Клинические признаки и патологоанатомические изменения

Инкубационный период продолжается 1-4 нед. В продромальном периоде, редко превышающем 72 ч, отмечают невысокую температуру, потерю аппетита, иногда рвоту, острый ринит, расстройство координации движения. Часто эти нарушения остаются незамеченными. Затем появляются клинические признаки поражения ЦНС. При энцефаломиелите наблюдают гиперстезию кожи, судорожные сокращения различных групп мышц, непроизвольные движения, регидность мышц конечностей, нистагм и т. п. Затем развиваются симптомы поражения спинного мозга - шатающаяся напряжённая походка, слабость конечностей, неполное их опирание на землю, прогрессирующий паралич, постепенно захватывающий конечности, шею и голову. Из-за паралича глотки отмечают частичную или полную утрату голоса. В тяжёлых случаях болезнь обычно заканчивается комой и гибелью животных. При более лёгком течении отмечают затруднённую походку, развитие полупараличей и параличей без явлений возбуждения. Животные, в основном, заражаются алиментарно. Затем вирус репродуцируется в эпителиоцитах слизистой оболочки толстого кишечника, а оттуда проникает в лимфоузлы, кровяное русло и разносится по всему организму, в том числе попадает в ЦНС. Клинически болезнь протекает с явлениями острого энцефаломиелита и менингита, наиболее выражена депрессия, повышенная кожная чувствительность, спастическое состояние губных, глазных и жевательных мышц, а также мышц конечностей, сопровождающееся плавательными движениями; часто наблюдают рвоту, афонию, хрипоту-, косоглазие, скрежетание зубами, затрудненное жесткое дыхание. После наступления стадии паралича температура тела снижается до нормальной и перед смертью достигает 32-34 °С (Рис. 72. 144).

Существенные патологоанатомические изменения находят только в ЦНС. Они характеризуются гиперемией мозговых оболочек и серозной инфильтрацией. На срезах мозга в различных местах отмечают кровоизлияния, периваскулярную круглоклеточную инфильтрацию с образованием очагов нейронофагии, причём поражается лишь серое вещество мозга. В мозжечке изменения обнаруживают в клетках Пуркинье. Наиболее характерные изменения находят в ганглиозных клетках. Поражаются моторные центры вентральных рогов («разжижение» ядер клеток, образование вакуолей, наличие кариорексиса). Значительная нейронофагия преобладает в вентральных рогах поясничной области спинного мозга. Диагностическую ценность представляют гистологические изменения. Они наиболее выражены в средней и каудальной частях головного мозга (особенно на его основании - ножках мозга и четверохолмии), а также в шейной и поясничной частях спинного мозга.

При патологоанатомическом исследовании наблюдают гиперемию мягких оболочек, явления отека серого вещества (преимущественно ромбовидного и среднего мозга), шейного и поясничного утолщений спинного мозга, катаральный ринит, бронхит и отек легких, точечные и пятнистые кровоизлияния под эпи- и эндокардом. Желудок обычно наполнен кормовыми массами, слизистые его и толстого отдела кишечника складчатые, очагово гиперемированы и покрыты густой прозрачной слизью. Мочевой пузырь всегда переполнен.

При микроскопическом исследовании ЦНС всегда определяют негнойный, лимфоцитарного типа полиэнцефаломиелит и менингит. При исследовании животных, павших в первые дни болезни, в сером веществе головного и спинного мозга наблюдают разные по величине очаговые и диффузные клеточные инфильтраты из глиальных элементов, гистиоцитов и лимфоцитов. Среди клеток инфильтрата иногда обнаруживают небольшие скопления эритроцитов. Полиморфноядерные и нейтрофильные лейкоциты встречаются редко и только у животных, павших (или убитых) в первые часы и дни клинического проявления болезни. Многие клетки инфильтрата находятся в состоянии пикноза и рексиса. В очагах поражения часто регистрируют дезинтеграцию нервной ткани, дистрофические и некробиотические изменения нервных элементов, распад и исчезновение фосфолипидов. По периферии диффузных и крупнофокусных поражений паренхимы отмечают активизацию микроглии, местами - мелкоочаговые скопления мононуклеарных клеток.

Патогенез

Первичная репродукция вируса отмечается в заглоточных лимфоузлах и кишечнике. Во время болезни отмечают лейкоцитоз, резко меняется количество клеток в ликворе; уже на 2-е сутки оно возрастает до 44 (при норме 10-12); на 3-и до 247-395 в 10⁹/л (p<0/001); причем преобладают полиморфные ядерные нейтрофильные лейкоциты и лимфоциты. В 3-4 раза возрастает содержание общего белка спинномозговой жидкости, органического фосфора – в 2-3 раза, что свидетельствует об интенсивной воспалительной реакции в мозговом веществе и оболочках.

Характеристика возбудителя

Впервые вирус болезни Тешена выделил Трефни (1930) в Чехословакии в округе Тешен.

Морфология и химический состав. Вирионы сферической формы, диаметр их 25-30 нм. Вирионы безоболочечные, с плавучей плотностью в CsCl 1,34 г/ см³, содержат ядро из 1-нитчатой РНК, окруженное кубическим капсидом. Липопротеины отсутствуют и вирус устойчив к жирорастворителям.

Антигенная активность. В крови больных и переболевших животных появляются специфические ВНА и КСА.

