Международная классификация групп крови

ГЛАВА 2

ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ

По определению Всемирной Организации Здравоохранения (2012) - Переливание крови - это переливание собственно крови или ее компонентов от одного человека (донора) другому (реципиенту). Благодаря переливанию крови можно спасать жизнь людей, поэтому перед службами здравоохранения стоит задача обеспечения достаточного резервного запаса безопасной крови и его надлежащего использования.

 

Основные факты (Информационный бюллетень ВОЗ №279 Июнь 2012 г.)

Ежегодно собирается около 92 миллионов донаций (заборов) крови. Примерно половина этих донаций приходится на страны с высоким уровнем дохода, где проживает 15% населения мира.

Информацию о донациях крови предоставляют около 8000 центров крови из 159 стран. В странах с высоким уровнем дохода среднегодовое количество донаций крови из расчета на один центр крови составляет 30 000 по сравнению с 3700 в странах с низким уровнем дохода.

В 62 странах национальные запасы крови почти полностью основаны на добровольных безвозмездных донациях. Цель ВОЗ заключается в том, чтобы к 2020 году все страны получали все свои запасы крови от добровольных неоплачиваемых доноров.

39 стран были не в состоянии проверять все донации крови на одну или более из следующих передаваемых при переливании инфекций (ППИ): ВИЧ, гепатит B, гепатит С и сифилис.

 

Международная классификация групп крови

Принятая международная классификация обозначает каждую группу крови по наличию или отсутствию в ней двух агглютининов сывороток, которые названы альфа (а) и бета (b) и двух агглютиногенов эритроцитов, названных А и В.

1. Первая группа крови определяется тем, что в ее эритроцитах отсутствуют агглютиногены, а в сыворотке имеются оба агглютинина - альфа и бета. Таким образом, полная формула крови 1 группы: 0ab(I).

2. В крови II группы эритроциты имеют только один агглютиноген - А, а сыворотка содержит один агглютинин - бета. Таким образом, полная формула крови II группы: Ab(II).

3. III группа крови характеризуется тем, что эритроциты имеют только один агглютиноген - В, а ее сыворотка содержит только один агглютинин - альфа. Таким образом, полная формула крови III группы: Ва(III).

4. IV группа крови отличается тем, что ее эритроциты имеют оба агглютиногена - А и В, а ее сыворотка вообще не содержит агглютининов. Таким образом, полная формула крови IV группы: АВо(IV).

В настоящее время принято обозначать группы крови цифрой и по содержанию агглютиногенов эритроцитов: 0(I); А(II); В(III); AB(IV) (рис.2.1).

 

Рис.2.1. Макромолекулы – антигены (агглютиногены) А и В на поверхности эритроцитов

Содержание в крови человека агглютинов и агглютиногенов постоянно и в течение жизни не меняется. Может колебаться титр агглютининов в связи с состоянием организма, болезнями.

Агглютиногены эритроцитов появляются на 3-м месяце внутриутробной жизни плода, а агглютинины сывороток - в течение первого года жизни. Титр агглютининов сыворотки детей низкий, чем и объясняется тот факт, что дети переносят переливание крови (как одногруппной, так и универсальной) с меньшей реакцией. Дополнительными исследованиями установлено, что агглютиноген А имеет две разновидности: А1 и А2, причем А1 встречается в 95 % случаев, а A2 - в 5 % случаев. В настоящее время их отличие заключается лишь в разном времени агглютинации при определении групп крови. Следовательно, можно говорить о большем количестве групп крови, но в практической работе по переливанию крови пользуются делением людей на четыре группы. Распределение групп крови среди населения разных стран имеет некоторые различия, но в среднем считается, что людей 0(I) группы - 41 %, А(II) - 38 %, B(III) - 18 % и AB(IV) - 3 %.

Резус фактор.

У 85 % людей эритроциты содержат белок, особое антигенное вещество, названное резус-фактор. Эти люди считаются резус-положительными, а остальные 15 %, не имеющие в крови резус-фактора, резус-отрицательными.

