Д-12. Экспресс определение бактериурии и антибиотикограмм урокультур методом когерентной флуктуационной нефелометрии

А.С.Гурьев^{1, 2}, В.Н.Вербов³, А.Ю.Волков ^{1, 2}, Е.В.Русанова^{4 1} ФГБУ ФНКЦ ФХМ ФМБА РФ, ² ООО «Медтехнопарк», ³ ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, ⁴ ГБУЗ МО МОНИКИ им. М. Владимирского

В последние годы в клинической микробиологии для оценки уровня бактериурии и получения антибиотикограмм начинает применяться нефелометрия и ее разновидность, когерентная флуктуационная нефелометрия (КФН). Метод КФН в сравнении с традиционной нефелометрией обладает преимуществом в чувствительности и эргономичности, в том числе из-за низкой чувствительности к оптическому качеству кювет. Это позволяет регистрировать микробный рост, начиная с 10³÷10⁴ КОЕ/мл. Создание КФН-микробиологического анализатора и соответствующих наборов реагентов даёт возможность внедрить в практику здравоохранения аналитическую систему, значительно уменьшающую время регистрации бактериального роста, как для прозрачных биологических жидкостей (моча и др.), так и для подрощенных культур. При этом экспресс определение антибиотикорезистентости выявленной микрофлоры является одним из основных применений такой аналитической системы.

Метод КФН применён для скрининга мочи у взрослых и детей путём анализа мутности образцов мочи и кривых роста микрофлоры мочи. Цель скрининга – быстрое выявление и исключение отрицательных образцов мочи для уменьшения количества посевов в микробиологических лабораториях. Метод КФН также применён для быстрого получения антибиотикограмм миклофлоры мочи. Все исследования проводились в четырёх разных клиниках с использованием многоканальных КФН-анализаторов производства ООО «Медтехнопарк».

В работе №1 исследовано 208 образцов мочи взрослых, цель – экспресс выявление отрицательных образцов за 10 минут по мутности мочи. Из отрицательных по результатам посева образцов КФН-анализатор выявил 45.8% (специфичность); из положительных образцов выявлено 90.9% (чувствительность). В работах №2 и №3 исследовано 119 образцов мочи взрослых и 205 образцов мочи детей, цель быстрое – выявление отрицательных образцов за 4 часа путём анализа кривых роста микрофлоры мочи. Из отрицательных образцов КФН-анализатор выявил 89.6% и 85.3% соответственно (специфичность); из положительных образцов выявлено 91.3% и 94.5% соответственно (чувствительность). Т.о., КФН-анализатор позволяет исключить из общего числа образцов мочи, поступающих на анализ: 31.3% за 10 минут; 73.9% и 63.9% за 4 часа. При этом большинство положительных образцов мочи сохраняется для последующего посева традиционным методом.

В работе №4 исследован 21 образец мочи взрослых, цель – получение экспресс антибиотикограммы микрофлоры за 3-5 часов без предварительного типирования. Чувствительность миклофлоры оценивалась к 12 антибиотикам широкого спектра, всего 197 определений чувствительности к конкретному антибиотику. Сравнение результатов, полученных на посеве и КФН-анализаторе: 86,8% совпадали, в 8,6% случаев получено малое расхождение, в 3,6% случаев получена «пропущенная чувствительность», в 0,5% случаев получена «ложная чувствительность». Т.о., метод КФН позволяет получать предварительную экспресс антибиотикограмму в день поступления мочи на исследование (до типирования микрофлоры мочи), что может уменьшить негативные последствия назначения эмпирической антимикробной терапии.

Многоканальный КФН-микробиологический анализатор, как аналитическая система, находящаяся на стадии валидации, несомненно расширит спектр, повысит эффективность и снизит стоимость микробиологических анализов в КДЛ.

 

Д-13. Актуальность проблемы Clostridium difficile – инфекции в России

М. Г. Швыдкая¹, С.Д. Митрохин^{2 1}ГБУЗ «ДЦ №3 ДЗМ», ²ФБУН "МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского", Москва,

Актуальность: В эру массового использования антибактериальных препаратов остро стоит вопрос о нарушениях микробиома кишечника, связанного с приемом лекарств. Особое место в структуре осложнений занимает Clostridium difficile – ассоциированный энтероколит. Внимание, к которому, у врачей не ослабевает в виду развития тяжелых форм колита и энтероколита.

Цель: определение заболеваемости Clostridium difficile –инфекцией в детском онкологическом стационаре и поликлиниках города Москвы.

Материалы и методы: Общая заболеваемость детей до 18 лет с Clostridium difficile инфекцией изучалась на базе ФНКЦ ДГОИ им. Д. Рогачева в 2012- 2015гг. и на поликлинической базе СВАО и ЮВАО г. Москвы за апрель-март 2016 года. Микробиологическое исследование кала для получения чистой культуры проводилось на анаэробном агаре (Oxoid, Великобритания) с добавкой нитроцефин (Oxoid, Великобритания), с последующей MALDI-TOF спектрометрией для идентификации до вида штаммов C.difficile проводилось по протоколу компании производителя (Bruker Daltonic, Германия). Для определения токсинов А/В C.difficile в кале использовался иммуноферментный анализ (RIDASCREEN R-Biopharm, Германия). Анализируемые показатели были обработаны с помощью простого статистического метода, подсчет проводили с использованием Microsoft Exel 2010.

Результаты: ВФНКЦ ДГОИ им. Д. Рогачева в период с 2012 по 2015 годы было проанализировано 2930 образцов фекалий, из которых 143 (4,9%) положительных на токсины А/В. В поликлиниках всего было исследовано 152 пробы фекалий с апреля по май 2016 года, положительных – 7 (4,6%). Заболеваемость Clostridium difficile –инфекцией в детском онкологическом стационаре составила: за 2012 год -11,2; за 2013 – 13,05; за 2014 – 8,5; за 2015 – 8,1 на 1000 койко- дней.

Выводы: Анализ заболеваемости Clostridium difficile –инфекцией в детском онкологическом стационаре выявил ее увеличение в 2013 году (55 случаев, или 13,5 на 1000 койко-дней), что превышает средний многолетний уровень (36 случаев, или 10,2 на 1000 койко- дней). В дальнейшем динамика заболеваемости снижается до 29 случаев или 8,5 на 1000 койко - дней. Данную тенденцию можно связать с усилением противоэпидемических мероприятий и с пристальным внимания к проблеме данной назологии в Еропе и России, а так же привлечением специалистов всех направлений для участия в профилактике и лечении внутрибольничных случаев Clostridium difficile –инфекцией. При этом данный вопрос актуален не только для стационаров, но и для пациентов, наблюдающихся в поликлиниках. Выявляемость Clostridium difficile –инфекцией в структуре поликлинического надзора составила 4,6%. Данные показатели не являются статистически достоверными, однако показывают, что проблема актуальна для более широкого охвата пациентов, нежели принято было считать.