Качественная проба с реактивом Грисса на обнаружение нитритов в пробах патологического материала.

Материальное оснащение: 1мл испытуемого диализата.

Диализат готовится по схеме:

10г измельченного патологического материала залить 100мл дистилированной воды, экстрагировать в течение часа периодически встряхивая.

Профильтровать водный экстракт. Если он окрашен, то обесцветить его окисью алюминия (0,1г на 100мл); Отстоять 2 часа, слить надосадочную жидкость.

Для осаждения белков в экстракте использовать смесь, состоящую из 10мл 0,5 % NaOH и 25 мл 5% ZnSO4. К 30 мл надосадочной жидкости (стадия1.2) прилить 20мл смеси для осаждения белка; профильтровать. Полученный диализат использовать для ХТА. Реактив Грисса (1% раствор дифениламина в серной кислоте) –10мл. Пробирка на 10мл.

Ход работы

В пробирку налить 1 мл диализата, сторожно по стенке прилить 1 мл реактива Грисса.

Оценка результата:

Красное и темно-красное окрашивание является сигналом на присутствие токсической дозы нитритов.

Отравления животных мочевиной

Мочевина (карбамид): СО(NH₂)₂ , белый кристаллический гигроскопический порошок.

В животноводстве синтетическая мочевина применяется в качестве кормовой добавки жвачным животных в дозе 0,25 г/1 кг, а также широко применяется как азотное удобрение: возможно случайное поедание удобрения.

При расщеплении мочевины в рубце животных выделяется аммиак и углекислота. Аммиак используется микрофлорой рубца для синтеза микробного белка, который в сычуге и в тонком кишечнике всасывается и используется в организме жвачных для синтеза собственных белков, т.е. пополняет пластический материал. При нормальном количестве мочевины в рационе жвачных неиспользованный в синтезе белка аммиак всасывается в кровь, поступает в печень, где инактивируется: превращается в эндогенную мочевину, которая удаляется из организма с мочой.

При избытке мочевины в корме возникает отравление.

Токсикодинамика

В корме содержащемся в рубце находится 10-30 мг % аммиака. При 100-125 мг % аммиака в рубце происходит смертельное отравление.

Причиной отравления при избыточном введении мочевины является накопление двух метаболитов мочевины: аммиака (NH₃) и карбамината аммония (NH₂COONH₂).

Карбонат аммония образуется только при взаимодействии аммиака и диоксида углерода в присутствии воды: 2NH3 + С02 + Н20 = (NH4)2C03.

Сухие же газы реагируют между собой с образованием в обычных условиях карбамината аммония —соли карбаминовой кислоты NH2COOH: 2NH3 + C02=(NH2COO)NH4. карбамат - аммониевая соль карбаминовой кислоты NH2COONH4,

Избыток аммиака резко повышает щелочность содержимого рубца: при рН=8,0 движение рубца замедляется, наступает атония и тимпания рубца.

В крови и тканях увеличивается насыщение аммиаком, тормозится окислительно-восстановительные процессы, блокируется синтез макроэргов и биологически-активных веществ, особенно медиаторов.

В результате патохимических изменений нарушаются функции жизненно важных органов, в первую очередь – центральной нервной системы. Возникает кратковременное возбуждение ЦНС с последующим параличом сосудодвигательного и дыхательного центров.

Клинические признаки

Острое отравление.

· Через 0,5-1 часа после приема внутрь токсической дозы мочевины появляются симптомы возбуждения ЦНС: мышечная дрожь, тетанические стрихниноподобные судороги, повышенная чувствительность кожи (гиперестезия), пугливость; животное беспокойно, учащается дефекация и мочеиспускание; регистрируются коликоподобные при-ступы, стоны.

· Во время судороги конечности вытянуты, дыхание и пульс учащены. Наблюдается рвота с резким запахом аммиака.

· Стадия возбуждения постепенно переходит в коматозное состояние:

· жвачка прекращается (тимпания);

· температура тела нормальная.

· Гибель наступает в течение 1-3 часов в результате паралича дыхательного центра, отека легких и асфиксии.

Хроническое отравление.

· Длительное нарушение окислительно-восстановительных процессов ведут к белковой и жировой дистрофии, нарушению важнейших функций, рождению нежизнеспособного молодняка. Для диагностики хронического отравления проводить анализ крови на содержание аммиака, мочевины, кетоновых тел, активности трансаминаз: эти показатели увеличиваются выше нормы.

Лечение.

·. Для нейтрализации аммиака (создает щелочную реакцию в рубце) провести промывание желудка водой, а затем ввести внутрь 0,5-1 л 1% р-ра уксусной к-ты, молочной кислоты (10 мл на 1 литр воды), молочной сыворотки, кислого молока.

· Вместо уксусной кислоты можно использовать выпаивание 4-5 л кислого молока или молочной сыворотки.

Для замедления расщепления мочевины в рубец через стенку ввести раствор формальдегида в дозе 0,3 мл формалина на 1 кг. Рассчитанный объём растворить в 1 л воды и ввести шприцем Жанэ.

Для стимуляции метаболизма яда усиления функция функций печени, сердца, мозга ввести глюкозу с кофеином.

