Схема микробиологической диагностики микоплазмозов

 

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: мокрота; слизь из носоглотки, зева, уретры; плевральная и лаважная жидкость; кровь, моча (у мужчин первая порция), синовиальный экссудат

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКИЙ, БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ, СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ, МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ

 

Бактериоскопический метод	Бактериологический метод	Серологический метод	Молекулярно-биологический метод
Отсутствуют четкие морфологические характеристики, исключается возможность идентификации возбудителя в клиническом материале	I ЭТАП: 1. Посев на сложные питательные среды с пенициллином (10000 ЕД/мл) и амфотерицином (5 ЕД/мл). Инкубация при 37^оС 7-14 суток в атмосфере 5% CO2 и 95% N II ЭТАП: 1. Изучение характера роста. 2. Отбор подозрительных колоний (форма «яичница-глазунья»). 3. Мазок, окраска по Граму, микроскопия. 4. Посев на кровяной агар. Инкубация при 37^оС III ЭТАП: 1. Контроль чистоты культуры: а) визуально; б) микроскопически. 2. Идентификация выделенной культуры: а) изучение биохимических свойств (проба Закса и др.); б) определение антигенных свойств в реакциях ИФА, РСК, РНГА, РИФ; в) тест угнетение роста на питательной среде с иммунной сывороткой; г) ПЦР; 3. РИММ (реакция ингибиции метаболизма микоплазм); 4. РИР (реакция ингибиции роста. IV ЭТАП: Учет полученных результатов. Окончательный ответ.	1. РСК. 2. РНГА. 3. ИФА. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в парных сыворотках.	1. ДНК-зонды. 2. ПЦР. 3. ПЦР мультиплексная - определение нуклеотидных последовательностей M. genitalium, M. urealyticum, M. hominis. 4. НАСБА – метод для выявления РНК.

 

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МИКОПЛАЗМ

Виды микоплазм	Метаболизм	Формирование пленок и пятен на поверхности среды	Фосфатазная активность	Гидролиз казеина	Редукция тетразолиума	Взаимодействие с эритроцитами
глюкозы	аргинина	мочевины	гемадсорбция	гемолиз и гемагглютинация
M. pneumoniae	+	-	-	-	-	-	+	+	+
M. hominis	-	+	-	-	-	-	-	-	-
M. genitalium	+	-	-	-	-	-	Слабая в аэробных условиях; в анаэробных условиях – отрицательная	+	-
M. fermentans	+	+	-	+	+	-	В аэробных условиях - отрицательная; в анаэробных – положительная	-	b- гемолиз
M. penetrans	+	+	-	-	+	-	В аэробных условиях - положительная, в анаэробных – отрицательная	+	Слабые
Ureaplasma spp.	-	-	+	-	+	+	-	+	Эритроциты кролика - положительная; морской свинки - положительная

СХЕМА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

 

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: поверхность эрозий, язв, мокнущих папул, пунктат лимфоузлов, СМЖ, сыворотка крови,

гистологические срезы, биопсийный и аутопсийный материал

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКИЙ, СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ (ОСНОВНОЙ), АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЙ,

МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЙ

 

Бактериоскопический метод	Серологический метод
1. Определение характерной подвижности и морфологии трепонем в нативных препаратах: - темнопольная микроскопия; - фазово-контрастная микроскопия. 2. Микроскопия фиксированных препаратов: - РИФ (непрямой метод); - окраска по Романовскому-Гимзе (нежно-розовый цвет); - серебрение по Морозову (коричневый, черный цвет).	1. Неспецифические реакции с кардиолипиновым антигеном для первичного скрининга и контроля эффективности лечения: - реакция микропреципитации (РМП); - экспрессный пзазмореагиновый тест (RPR – Rapid Plasma Reagin, VDRL – Veneral Disease Research Laboratory, реакция флоккуляции); - РНГА. 2. Специфические реакции с антигенами Т. pallidum для подтверждения диагноза: - ИФА; - РНГА; - РИФ (непрямой метод); - РИБТ с живыми культурами трепонем; - иммуноблоттинг. 3. Реакция Вассермана (РСК) с кардиолипиновым и специфическим антигенами. 4. Иммуногистохимические методы с использованием моноклональных антител для обнаружения Т. pallidum в тканях.
Аллергологический метод (при третичном сифилисе)	Молекулярно-биологический метод
Внутрикожная аллергическая проба с люетином.	1. ПЦР 2. ЛЦР