Переливание резус-положительной крови резус-отрицательным больным приводит к выработке у них резус-антитела. При повторных переливаниях у них наступает тяжелая посттрансфузионная реакция, способная привести к смертельному исходу. Для предупреждения этого осложнения обязательно исследование крови на содержание резус-фактора.

Определение группы крови с помощью моноклональных антител (цоликлонов анти-А, анти-В, и анти-АВ)

 

1. Нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками Цоликлоны Анти-А, Анти-В и Анти-АВ по одной большой капле (0.1 мл) под соответствующими надписями.

2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл).

3. Смешайте кровь с реагентом.

4. Наблюдайте за ходом реакции с Цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с Цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

5. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

6. Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с Цоликлонами представлена в таблице № 1 и рис. 2.4.

 

 

Табл.№ 1

Определение групп крови с Цоликлонами

Группа крови	Анти-A	Анти-B	Анти-АВ
0(I)	-	-	-
A(II)	+	-	+
B(III)	-	+	+
АB(IV)	+	+	+

Примечание: знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) её отсутствие.

 

Рис. 2.4. Результаты реакции агглютинации исследуемой крови с Цоликлонами

В настоящее время существует большое количество цоликлонов к разным антигенам, которые предназначены для определения групп крови по различным системам. Наиболее часто используются цоликлоны анти-А (красная жидкость), анти-B (синяя жидкость) и анти-D (прозрачная жидкость). Первые два цоликлона предназначены для определения группы крови по системе AB0, анти-D — для определения группы крови по системе резус. Кроме того, достаточно распространены в использовании цоликлон анти-А1 (лектин), позволяющий среди носителей А-антигена выбрать популяцию носителей ослабленного А2-антигена (то есть лиц, имеющих А2(II) или А2В(IV) группы крови). Неиспользовние цоликлона анти-А1 чревато неверным результатом для такой категории лиц. (вероятна постановка 0(I) вместо А2(II) и В(III) вместо А2В(IV) групп крови).

 

Определение резус-фактора

Все методы определения резус-фактора делятся на серологические способы, генетический анализ и экспресс-методы, применяемые в клинике не требующие специального лабораторного оснащения.

Используются два экспресс-метода:

1. Экспресс-метод со стандартным универсальным реагентом D в пробирке без подогрева.

2. Определение резус-фактора с помощью моноклонального реагента (Цоликлон анти-D Супер). Этот метод в настоящее время ведущий.

 

Консервирование крови

Консервирование крови – это комплекс воздействий на нее, имеющих своей целью создание условий для длительного хранения крови вне организма в стерильном состоянии с максимальным сохранением ее биологических свойств (как форменных элементов, так и жидкой части крови).

Для консервирования крови используются два метода:

· консервирование при положительных температурах;

· консервирование при отрицательных температурах.

Хранение крови при положительных температурах обычно происходит в бытовых комнатных холодильниках. Они обеспечивают поддержание температурного режима в пределах от +2 до +4°С. При таких температурах можно хранить консервированную цельную кровь, эритроцитную массу, нативную плазму.

Различные компоненты крови имеют разные сроки хранения. Так, например, эритроциты могут сохранять свои свойства в течение нескольких недель, а лейкоциты и тромбоциты – только несколько дней. Это объясняется тем, что лейкоциты и тромбоциты – ядерные клетки с более сложными функциями, а при длительном хранении в первую очередь изменения затрагивают ядро клетки. Срок хранения нативной плазмы ограничен тремя днями. Это обусловлено тем, что за это время инактивируется большая часть биологически активных веществ, входящих в ее состав.

Для того чтобы избежать таких нежелательных последствий при длительном хранении крови, используется ее консервирование при отрицательных температурах. Это позволяет увеличить срок хранения крови за счет того, что обменные процессы в клетках в значительной степени подавляются, а это препятствует раннему их "старению".

Для криоконсервирования используются следующие температурные режимы:

· умеренно низкие температуры (–40 – 80°С),

· ультранизкие температуры (–196°С).

