Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь FAQ Написать работу КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Обязательна обработка рук спиртовымСодержание книги
Поиск на нашем сайте
антисептиком перед надеванием перчаток!
Периферическая кровь здорового взрослого человека:
Количество эритроцитов Муж.................................................................... 4,0-5,0 *10 12/л Жен..:................................................................ 3,7-4,7*10 12/л Гемоглобин Муж................................................................... 130-160 г/л Жен.................................................................... 120-140 г/л Цветовой показатель..................................... 0,86 - 1,05 Кол - в лейкоцитов 4,0 – 9,0*10 9/л Лейкоцитарная формула: Палочкоядерные............................................. 1-6% Сегментоядерные........................................... 47 - 77% Эозинофилы..................................................... 0-5% Базофилы........................................................ 0-1% Лимфоциты............................:...................... 19-37% Моноциты..................................................... 3-9% СОЭ Муж................................................................ 1-10 мм/ч Жен.................................................................. 2-15 мм/ч Тромбоциты.................................................. 180 - 320 *10 9/л Ретикулоциты............................................... 2 -12 % Время свёртывания крови: Венозная........................................................ 5 -10 мин. Капиллярная............................................... 30сек-2мин - 3-5 мин. Гематокрит................................................... 36-48%
Определение гемоглобина
2.3.1 Унифицированный метод определения количества гемоглобина на гемоглобинометре фотометрическом портативном МиниГЕМ Принцип метода: Основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива (р-р Драбкина). Под влиянием железисто - синеродистого калия гемоглобин окисляется до метгемоглобина (гемоглобина), который затем превращается при помощи калия в цианметгемоглобин (гемоглобинцианид). Реактивы: 1) Трансформирующий р-р Устройство: Гемоглобинометр МиниГЕМ 540 представляет собой специализированный фотометр, предназначенный для определения общего гемоглобина крови гемиглобинцианидным методом с фотометрированием на длине волны 540 нм. Диапазон измеряемой прибором оптической плотности составляет от 0 до 0,9. Б, что соответствует концентрации общего гемоглобина крови от 0 до 360 г/л. В приборе используется стандартная проб подготовка - 20 мкл крови, разведение 1:250. Суммарная погрешность определения гемоглобина (с учетом погрешностей дозаторов и погрешностей биохимического метода), полученная при сравнительных медицинских испытаниях, не превышает 2% (коэффициент вариации) во всем диапазоне измеряемых концентраций. При этом собственная погрешность гемоглобинометра как фотометра - не более 1%, а воспроизводимость, оцененная по коэффициенту вариации, - не более 0,25%. Два фактора обеспечивают это качество прибора: высокая воспризводимость характеристик раствора гемиглобинцианида, который сохраняет свои свойства при надлежащем хранении долгие годы, в т. ч. коэффициента пересчета оптической плотности в концентрацию гемоглобина (или фактора калибровки); конструкция гемоглобинометра МиниГЕМ 540 обеспечивает высокую надежность фотометрических параметров прибора. МиниГЕМ 540 снабжен функцией саморегулирования, он обладает многолетней стабильностью измерений. Другая отличительная особенность гемоглобинометра - полностью автоматизированная процедура фотометрирования. Для определения гемоглобина достаточно опустить кювету с фотометрической пробой в прибор, и через мгновенье на дисплее отобразится значение концентрации. Пересчет оптической плотности раствора в концентрацию производится автоматически. Перед измерением прибор не нужно включать, "прогревать", подстраивать или калибровать. Гемоглобинометр автоматически выключится при вынимании кюветы до следующего измерения. Третья особенность гемоглобинометра МиниГЕМ 540 - его портативность и низкое энергопотребление. Масса прибора без батарей не превышает 300 г. Питание от сети через адаптер или от встроенных батарей. Ресурс батарей - 1 000 000 измерений, или 4 года работы. Для контроля работоспособности гемоглобинометра используется контрольная стеклянная мера, паспортизованная для каждого прибора. Внутрилабораторный и внешний контроль качества может проводиться с помощью обычных контрольных материалов -контрольных растворов гемоглобина. Методика измерений: подготовить пробирки, поместив в каждую из них по 5 мл трансформирующего раствора (раствор Драбкина); во время взятия крови в каждую пробирку перенести по 20 мкл капиллярной крови(0,02 мл пипеткой Сали) и тщательно перемешать раствор; через 20 мин каждую пробирку перед измерением перемешать путем переворачивания пробирки вверх вниз (время лизирования) и провести серию измерений: Учет результата: перелить в оптическую кювету реакционную смесь из очередной пробирки; опустить оптическую кювету в фотометрическую ячейку прибора, при этом автоматически произойдет фотометрирование реакционной смеси, сопровождаемое звуковым сигналом, и на индикаторе появится число, соответствующее концентрации гемоглобина; записать результат измерения.
