Лабораторная работа №6. Изучение перевариваемости белков хлеба методом Ансона

 

6.1 Цель работы: изучения процесса перевариваемости белков хлеба под действием протеолитических ферментов.

 

Общие сведения

По данным ФАО, норма потребления белка составляет 12-15% общей калорийности суточного рациона человека, или 90-100 г, в том числе 60-70% белка животного происхождения.

Однако 95% населения земного шара испытывают белковый дефицит, особенно в животных белках. Отличающихся полным набором и сбалансированностью аминокислотного состава.

Ввиду многообразия природных белков для источников питания приняты оценочные критерии, в частности питательная ценность, или качество белка. Питательная ценность белков определяется двумя факторами: аминокислотным составом и степенью усвояемости животным организмом, которая в свою очередь, складывается из преваримости белка ферментами пищеварительного тракта и доли всасывания в тонком отделе кишечника.

Для определения питательной ценности белков в лабораторных опытах часто ограничиваются оценкой переваримости in vitro системой основных пищеварительных ферментов (пепсин+трипсин) в условиях, приближенных к биологическим в желудочно-кишечном тракте животных организмов.

 

Практическая часть

Приборы и реактивы: глициновый буфер рН 2,2 (для приготовления взять 25 мл 0,2М раствора глицина (15,0 г глицина растворить в 1000 мл воды) в колбу на 100 мл и прилить 22,0 мл 0,2М раствора соляной кислоты, довести до метки дистиллированной водой); 0,02%-ный раствор пепсина; 10%-ный раствор трихлоруксусной кислоты; термостат; центрифуга; фотоэлектрокалориметр; химические стаканы; мерные пипетки на 2мл и на 10 мл.

Методика выполнения работы

В качестве субстрата используется 20%-ная хлебная суспензия в глициновом буфере (рН 2,2). К 10 мл полученного субстрата, приготовленного из мякиша хлеба и выдержанного в термостате при температуре 37ºС в течение 20 минут, добавить 10 мл 0,02%-ного раствора пепсина. Гидролиз провести при температуре 37ºС в течение 90 минут в термостате. При этом через каждые 30 минут из реакционной пробы, не прерывая опыта, отбирать по 2 мл исследуемой суспензии в стакан. Затем в сосуд вносят такой же объем глицинового буфера. К отобранной для анализа суспензии добавить 3 мл 10%-ного раствора трихлоруксусной кислоты для ингибирования протеолиза и поставить стаканы с суспензией в термостат. Через 90 минут осадок отделить центрифугированием в течение 5 минут при 3000 об/мин. В надосадочной жидкости провести определение оптической плотности растворов, содержащих продукты гидролиза белка с помощью фотоэлектрокалориметра в кювете с шириной грани 1 см при длине волны 300 нм. Значение переваримости можно получить взвешиванием остатков переваривания.

 

Оформление результатов опыта

Полученные результаты выбора светофильтра записать в таблицу 15.

Таблица 15.

Количество пепсина, мл	Оптическая плотность

 

Построить графики динамики гидролиза белков хлебного мякиша под действием пепсина.

 

6.4 Контрольные вопросы

1. Какие методы используют для определения питательной ценности белков?

2. Чем определяется питательная ценность белков?

3. Напишите схему гидролиза белков в желудочно-кишечном тракте человека. Какие ферменты катализируют этот процесс?

4. Назовите функции белков в живых организмах.

5. Чем определяется биологическая ценность белков?

6. Как рассчитывается и что показывает аминокислотный скор белка.

Литература

[5, c.192-204; 368-371].

 

 

Лабораторная работа № 7.Определение содержания витаминов в растительном сырье при его обработке.

7.1 Цель работы: изучение методов определения витаминов в растительном сырье и вычисление процента потерь при его переработке.

 

Общие сведения

Витамины – это низкомолекулярные соединения различной химической природы, биорегуляторы процессов, протекающих в живом организме. Для нормальной жизнедеятельности организма человека витамины необходимы в небольших количествах. Так как организм не может удовлетворить свои потребности в витаминах за счет биосинтеза, они должны поступать с пищей. Отсутствие или недостаток витаминов в организме вызывает болезни недостаточности: гиповитаминозы и авитаминозы, в то же время прием витаминов в избыточных количествах может привести к развитию гипервитаминозов.

Свое название витамины получили от латинского слова vita–жизнь.

В настоящее время известно более тридцати соединений, которые относятся к витаминам.

В качестве единицы измерения пользуются миллиграммами (1 мг = 10^{-3 г), микрограммами (1 мкг = 0,001 мг = 10-6 г) на 1 г продукта или мг% (миллиграммов витаминов на 100 г продукта) и мкг% (микрограммы витаминов на 100 г продукта).}

Потребность человека в витаминах зависит от его возраста, состояния здоровья, условий жизни, характера деятельности, содержания в пище основных компонентов питания.

Практическая часть