Величиной температуры определяются сроки, в течение которых эритроциты смогут сохранить свои свойства. При умеренно низких температурах они могут храниться несколько месяцев, а при ультранизких – 10 и более лет.

Принимая во внимание то, что ядерные клетки "стареют" быстрее, чем эритроциты, для консервирования лейкоцитов и тромбоцитов желательно использовать ультранизкие температуры, так как при умеренно низких температурах срок хранения уменьшается до нескольких недель. Замораживание и хранение плазмы производят при t° —30°. Решению проблемы замораживания эритроцитов помогло установление факта, что ультрабыстрое охлаждение крови (100° в секунду) может происходить почти без кристаллического затвердевания (в тонком слое удавалось заморозить и сохранить малые объемы эритроцитов), и открытие криозащитного свойства глицерина, позволившего при смешении с эритроцитами сохранять их в замороженном состоянии.

В практике применяют два метода криоконсервирования эритроцитов: ультрабыстрое замораживание в жидком азоте (—196°) с малыми (15 %) концентрациями глицерина или медленное замораживание с большой (30—50%) концентрацией глицерина при умеренных температурах (—40, —80°) в воздушной камере электрорефрижераторов. Эти методы позволяют длительно (годами) сохранять неповрежденными 85—95% эритроцитов.

Методика ультрабыстрого замораживания эритроцитной массы состоит в том, что из цельной донорской крови после центрифугирования эритроциты выделяют с соблюдением строгих условий асептики и смешивают их со стерильным ограждающим раствором, содержащим глицерин. Смесь переводят в алюминиевый гофрированный контейнер или специальный пластиковый мешок и подвергают в течение 2 минут замораживанию путем погружения в ванну с жидким азотом, после чего переносят в специальный бункер или камеру также с жидким азотом для последующего длительного хранения. Для использования замороженных эритроцитов контейнеры или мешки вынимают из жидкоазотного хранилища, подвергают оттаиванию путем помещения на 25 сек. в ванну с водой (t° 45°C). После оттаивания производят отмывание эритроцитов от глицерина маннитно-солевыми, глюкозоманнитными, солевыми и другими растворами с последовательно снижающейся гиперосмией до изоосмии. Для отмывания эритроцитов используют метод последовательного центрифугирования и сливания надстоя или автоматические фракционаторы различного типа для асептического отмывания размороженных эритроцитов в замкнутой системе. Отмытые эритроциты заливают равным объемом изотонических растворов (сахарозоглюкозофосфатный, солевой и другие), после чего они пригодны для переливания в течение 24 часов.

Карантинизация крови

Принцип проведения карантинизации заключается в том, что компоненты крови после разделения закладываются на хранение в низкотемпературную камеру (-38 град. С), плазма в таких условиях может храниться в течение 3 лет (именно она содержит основное количество вирусов!), эритроцитная масса – 1 год. После истечения 180 дней (6 месяцев) хранения компонентов, донор обследуется повторно на основные маркеры гемотрансмиссивных заболеваний (вирусные гепатиты В и С, ВИЧ, сифилис). При получении отрицательных результатов проб, хранящиеся компоненты поступают на выдачу в лечебно-профилактические учреждения. Свежезамороженная плазма, прошедшая карантинизацию, маркируется дополнительной этикеткой "Плазма свежезамороженная карантинизованная 6 месяцев" с указанием номера марки, штрих-кода. Необходимость проведения данной процедуры обусловлено наличием серонегативного периода (диагностического «окна») у ряда инфекций, когда человек уже инфицирован и заразен, но существующие методики ИФА-диагностики не могут этого выявить из-за отсутствия в крови достаточного уровня антител - организм человека просто не успевает их выработать или антигены и антитела связаны между собой - взаимно подавляют друг друга. Для различных инфекций этот период вариабелен. Наибольшую опасность представляет вирусный гепатит С, для которого продолжительность серонегативного "окна" может варьировать от 54 до 193 дней. Вирусный гепатит В - 37-81 день, ВИЧ-инфекция - 16-38 дней.

