Комплемент, его свойства, пути активации, биологическая функция. Пропердин.

Природа и характеристика комплемента. Комплемент является одним из важных фак­торов гуморального иммунитета, играющим роль в защите организма от антигенов. Комплемент представляет со­бой сложный комплекс белков сыворотки крови, находящийся обычно в неактивном состоянии и активирующийся при соедине­нии антигена с антителом или при агрега­ции антигена. В состав комплемента входят 20 взаимодействующих между собой белков, девять из которых являются основными ком­понентами комплемента; их обозначают циф­рами: С1, С2, СЗ, С4... С9. Важную роль играют также факторы В, D и Р (пропердин). Белки комплемента относятся к глобулинам и отличаются между собой по ряду физико-химических свойств. В частности, они сущес­твенно различаются по молекулярной массе, а также имеют сложный субъединичный состав: Cl-Clq, Clr, Cls; СЗ-СЗа, СЗЬ; С5-С5а, С5b и т. д. Компоненты комплемента синтези­руются в большом количестве (составляют 5—10% от всех белков крови), часть из них образуют фагоциты.

Функции комплемента многообразны: а) участвует в лизисе микробных и других клеток (цитотоксическое действие); б) обладает хемотаксической активностью; в) принимает учас­тие в анафилаксии; г) участвует в фагоцитозе. Следовательно, комплемент является компонен­том многих иммунологических реакций, направ­ленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных клеток и антигенов (на­пример, опухолевых клеток, трансплантата).

Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад фер­ментативных протеолитических реакций, в результате которого образуется активный цитолитический комплекс, разрушающий стен­ку бактерии и других клеток. Известны три пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый.

По классическому пути комплемент активирует­ся комплексом антиген-антитело. Для этого достаточно участия в связывании антигена одной молекулы IgM или двух молекул IgG. Процесс начинается с присоединения к ком­плексу АГ+АТ компонента С1, который рас­падается на субъединицы Clq, Clr и С Is. Далее в реакции участвуют последовательно активированные «ранние» компоненты комплемента в такой последовательности: С4, С2, СЗ. Эта реакция имеет характер усиливающе­гося каскада, т. е. когда одна молекула пре­дыдущего компонента активирует несколько молекул последующего. «Ранний» компонент комплемента С3 активирует компонент С5, который обладает свойством прикрепляться к мембране клетки. На компоненте С5 путем последовательного присоединения «поздних» компонентов С6, С7, С8, С9 образуется литический или мембраноатакующий комплекс который нарушает целостность мембраны (образует в ней отверстие), и клетка погибает в результате осмотического лизиса.

Альтернативный путь активации комплемен­та проходит без участия антител. Этот путь характерен для защиты от грамотрицательных микробов. Каскадная цепная реакция при аль­тернативном пути начинается с взаимодействия антигена (например, полисахарида) с протеи­нами В, D и пропердином (Р) с последующей активацией компонента СЗ. Далее реакция идет так же, как и при классическом пути — образу­ется мембраноатакующий комплекс.

Лектиновыи путь активации комплемента также происходит без участия антител. Он ини­циируется особым маннозосвязывающим белком сыворотки крови, который после взаимодейс­твия с остатками маннозы на поверхности мик­робных клеток катализирует С4. Дальнейший каскад реакций сходен с классическим путем.

В процессе активации комплемента обра­зуются продукты протеолиза его компонен­тов — субъединицы СЗа и СЗb, С5а и С5b и дру­гие, которые обладают высокой биологической активностью. Например, СЗа и С5а принимают участие в анафилактических реакциях, являют­ся хемоаттрактантами, СЗb — играет роль в опсонизации объектов фагоцитоза, и т. д. Сложная каскадная реакция комплемента происходит с участием ионов Са²⁺ и Mg²⁺.

Пропердин, или фактор P, — глобулярный белок, обнаруженный в сыворотке крови высших животных. Представляет собой несколько растворённых в кровотоке проферментов, относящихся к системе комплемента, которая обеспечивает врождённый иммунитет.

Как компонент альтернативного пути активации комплемента (иначе известного как «пропердиновый путь»), он образует комплексы с другим белком, C3b, для стабилизации альтернативной C3-конвертазы (C3bBb), которая затем расщепляет больше C3.

Альтернативный путь не зависит от антител. Эта ветвь системы комплемента активируется иммунными комплексами IgA c бактериальным эндотоксином, полисахаридами и клеточными стенкам, в результате чего образуются анафилатоксины, опсонины, хемотаксические факторы и мембраноатакующий комплекс, которые помогают в борьбе с патогенами.

Билет 26

1) Клеточная стенка бактерий. Строение Гр+ и Гр- бактерий. Функции клеточной стенки. L-формы.

поверхностная структура бат. кл., располагается над цитоплазматической мембр. (ЦПМ). Защищает клетку от мехаических, физических воздействий окр. ср. защищает от осмотич. лизиса. определ. форму и антигенную специфичность клетки.

отсутсвует у микоплазм.

кл.стенка Гр+ бактерий состоит в основном из пептидогликана (N-ацтилглюкозамин и N-ацетимурамовая к-ты), расположенного в 40 слоев; составляет до 90% массы клет. стенки. Пептидогликан "прошит" ковалентно связанными с ним тейхоевой (продольно) и липотейхоевой (поперечно) кислотами.

кл. ст. Гр- м/о - 1-2 слоя пептидогликана, расп. кнаружи от ЦПМ, с ним посредством липополисахарида связ. наружная мембрана, сходная по строению с ЦПМ, но внутр. сл. образован фосфолипидами, а наружный - липополисахарид (ЛПС).

L-формы м/о - это м/о, полностью или частично утратившие кл.ст., но сохранившие сп-ть в размножению. Устойчивые L-ф. - м/о полностью утратившие кл.ст. и не способные ее восстановить. Неустойчивые L-ф. - м/о, частично утратившие кл. ст. и способные восст-ть ее. Являются осмотически неустойчивыми и исследуются при помощи фазово-контрастной микроскопии.

Клеточная стенка выявляется методом Пешкова:

1. препарат фиксируют жидкостью Карнуа 15 мин.

2. промыв. водой

3. протравливают р-ром танина 6-8 мин

4. промывают водой

5. окраш. водн. р-ром фуксина 30-60сек

6. не промывают, высушивают, микроскопируют

в поле зрения видны клетки с розовой цитоплазмой, окруженные красной клет. стенкой