Количественное определение спиртов

Количественное определение спиртов базируется на их реакциях: окислении до альдегидов и образовании сложных эфиров. Из всех спиртов, имеющих токсикологическое значение, только этиловый подлежит обязательному количественному определению при судебно-химических исследованиях. Это обусловлено следующими причинами:

• чрезвычайно широкое распространение и особое токсикологическое значение этанола, о чем уже говорилось,

• возможность естественного образования этанола в организме, а именно: при брожении и гниении сахаристых веществ в желудке, при бактериальном распаде белковых веществ, при метаболическом превращении высших спиртов.

В судебно-химической практике для количественного определения этанола используют методы, основанные на окислении его до ацетальдегида и образовании сложного эфира с азотистой кислотой - этилнитрита. Известно много методов, в том числе химических, но в настоящее время наибольшее значение приобрели наиболее чувствительные и точные современные методы - биохимический и инструментальный (метод ГЖХ).

Метод биохимический (энзимный, ферментативный, метод АДГ) был разработан в 1951г. Бюхером и Родецки и применяется, в основном, в зарубежных лабораториях. Метод основан на реакции окисления этанола до ацетальдегида под действием фермента алкогольдегидрогеназы

Акцептором водорода в реакции служит дифосфопиридин-нуклеотид (ДПН), восстановленная форма которого обладает характерным светопоглощением при длине волны 366 нм. Измеряя оптическую плотность продукта реакции, можно рассчитать содержание этанола в исследуемом объекте, т.к. количество восстановленной формы ДПН, т.е. его оптическая плотность, пропорциональны количеству этанола. Расчет ведут по калибровочному графику, построенному по растворам этанола с известной концентрацией.

Метод чувствителен (0,1-0,2%) на уровне естественного содержания этанола в организме, специфичен, позволяет проводить серийные анализы, однако требует специального оборудования и особо чистых ферментов (АДГ и ДПН), в связи с чем в нашей стране не нашел применения.

Метод газожидкостной хроматографии (ГЖХ) основан на переведении этанола в более летучее соединение - этиловый эфир азотистой кислоты (этилнитрит).

Достоинства метода ГЖХ.

• Высокая разделяющая способность, что позволяет анализировать сложные многокомпонентные смеси. Это удобно при экспертных исследованиях в случаях комбинированных отравлений суррогатами алкоголя.

• Универсальность метода. Анализировать можно любые соединения при условии их летучести и термостабильности.

• Возможность качественного и количественного определения в одной пробе.

• Высокая чувствительность (10^-5 – 10^{-9 г, т.е. на уровне естественного содержания этанола в организме).}

• Возможность выполнения анализа в малом объеме образца (0,5-2 мл биожидкости).

• Точность метода (ошибка не превышает 1-2%).

• Экспрессность (время определения 3-5 минут) и возможность проведения, в связи с этим, серийных анализов.

• Простота и легкость выполнения.

• Доказательность и объективность. Результат в виде хроматограммы может быть приложен к акту судебно-химического исследования.

Данные о количественном содержании этанола в крови лежат в основе клинико-лабораторной диагностики степени опьянения. Установлена зависимость между содержанием этанола в крови и функциональным состоянием организма.

Уровень этанола в крови	Основные проявления интоксикации
г/л	‰
0,1 – 0,5	0,1 – 0,5	Субклинические проявления. Изменения регистрируются только специальными тестами.
0,3 – 1,2	0,5 – 1,2	Эйфория. Увеличение контактности, говорливости, повышенная самооценка, снижение внимания, нарушение выполнения заданий при тестовой оценке.
0,9 – 2,5	1,2 – 2,5	Возбуждение. Эмоциональная лабильность, снижение тормозных процессов, потеря критики, нарушение памяти и способности к сосредоточению, нарушение восприятия и снижение времени реакции, мышечная дискоординация.
1,8 – 3,0	2,5 – 3,0	Оглушение. Дезориентация, вязкая речь и ментальная спутанность, головокружение, гиперэмоциональность, сенсорные нарушения, увеличение порога, восприятия боли.
2,7 – 4,0	3,0 – 4,0	Ступор. Нарушение сознания до глубины сопора; выраженное снижение ответа на стимулы, полная мышечная дискоординация, неспособность стоять и сидеть, рвота, непроизвольное мочеиспускание и дефекация, гипотермия, гипогликемия, судороги.
3,5 – 5,0	4,0 – 5,0	Кома. Анестезия, аналгезия, снижение рефлексов, гипотермия, нарушение дыхания, депрессия гемодинамики. Возможна смерть.
Более 7,0	5,0 и более	Смерть от остановки дыхания.

 

Эта шкала имеет относительный характер, так как не всегда есть строгая корреляция между содержанием этанола в крови и функциональным состоянием организма. Степень и особенности функциональной реакции на прием алкоголя носят строго индивидуальный характер и зависят от многих факторов, таких, как: индивидуальная чувствительность организма, пол, возраст человека, -состояние организма (болезнь, утомление и др.), форма, в которой принят алкоголь (водка, пиво и т.д.) и интервал между приемами, характер и количество принятой пищи, и ряд других.

Даже у одного и того же лица одинаковые количества спирта, принятые в разное время при прочих равных условиях, могут вызвать различную функциональную реакцию и привести к разным степеням опьянения.

Естественное содержание алкоголя в крови может быть вызвано биохимическими процессами: спирт образуется в качестве побочного продукта ряда реакций. Как правило, он образуется в результате расщепления сахара бактериями в кишечнике, откуда алкоголь всасывается в кровь через слизистую и поступает в печень. Его уровень в крови может достигать 0,1-0,2 промилле.

При судебно-химической оценке результатов определения этанола следует учитывать также падение количества алкоголя в крови за 1 час, составляющее 0,1- 0,16 %, поскольку между моментом происшествия и моментом смерти проходит обычно некоторый период времени, в течение которого протекают процессы метаболизма и выделения спирта из организма.