Важно, чтобы через 6 месяцев после кроводачи донор цельной крови вновь обратился в ОПК или на СПК, причем желательно прийти именно в то конкретное учреждение, в котором он сдавал кровь в прошлый раз и сдать цельную кровь, один из компонентов крови или просто анализ на ВИЧ и возбудители вирусных гепатитов. И только если все повторные анализы донора через полгода после кроводачи снова покажут отсутствие инфекций, его компоненты крови будут переливать нуждающимся пациентам. Такое хранение крови до повторной проверки донора и называется карантинизацией.

 

КРОВЕЗАМЕНИТЕЛИ

Кровезаменители (гемокорректоры, плазмозаменители) - лечебные растворы, предназначенные для замещения или нормализации утраченных функций крови.

Классификация кровезаменителей по механизму лечебного действия (А.А. Багдасаров, П.С. Васильев, Д.М. Гроздов, O.K. Гаврилов, 1973):

I. Гемодинамические кровезаменители, производные:

· желатина;

· декстрана;

· гидроксиэтилкрахмала;

· полиэтиленгликоля

II. Дезинтоксикационные кровезаменители, производные:

· низкомолекулярного поливинилпирролидона;

· низкомолекулярного поливинилового спирта

III. Препараты для парентерального питания:

· белковые гидролизаты;

· смеси аминокислот;

· жировые эмульсии;

· углеводы и спирты

IV. Регуляторы водно-солевого и кислотно-основного состояния:

· солевые растворы;

· осмодиуретики

V. Кровезаменители с функцией переноса кислорода:

· растворы гемоглобина;

· эмульсии перфторуглеродов

VI. Инфузионные антигипоксанты:

· растворы фумарата;

· растворы сукцината

VII. Кровезаменители комплексного действия

 

Классификация кровезаменителей по химическому строению;

1.Коллоидные растворы:

· на основе декстрана: полиглюкин, реополиглюкин, реоглюман;

· на основе пищевого желатина: желатиноль, гелофузин;

· на основе гидроксиэтилированного крахмала: HAES-стерил, инфукол ГЭК 6% и 10% растворы…

2. Кристаллоидные (солевые) растворы:

· 0,9% раствор натрия хлорида;

· дисоль;

· трисоль;

· ацесоль;

· лактосол и др.

Кровь, плазма, альбумин не являются препаратами парентерального питания, так как гидролиз их белковых молекул в аминокислоты занимает более 24 суток. Период полураспада белков эритроцитов составляет 30—120 дней, плазменных белков— 10—60 дней.

Инфузионные антигипоксанты.

Инфузионные антигипоксанты (растворы фумарата: Мафусол, Полиоксифумарин и сукцината: Реамберин) - препараты на основе янтарной или яблочной кислот. Соли янтарной кислоты способствуют уменьшению постгипоксического метаболического ацидоза различного происхождения. Такой эффект связывают с увеличением синтеза АТФ, торможением гликолиза и усилением глюконеогенеза. Сукцинат положительно влияет на оксигенацию внутриклеточной среды, стабилизирует структуру и функцию митохондрий, является индуктором синтеза некоторых белков, влияет на ионный обмен в клетке.

Отечественный препарат Мафусол - гиперосмоляльный электролитный раствор. Фумарат натрия, входящий в его состав, предотвращает или устраняет постгипоксические нарушения энергетического обмена в клетке, способствует устранению ацидоза. Гиперосмоляльность препарата препятствует дегидратации тканей, вызывает постинфузионную гемодилюцию уменьшение вязкости крови, улучшает ее реологические свойства. Инфузии мафусола оказывают гемодинамическое, диуретическое действие.

ГЛАВА 2

ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ

По определению Всемирной Организации Здравоохранения (2012) - Переливание крови - это переливание собственно крови или ее компонентов от одного человека (донора) другому (реципиенту). Благодаря переливанию крови можно спасать жизнь людей, поэтому перед службами здравоохранения стоит задача обеспечения достаточного резервного запаса безопасной крови и его надлежащего использования.