Антигенная вариабельность и родство. В РН и РСК показано антигенное родство между вирусами болезни Тешена и болезни Талфана. В иммунологическом отношении вирусы болезни Тешена являются единым типом, внутри которого различают два подтипа, в первый входят штаммы Bozen, Konratice, Repo-ryie, во второй - штаммы Tyrol, Sweden Ug, Talfan.

ГА свойства не установлены.

Локализация вируса, вирусоносительство и вирусовыделение. В крови и в органах вирус обнаруживается кратковременно и в небольшом количестве. Виремию в течение 48 ч отмечают между 4-6 днями после заражения, титры вируса в крови обычно бывают невысокими. В организме свиней вирус локализуется и размножается в тканях ЖКТ, в которых он появляется через 24-72 ч после заражения и обнаруживается в течение 5-7 недель. Наивысшие титры вируса (10⁶ ТЦД₅₀/г) в пробах фекалий обнаруживают через 9 дней после заражения. В миндалинах, мезентериальных и брыжеечных лимфоузлах вирус появляется через 48 ч после заражения и выявляется в течение 6-8 дней. В головном и спинном мозге он выявляется после виремии. В максимальных титрах (1О^5,5 - 10 ^6,6 ТЦД₅₀/г) он содержится там еще до проявления признаков болезни и в течение первых дней паралитической стадии. В наиболее высоких концентрациях вирус содержится в шейном и грудном отделах спинного мозга и в мозжечке, что делает эти ткани наиболее пригодным материалом длявыделения вируса. К 5-му дню после появления симптомов болезни содержание вируса в тканях ЦНС снижается, и к моменту гибели животного можно наблюдать так называемую аутостерилизацию. Менее регулярно вирус обнаруживают в секретах и экскретах (носовые истечения), иногда - в кале.

Культивирование. Вирус размножается в культурах клеток почек, легкого, сердца, семенников, яичников и др. поросят 3-8 недельного возраста и эмбрионов свиньи. Размножение сопровождается образованием бляшек. ЦПИ, не отличаются от изменений, вызываемых другими энтеровирусами свиней. Они характеризуются скоплением округлившихся клеток с повышенной рефрактильностью, которые становятся заметными на 3-5-й день после заражения. При использовании адаптированных "культуральных" штаммов вируса первые признаки ЦПД появляются значительно раньше (иногда уже через 2-16 ч). Пораженные клетки отделяются от поверхности стекла; помимо очагов дегенерации, появляются участки, лишенные клеток. При исследовании окрашенных препаратов инфицированной культуры обнаруживают зернистость и ацидофилию протоплазмы, конденсацию хроматина и эксцентричное положение ядра. Развитие ЦПИ соответствует нарастанию титра вируса. При работе с адаптированными штаммами вновь образованный вирус появляется в культуре между 9 и 12 ч после инокуляции. Максимальные титры его (10 ^7,5-10 ⁸ ТЦД ₅₀/мл) обычно бывают при дегенерации монослоя на 75% (+++), что чаще всего происходит в период между 18 и 24 ч после заражения. К моменту полного разрушения монослоя титр вируса начинает снижаться. На КЭ вирус болезни Тешена и возбудители тешеноподобных заболеваний не размножаются.

Размножение энтеровирусов свиней (вируса болезни Тешена - Тальфана) удается в перевиваемый диниях клеток почек (IBRS-2) и других органов (SST). Некоторые штаммы репродуцируются в клетках HeLa, BHK-21 Различные штаммы вызывают 1 из 3видов ЦПД в культуре клеток почек поросят и по характеристике ЦПД в клетках BHK-21, HeLa и Vero штаммы относят к одной из 4-х групп.

Диагностика

Для выделения вируса из ЦНС необходимо отбирать пробы тканей от свиней с нервным синдромом на ранней стадии его проявления. У животных с признаками параличей уже через несколько дней вирус не обнаруживается в ЦНС. Вирус может быть выделен в культурах клеток из спинного мозга, коры головного мозга или мозжечка. Идентификацию вируса проводят на основе физико-химических характеристик, ИФ или ИФА. Длявыявления AT широко используется ELISA.

При дифференциальной диагностике следует исключить БА, бешенство, КЧС, отравления хлоридами и соланином. Диагноз на прошедшую инфекцию, а также латентное вирусоносительство ставят на основании определения титров AT в сыворотках крови реконвалесцентов в РН в культуре клеток почки свиньи с использованием лабораторных штаммов вирусов болезни Тешена, Талфана и Т-80.

Для ускоренной диагностики болезни, а также выявления концентрации вируса в органах и тканях используют ИФ. В первые 3 дня болезни наблюдают специфическое свечение цитоплазмы нейронов всех исследованных отделов ЦНС, клеток межпозвоночных узлов, отдельных клеточных элементов селезенки, мезентериальных лимфоузлов, слизистой толстого кишечника. Но начиная с 4 суток свечение в нервных элементах и других тканях резко снижается, а на 5-7-е сутки энтеровирусный АГ выявляют лишь в эпителии слизистой кишечника. Вот почему для диагностики энзоотического энцефаломиелита свиней кроме тканей (мозжечок, продолговатый и спинной мозг), рекомендуемых инструкцией для ИФ, необходимо отбирать и кусочки слизистой ободочной кишки. При прижизненной диагностике и определения у животных вирусоносительства разработан и внедрен в производство прямой метод флюоресцирующих AT в мазках - отпечатках со слизистой прямой кишки и фекалий. Положительную ИФ в мазках наблюдают в эпителиоцитах и их обломках в течение всей болезни, а у переболевших (вирусоносителей) - до 2 месяцев.