Для предотвращения судорог ввести седативные средства:магния сульфат, клоралгидрат.

Профилактика

· Соблюдать норму добавления в корм мочевины согласно инструкции (в концентратные смеси –не более 2%).

· Суточную норму перемешать с кормом и давать в три приема.

· Не допускать выпаивания мочевины в виде раствора или с

· пойлом.

· Введение мочевины в рацион начинать с минимальных доз (1/5 суточной дозы) и в течение 2-х недель довести до оптимальной дозы.

· Не допускать резких перерывов в скармливании мочевины.

· Не вводить мочевину в корм животным с заболеванием печени, истощенным животным, молодняку до 6 месяцев.

Обнаружение мочевины в пробе корма.

Материальное оснащение: водная вытяжка из корма, азотная кислота, часовое стекло, глазные пипетки 2 шт.

Ход опыта. К капле водной вытяжки из корма прибавить 1-2 кап­ли концентрированной азотной кислоты.

Оценка реакции:

· При наличии карбамида вы­кристаллизовывается его азотная соль в виде шестигранных или ром­бических пластинок, лежащих преимущественно кучками или черепицеообразно.

Отравления натрия хлоридом

Комбикорм для крупного рогатого скота содержит до 1 % на­трия хлорида, для свиней — около 0,5 % и для птиц — 0,3—0,4 %. Лошадям обязательно дают натрия хлорид по 30—50г в сутки ле­том и по 20—30 г зимой. Если же комбикорма содержат натрия хлорида больше, чем необходимо животному определенного вида, они становятся причиной массовых отравлений с высокой смерт­ностью.

Суточная доза натрия хлорида 2,25 г на 1 кг массы животного является токсической. Для плохо упитанных свиней она может со­ставлять 1 г на 1 кг массы животного.

Животные могут отра­виться им при поедании в большом количестве соленой рыбы, се­ледочных голов, испорченных соленых огурцов и помидоров или их рассолов. Частой причиной отравления свиней и птиц бывает скармливание животным этих видов комбикорма, предназначен­ного для крупного рогатого скота.

Разовая смертель­ная доза для лошадей 750—1500 г, для коров 1500—2000, для овец 150—200, для свиней 90—150, для собак 30—40, для кур 5—8, для нутрий 6—8 г.

Токсикодинамика

o Кислородное голодание.Ионы натрия удерживают в просвете кровеносных сосудов избыток воды, осмотическое давление крови увеличивается, эритроциты обезвоживаются и насыщаются натрием.

· В обмен на натрий из эритроцитов вытесняются ионы калия; возникает ионный и осмотический дисбаланс крови, что ведет к нарушению окислительно-восстановительной функции гемоглобина.

· Резко угнетается транспортная функция крови по кислороду. Формируется гипоксия тканей (мозга, сердца, печени), цианоз слизистых и кожи.

Возбуждение ЦНС с последующим параличем жизненно- важных центров.

· Избыток ионов натрия вытесняет из нервных клеток ионы кальция, что ведет к резкому перевозбуждению нервных центров и расстройству нервной регуляции. Возникают судороги, дискоординация движений, параличи.

o Местное раздражающее действие.

· Возникает острое воспаление слизистой ЖКТ, локальные изъязвления, усиливается перистальтика кишечника (профузный понос).

· Ткани почек и мочевыводящих путей также местно повреждаются натрия хлоридом. При этом тормозится обратная реабсорбция воды, что ведет к усилению диуреза и обезвоживанию (дегидротации) организма.

Клинические признаки

Острая форма

· возбуждение ЦНС (судороги, дискоординация движений, скрежет зубами)

· Сильная жажда.

· Гипотермия

· Цианоз кожи и слизистых

· Понос, учащенный диурез

· Парезы, параличи

· Гиперсаливация

Хроническая форма

· анемия

· кахексия (исхудание)

КРС:

первые симптомы отравления наступают через 2-4 часа после поступления в ЖКТ.

· Характерные симптомы: угнетение и отсутствие жвачки;

· ослабление сердечной деятельности; поверхностное дыха-ние.

· В тяжелых случаях смерть может наступить в течении первых суток.

· Хроническое отравление проявляется длительным поносом.

Свиньи:

· резко выражен цианоз слизистых оболочек и коньюнктивы

· гиперсаливация

· мышечная дрожь, судороги

· жажда, рвота, понос, солевой диурез

· За несколько часов до смерти наблюдается парез тазовых конечностей. Смерть наступает от асфиксии в течении первых двух суток с момента отравления.

· При не смертельном отравлении выздоравлениедлительное (1-2 недели)

Собаки

· Отравление протекает остро с высокой смертностью. Характерны клинические признаки: жажда, отказ от корма, раннее появление депрессивного состояния и параличей.

· Пульс слабый, дыхание частое, температура нормальная.

· Приступы судорог.

· Смерть наступает в течении 3-6 часов.

Птицы

Корм содержащий 1% соли в сухом виде и 0,5% в жидком уже токсичен для кур и индеек.Для водоплавающей птицы токсичное содержание в корме выше 2 – 3 %.5% содержание соли в корме токсично для любой птицы.

