анатоксин; иммунитет - антитокси­ческий; срок полгода - год

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ СПРАВКА