Вопрос №58. Диагностические антигенные препараты: диагностикумы, аллергены, токсины. Получение. Применение.

Диагностические препараты относятся к иммунобиологическим препаратам, поскольку их действие основано на иммунологи­ческих принципах и реакциях. Диагностические препараты, системы и наборы широко используют для диагностики инфек­ционных и неинфекционных болезней, индикации и идентифи­кации бактерий, вирусов, грибов и простейших, для опреде­ления иммунного статуса, аллергических и иммунопатологичес­ких расстройств, иммунологической совместимости тканей, им­мунных взаимоотношений матери и плода и т.д.

Диагностикумы применяют для выявления специфических антигенов и антител, аллергенов, сенсибилизированных имму- нокомпетентных клеток (Т- и ^-лимфоцитов), факторов есте­ственной резистентности (комплемент, интерферон, белки сы­воротки крови), иммунорегуляторов (интерлейкины, интерфе­роны, пептиды тимуса, костного мозга и др.). В соответствии с целевым назначением диагностических препаратов они содержат те или иные специфические иммунореагенты (антигены, анти­тела, аллергены, иммуномодуляторы, факторы естественного иммунитета и др.), которые используют для выявления объекта исследования в определенных реакциях или тест-системах. Эф­фект реакции в соответствии с характером иммунореагентов и механизма реакции регистрируют по физическим (например, мутность), химическим (например, изменение цветности) или клиническим (симптомы и проявления) показателям. Перечень иммунологических реакций, используемых для диагностики, приведен в главе 9.

На основе перечисленных иммунологических реакций созда­ны сотни современных диагностических систем, с помощью которых диагностируют инфекционные (ВИЧ-инфекции, грипп, брюшной тиф, чума, холера, хламидиоз, вирусные гепатиты и др.) и неинфекционные (онкологические, аллергические, им­мунопатологические и др.) болезни. Иммунологические методы диагностики специфичны, высокочувствительны и достоверны, поэтому находят широкое применение в медицине и экологии (для обнаружения и индикации микробов). Эффективность этих методов значительно возросла благодаря использованию моно- клональных антител, очищенных и концентрированных антиге­нов, а также приборному оформлению диагностических систем, более точно улавливающих эффект реакции.

В последнее время интенсивно разрабатываются биосенсоры — системы точного и быстрого регистрирования физических (тем­пература, излучение), химических (появление нового химичес­кого вещества) или биологических эффектов, которые возни­кают в результате взаимодействия антигенов и антител между собой, влияние их на клетки или молекулы изучаемого объекта.

 

Аллергены – это антигены, на которые в организме возникает аллергическая реакция. Аллергены могут иметь различное происхождение:

1) бытовыми;

2) лекарственными;

3) животного происхождения;

4) растительными;

5) пищевыми;

6) инфекционными.

В основе аллергии могут лежать гуморальный и клеточный иммунный ответ. По механизмам и клиническим проявлениям выделяют четыре типа аллергии.

1. Анафилактический. Образуются комплексы АГ – АТ, которые фиксируются на различных клетках-мишенях, тучных клетках, базофилах, сенсибилизируя их к соответствующему аллергену. При повторном попадании аллергена в организм происходит выделение медиаторов аллергии.

2. Цитотоксический. При повторной сенсибилизации образующийся комплекс АГ – АТ ведет к цитолизу – гибели собственных клеток.

3. Иммунокомплексный. При повторном введении антигена избыток комплекса АГ – АТ приводит к мощной активизации комплемента.

4. Клеточный. В его основе преобладает клеточный иммунный ответ. За развитие реакции ответственны Т-киллеры. Развивается гиперчувствительность замедленного типа. Лежит в основе инфекционной аллергии.

Инфекционный аллерген – слабый аллерген, состояние аллергии развивается только в его присутствии.

Инфекционная аллергия развивается:

1) при хронической форме дизентерии, гонореи, туберкулезе, в третичном периоде сифилиса; при этом образуются гуммы – опухолеподобные разрастания лимфоидной ткани;

2) при особо опасных инфекциях: чуме, сибирской язве, туляремии, бруцеллезе;

3) при глубоких микозах;

4) в период реконвалесценции при тифопаратифозных заболеваниях.

При ряде инфекций может быть использован аллергологический метод диагностики,

1) при туберкулезе – проба Манту с туберкулином;

2) при хронической форме дизентерии – проба Цуверкалова;

3) при гонорее – проба с гоновакциной;

4) при бруцеллезе – проба Бюрне с бруцеллином;

5) при туляремии – проба с туляремином;

6) при сибирской язве – проба с антраксином.

Положительные аллергические пробы дают больные, бактерионосители и вакцинированные живой вакциной.

Токсины -ядовитые вещества, образуемые живыми организмами, в том числе и микроорганизмами. По хим. природе – полипептиды. Исключение составляют афлатоксины, являющиеся производными кумаринов. Обладают антигенными свойствами. Среди микробных Т. различают экзотоксины (простые белки), которые образуются грамположительными патогенными бактериями и выделяются в среду в процессе их роста; эндотоксины (сложные белки – комплексы липополисахаридов с белками), которые освобождаются при распаде (лизисе) микроорганизмов. Гены, кодирующие экзотоксины, локализованы большей частью в плазмидах или профагах, а не в бактериальной хромосоме. Все экзотоксины обладают высокой специфичностью, т. е. поражают определенные ткани. Примеры экзотоксинов–тетаноспазмин и тетанолизин возбудителя столбняка, дифтерийный Т. и др. Эндотоксины находятся в наружных слоях клеточных стенок всех патогенных грамотрицательных бактерий. Действие их на организм относительно неспецифично. Примеры эндотоксинов–Т. возбудителей брюшного тифа, дизентерии и др.

Вопрос №59. Сыворотки. Определение. Современная классификация сывороток. Требования, предъявляемые к сывороточным препаратам.

Иммунные сыворотки: иммунологические препараты на основе антител.

1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыво­ротки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.

2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к воз­будителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.

3.Противовирусныесыворотки (коревая, гриппоз­ная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.

Иммунные сыворотки получают путем гипе­риммунизации животных (ло­шади) специфическим антигеном (анатоксином, бактериальными или вирусными культурами и их антигенами) с пос­ледующим, в период максимального антителообразования, выделением из крови иммунной сыворотки. Иммунные сы­воротки, полученные от животных, называют гетерогенными, так как они содержат чужерод­ные для человека сывороточные белки.

Для получения гомологичных нечужеродных иммунных сывороток используют сы­воротки переболевших людей (коревая, оспенная сыворотки) или специ­ально иммунизированных людей-доноров (противостолбнячная, противоботулиническая), содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакци­нации или перенесенного заболевания.

Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины. Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами.

Иммунные сыворотки создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для ле­чения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.