2.3.2 Унифицированный метод определения концентрации гемоглобина на мини -фотометре MF-1020 Введение: мини фотометры являются миниатюрными настольными приборами для измерения гемоглобина крови. Особенности прибора: цифровой индикатор, кювета открытого типа, относительная устойчивость к светорассеиванию, двухканальная оптическая схема. Прибор показывает концентрацию гемоглобина в г/л. Светопоглощение зеленого света с длиной волны(546 нм) раствором гемиглобинцианида напрямую переводятся в единицы измерения гемоглобина. Настройка и калибровка прибора осуществляется при помощи двух ручек - «ZERO» и «CAL». К прибору прилагается светофильтр (калибратор), назначение которого - убедиться в исправности оптических и электронных узлов и калибровки минифотометра. Масса прибора 1 кг 300 гр. Порядок измерения: 1.Включите прибор. 2.В течение 10 мин прогрейте. 3.Убедитесь в том, что прибор правильно откалиброван. 4.Установите кювету с холостой пробой реагента трансформирующего раствора. 5.С помощью ручки «ZERO» на цифровом индикаторе установите нулевое значение. 6.Приготовьте кровь, разбавив ее 1:251 с трансформирующим раствором и проведите измерение. Приготовление пробы: 1.Двадцать микрометров крови (0,02 мл) необходимо разбавить в 5,0 мл трансформирующего раствора р-ра Драбкина- 1:21 2.Хорошо перемешайте (встряхните). Прежде чем приступить к измерению, подождите 5-10 мин, особенно если реагент не содержит детергент. Калибровка минифотометра по стандартному р-ру гемиглобинцианида Вставьте кювету, содержащую трансформирующий реактив (р-р Драбкина) в кюветный отсек. При помощи ручки «ZERO» установите нулевое значение в цифровом табло. Вставьте кювету, содержащую стандартный р-р гемиглобинцианида, в кюветный отсек. При помощи ручки «CAL» установите данное значение стандартного калибровочного р-ра в цифровом табло (пример 150 г/л). Повторите процедуру калибровки от пункта 1 до пункта 4. Калибровка окончена, и Вы можете приступить к измерению
Калибровка минифотометра при помощи калибратора (по фактору) 1.Вставьте калибратор со светофильтром в кюветный отсек таким образом, чтобы была видна надпись «ZERO» с цифровым значением (например, 0.1.6) 2.При помощи ручки «ZERO» установите это значение (п.п.0.1.6) в цифровом табло. 3.Переверните калибратор и вставьте его в кюветный отсек таким образом, чтобы была видна надпись «CAL» с калибровочным значением (пример 159). 4.При помощи ручки «CAL» установите данное значение на цифровом табло. Повторите процедуру от пункта 1 до пункта 4. Калибровка окончена, и Вы можете приступать к измерениям. Требования к реактивам: 1.Любая модификация р-ра пригодна для применения. 2.Разбавление 10 мкл крови в 2,5 мл трансформирующего не пригодно для этой модели. 3.Можно приготавливать самим р-р-1 раз в месяц, хранится в посуде из темного стекла.
2.3.3 Унифицированный метод определения гемоглобина на фотоэлектроколориметре Принцип метода: Гемоглобин, взаимодействуя с ацетонциангидрином, в присутствии железосинеродистого калия K3[Fe(CN)6] образует гемиглобинцианид красного цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина в пробе крови. Реактивы: 1) трансформирующий раствор (0,5 мл ацетонциангидрина, 0,2 г железосинеродистого калия, 1 г гидрокарбоната натрия NaHCb растворяют в 1 л дистиллированной воды; реактив стоек, хранится в посуде из темного стекла); 2) стандартный раствор гемиглобинцианида (раствор, выпускаемый фирмой «Ренал», содержит 59,75 мг% гемиглобинцианида; раствор фирмы «Иммуна» —64,23 мг%. Это соответствует концентрации гемоглобина в крови 150 и 154 г/л при разведении ее в 251 раз). Ход определения. К 5мл трансформирующего раствора добавляют 0,02 мл (капилляр Сали) крови. При этом кровь разводится в 251 раз. Оставляют пробирки на 20 мин при комнатной температуре. Фотометрируют при зеленом светофильтре (длина волны 540 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм (1 см) против дистиллированной воды. Стандартный раствор фотометрируют при тех же условиях, что и опытную пробу. Расчет. Содержание гемоглобина определяют по калибровочному графику, который строится по стандартному раствору гемиглобинцианида или по формуле:
С=Е о/ Е к х 120 Где С- концентрация гемоглобина в опытной пробе, г/л Ео - оптическая плотность опытной, ед. опт. Плотность Ек- оптическая плотность калибровочной пробы, ед.плот. 120-концекнтрация гемоглобина кВ калибровочном растворе, г/л.
Приготовленные разведения фотометрируют. против дистиллированной воды («холостая» проба). Подсчет эритроцитов
|
||||
Последнее изменение этой страницы: 2016-08-10; просмотров: 257; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.144.4.54 (0.006 с.) |