 

Основные факты (Информационный бюллетень ВОЗ №279 Июнь 2012 г.)

Ежегодно собирается около 92 миллионов донаций (заборов) крови. Примерно половина этих донаций приходится на страны с высоким уровнем дохода, где проживает 15% населения мира.

Информацию о донациях крови предоставляют около 8000 центров крови из 159 стран. В странах с высоким уровнем дохода среднегодовое количество донаций крови из расчета на один центр крови составляет 30 000 по сравнению с 3700 в странах с низким уровнем дохода.

В 62 странах национальные запасы крови почти полностью основаны на добровольных безвозмездных донациях. Цель ВОЗ заключается в том, чтобы к 2020 году все страны получали все свои запасы крови от добровольных неоплачиваемых доноров.

39 стран были не в состоянии проверять все донации крови на одну или более из следующих передаваемых при переливании инфекций (ППИ): ВИЧ, гепатит B, гепатит С и сифилис.

 

Международная классификация групп крови

Принятая международная классификация обозначает каждую группу крови по наличию или отсутствию в ней двух агглютининов сывороток, которые названы альфа (а) и бета (b) и двух агглютиногенов эритроцитов, названных А и В.

1. Первая группа крови определяется тем, что в ее эритроцитах отсутствуют агглютиногены, а в сыворотке имеются оба агглютинина - альфа и бета. Таким образом, полная формула крови 1 группы: 0ab(I).

2. В крови II группы эритроциты имеют только один агглютиноген - А, а сыворотка содержит один агглютинин - бета. Таким образом, полная формула крови II группы: Ab(II).

3. III группа крови характеризуется тем, что эритроциты имеют только один агглютиноген - В, а ее сыворотка содержит только один агглютинин - альфа. Таким образом, полная формула крови III группы: Ва(III).

4. IV группа крови отличается тем, что ее эритроциты имеют оба агглютиногена - А и В, а ее сыворотка вообще не содержит агглютининов. Таким образом, полная формула крови IV группы: АВо(IV).

В настоящее время принято обозначать группы крови цифрой и по содержанию агглютиногенов эритроцитов: 0(I); А(II); В(III); AB(IV) (рис.2.1).

 

Рис.2.1. Макромолекулы – антигены (агглютиногены) А и В на поверхности эритроцитов

Содержание в крови человека агглютинов и агглютиногенов постоянно и в течение жизни не меняется. Может колебаться титр агглютининов в связи с состоянием организма, болезнями.

Агглютиногены эритроцитов появляются на 3-м месяце внутриутробной жизни плода, а агглютинины сывороток - в течение первого года жизни. Титр агглютининов сыворотки детей низкий, чем и объясняется тот факт, что дети переносят переливание крови (как одногруппной, так и универсальной) с меньшей реакцией. Дополнительными исследованиями установлено, что агглютиноген А имеет две разновидности: А1 и А2, причем А1 встречается в 95 % случаев, а A2 - в 5 % случаев. В настоящее время их отличие заключается лишь в разном времени агглютинации при определении групп крови. Следовательно, можно говорить о большем количестве групп крови, но в практической работе по переливанию крови пользуются делением людей на четыре группы. Распределение групп крови среди населения разных стран имеет некоторые различия, но в среднем считается, что людей 0(I) группы - 41 %, А(II) - 38 %, B(III) - 18 % и AB(IV) - 3 %.

Резус фактор.

У 85 % людей эритроциты содержат белок, особое антигенное вещество, названное резус-фактор. Эти люди считаются резус-положительными, а остальные 15 %, не имеющие в крови резус-фактора, резус-отрицательными.

Переливание резус-положительной крови резус-отрицательным больным приводит к выработке у них резус-антитела. При повторных переливаниях у них наступает тяжелая посттрансфузионная реакция, способная привести к смертельному исходу. Для предупреждения этого осложнения обязательно исследование крови на содержание резус-фактора.