Структура бактериальной клетки. Жгутики, типы их расположения, значение. Способы выявления жгутиков. Ворсинки (пили, фимбрии). 


Мы поможем в написании ваших работ!



ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?

Структура бактериальной клетки. Жгутики, типы их расположения, значение. Способы выявления жгутиков. Ворсинки (пили, фимбрии).



Жгутик - нить из белка флегеллина, прикрепленная к ЦПМ посредством базального тельца (комплекс дисков и крючка). Является аппаратом движения.

по расположению выделяют: монотрихи (1 жгутик), лофотрихи (пучок жгутиков), амфитрихи (жгутики или пучки жгутиков с двух сторон), перитрихи(по всей пов-ти)

выявляется методом серебрения+ иммерсионная микроскопия ил косвенно по активному движению клеток в нативном препарате.

ворсинки(пили и фимбрии): сост. из белка пилина. выявляются электрон. микроскопией. делятся на F-пили (обесп. конъюгацию) и фимбрии общего порядка (обесп. адгезию)

Молекулярная гибридизация. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Метод молекулярной гибридизации основан на способности ДНК к денатурации (при 80-100 градусах или обработке щелочью) и ренатурации (при охлаждении до 40-60 градусах, т.н. отжиг). Для обнаружения в исследуемом материале нуклеиновых кислот-мишеней используются молекулярные зонды, получаемые из виурсов или микробных клеток. После отжига зонд оказывается включенным в ренатурированную нуклеиновую кислоту и может быть оьнаружен по имеющейся метке методами РИА, ИФА и МИФ.

Можно проводить в растворе или на фильтрах путем прямого нанесения растворов нуклеиновых кислот на фильтр (дот или слот-боты) или после их фракционирования в агарозном геле (Саузерн- и Нозерн-боты).

В растворе и блот-гибридизация используются при дигностике инфекционных заболеваний для обнаружения в материале от больного нуклеиновой кислоты возбудителя.

Саузерн- и Нозерн-блоты позволяют обнаружить структурные изменения в молекулах нуклеиновых кислот. Метод применяется для выявления генетических нарушений на уровне макроорганизма.

Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружить микроб в ис­следуемом материале (воде, продуктах, ма­териале от больного) по наличию в нем ДНК микроба без выделения последнего в чистую культуру.

Для проведения этой реакции из исследу­емого материала выделяют ДНК, в которой определяют наличие специфичного для дан­ного микроба гена. Обнаружение гена осу­ществляют его накоплением. Для этого необ­ходимо иметь праймеры комплементарного З'-концам ДНК. исходного гена. Накопление (амплификация) гена выполняется следую­щим образом. Выделенную из исследуемого материала ДНК нагревают. При этом ДНК распадается на 2 нити. Добавляют праймеры. Смесь ДНК и праймеров охлаждают. При этом праймеры, при наличии в смеси ДНК искомо­го гена, связываются с его комплементарными участками. Затем к смеси ДНК и праймера добавляют ДНК-полимеразу и нуклеотиды. Устанавливают температуру, оптимальную для функционирования ДНК-полимеразы. В этих условиях, в случае комплементарное™ ДНК гена и праймера, происходит присоединение нуклеотидов к З'-концам праймеров, в резуль­тате чего синтезируются две копии гена. После этого цикл повторяется снова, при этом ко­личество ДНК гена будет увеличиваться каждый раз вдвое. Проводят реакцию в специальных приборах — амплификаторах. ПЦР применяется для диагностики вирусных и бактериальных инфекций.

Билет 46

1) Споры бактерий, их строение, условия образования и причины устойчивости. Методы выявления спор.

Спора является способом сохранения вида в неблагоприятных условиях окр.ср. 1 бакт. - 1 спора (не явл-ся мет. размножения).

к спорообразованию способны бакт. р.Clostridium и р.Bacillus. Бациллы образуют центрально расп. споры, не превышающие диаметра клетки, клостридии - крупные субтерминальные/терминальные споры -> клетка имеет веретовидную ф.

Не проявляя метаб. акт-ти сохраняют жизнеспособ-ть бакт. в неблагопр. усл.

Устойч. к выс. темп-рам и дезинфектантам (и др. факторам, неблагопр. для микробов)

Причина устойчивости: малое содержание свободной воды, выс. конц. Са++, наличине дипиколиновой кислоты и белка, богатого цистеином (и из-за того сходного с кератином). А также неск. оболочек как дополнит. фактора защиты от возд. окр.ср.

прорастают в благоприятн. для вида усл.

строение: нуклеоид, вокруг которого цитоплазма нуклеоида, клет.ст. зародыша, кора, внутренняя обол. споры, наружняя обол. споры и экзоспорум.

плохо воспринимают окраску, выявляются методом Ожешко (т.к. простым методом не окрашивается - получаются б/цв споры в/вне клетки, сожет слабо окр-ся оболочка):

1. мазок бакт. культуры сушат на возд. б/фиксации

2. протравливают HCl + t* (2 мин)

3. промыв. водой, сушат, фиксируют

4. окраш. по мет. Циля-Нильсена

Красные споры в синих бактериях



Поделиться:


Последнее изменение этой страницы: 2017-01-19; просмотров: 242; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы!

infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 52.90.211.141 (0.018 с.)