· сильная жажда, учащение дыхания;

· мышечная слабость (крылья опущены, птица часто садится, встает с трудом)

· не координированные движения шеи, головы (птица как бы подавилась)

· цианоз гребешка

· температура нормальная

· профузный понос

· Смертность до 100%.

Патологоморфологические изменения.

Цианоз кожи и слизистых, кахексия (исхудание), геморрагическое воспаление кишечника.

Лечение

Диета: дробное поение малыми порциями свинье 0,5 л.; птице 0,15л через каждые 30 –60 минут.Одномоментное введение большого количества жидкости опасно из-за возможности отека мозга. Жидкость можно вводить внутрь через зонд, ректально с клизмой, естественным поением.

В качестве лечебной жидкости можно использовать молоко, водно-масляную эмульсию, отвар семени льна, так как кроме устранения дегидратации эти жидкости обволакивают слизистую ЖКТ, тормозят всасывание соли.

Для уменьшения всасывания соли ввести обволакивающие средства: растительное масло, отвар семени льна, жженую магнезию или серу (для свиней), Основной антидот натрия хлорид - хлористый кальций. Его надо вводить внутривенно через 6 часов в течение 2-3 дней. Свинье вводить глюконат кальция в/м.

Для стимуляции работы сердца и печени, устранению симптомов интоксикации назначить глюкозу в виде 40% раствора.

Профилактика

· Контролировать содержание поваренной соли в комбикормах.

· Использовать комбикорма по видовому назначению.

· В связи с высокой чувствительностью свиней к соли комбикорм для них желательно использовать в прессованном (брикетированном) виде. Это исключает неравномерное распределение соли в разных порциях комбикорма.

· Партии комбикорма, подозрительные на завышенное содержание соли следует выборочно испробовать на небольшой группе животных.

Обнаружение поваренной соли в пробе корма аргентометрическим методом (метод Мора).

Материальное обеспечение: ацетон, н-гексан, петролейный эфир, бензол, хлороформ или их смеси, спирты, хлороформ, этилацетат, пластинки с тонким слоем сорбента, пробы корма и патматериал.

Принцип метода основан на извлечении натрия хлорида из корма или патматериала дистиллированной водой с последующим титрованием иона хлора раствором нитрата серебра в присутствии хромата калия как индика­тора. После связывания иона хлора серебром избыток нитрата серебра реагирует с хроматом калия, образуя хромат серебра красно-кирпичного цвета.

Ход определения: 10 г измельченного корма или патматериала (слизистой оболочки желудка или печени) помещают в мерную колбу на 100 мл, заливают до 3/4 объема водой, хорошо встряхивают и нагревают на водяной бане до 80 °С. Через 30 мин охлаждают до комнатной температуры, периодически встряхивая, до­водят водой до метки, встряхивают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр в сухой стакан.

Если вытяжка окрашена интенсивно, можно взятую навеску подсушить на водяной бане, затем в тигле обуг­лить до легко распадающейся золы, количественно пе­ренести в мерную колбу на 100 мл и поступать далее, как описано выше.20 мл фильтрата переносят в коническую колбу, приливают 1 мл 10 %-ного раствора калия хромата и титруют 0,1 н. раствором нитрата серебра до появле­ния неисчезающего кирпично-красного окрашивания.

Содержание натрия хлорида вычисляют по формуле:

 

 

где X — содержание натрия хлорида, %; А — количество раствора нитрата серебра, пошедшее на титрование, мл; В — объем вытяжки, взятый для титрования, мл; В1 — общий объем вытяжки, мл; С — навеска объекта, г; 0,005844 — количество NaCl (г), связывающегося 1 мл 0,1 н. раствора AgNO₃.

В патматериале содержание соли токсическое (больше 1%) для всех видов животных

Задания по фармакотерапии: выписать препараты для лечения отравления в рецептах.

1. Корове массой 400кг этимизол для в/м инъекции

2. 20 коровам массой по 450 кг аскорбиновую кислоту для приготовления 10% инъекционного раствора при отравлении нитритами.

3. Лошади массой 700кг метиленовый синий и глюкозу для приготовления антидотного раствора (Хромосмон) при отравлении нитратами.

4. Трем свиньям 1% раствор метиленовой сини при отравлении нитратами (подкожно).

5. Собаке массой 60кг симптоматическое средство для стимуляции дыхания.

6. Быку, массой 600кг, 1% раствор метиленового синего на физиологическом растворе для 1 в/в инъекции.

7. Корове массой 300 кг внутрь средство для ликвидации атонии ЖКТ

8. Собаке массой 20 кг аналептик для стимуляции дыхания.

9. 10 телятам массой по 50 кг раствор метиленового синего при отравлении нитритами.

10. 5 поросятам массой по 15кг аскорбиновую кислоту для 3 инъекций.

11. Овце массой 40 кг – средство для устранения судорог.

12. Быку массой 600 кг – средство, изменяющее реакцию содержимого рубца в кислую сторону и понижающее активность уреазы.

13. 20 овцам – средство для стимуляции сердечной деятельности.

14. Корове массой 400 кг формалин для введения внутрь.