Работа 2. Подсчет эритроцитов пробирочным методом

Ход работы. Берут кровь из вены или из капилляра пальца. К счетной камере притирают покровное стекло до появления ньютоновских колец и рассматривают сетку под микроскопом. В центрифужную пробирку набирают 4 мл 3% раствора NaCl. Пипеткой от гемометра Сали или другой берут 20 мм³ крови и, обтерев кончик ее ватой, быстро выдувают кровь в пробирку. Не вынимая пипетки из раствора, споласкивают ее раствором. После этого содержимое пробирки перемешивают. Затем разбавленной кровью заполняют подготовленную счетную камеру. Заполнив камеру, ставят ее под микроскоп и считают эритроциты в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, по диагонали (слева сверху, вправо вниз). Подсчет ведут в затемненном поле зрения (окуляр 7, объектив 40). Подсчитывают все эритроциты внутри квадрата и на верхней и левой его сторонах (правило Егорова).

Затем определяют количество эритроцитов в 1 мкл по формуле:

, где

X – искомое число эритроцитов;

Э – число эритроцитов в 5 больших квадратах;

200 – разведение крови;

4000 – учитывая, что объем камеры над одним маленьким квадратом равен 1/4000 мм³, для определения числа эритроцитов в 1 мкл умножают найденное число на 4000;

80 – число маленьких квадратов в 5 больших.

Эта формула после сокращения упрощается до Х=Э 10¹⁰/л.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите число эритроцитов в 1 мкл и 1 л исследуемой крови, а также определите пределы колебаний и средние показатели числа эритроцитов для юношей и девушек. В анализе сравните их с нормальными показателями.

Работа 3. Определение гемоглобина по Сали

Ход работы. В среднюю пробирку гемометра наливают 0,1 н р-р HCl до нижней метки. Пипеткой берут 20 мм³ крови и выдувают на дно пробирки, чтобы верхний слой остался неокрашенным. Не вынимая пипетки из кислоты, ополаскивают ее. Затем содержимое пробирки перемешивают, ударяя пальцем по дну пробирки, и оставляют на 5-10 минут. За это время образуется солянокислый гемин. В дальнейшем, добавляя по капле дистиллированной воды, доводят цвет содержимого пробирки до цвета жидкости в боковых пробирках гемометра. По нижнему мениску жидкости в средней пробирке отмечают содержание гемоглобина в г % или г/л.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах работы запишите количество гемоглобина в исследуемой крови. В анализе сравните этот показатель с нормой и объясните, почему разбавление производят дистиллированной водой.

Работа 4. Расчет цветового показателя

Ход работы. Цветовой показатель вычисляют по формуле:

Рекомендации к оформлению работы. Подставьте в формулу полученные Вами в предыдущих работах показатели содержания гемоглобина и числа эритроцитов и сравните полученный ЦП с нормой.

Работа 5. Определение гематокритного числа

Ход работы. Гематокритные капилляры – это стеклянные трубочки, разделенные на 100 равных частей. Их промывают цитратом и заполняют кровью. Затем центрифугируют в клинической центрифуге при 3000 об/мин в течение 30 мин, а в угловой – при 8000 об/мин в течение 15 мин. После центрифугирования в 1-ом случае форменные элементы оседают на дно, а во втором – отбрасываются от центра на периферию капилляров.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите длину столбика форменных элементов, в анализе сравните полученное число с нормой.

 

 

Занятие 2

ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ

Цель занятия. Изучить функции лейкоцитов, их образование и регуляцию лейкопоэза.

 

Примерные вопросы для самоподготовки

1. Лейкоциты, их количество и основные группы. Методы определения числа лейкоцитов.

2. Лейкоформула и ее значение.

3. Лейкоцитоз и его виды. Лейкопения.

4. Функции гранулоцитов, регуляция их образования.

5. Функции агранулоцитов, регуляция их продукции. Мононуклеарно-фагоцитарная система.

6. Механизмы защиты клеточного гомеостаза. Неспецифическая резистентность, ее механизмы.

7. Иммунитет, его механизмы. Иммунный ответ.

8. Иммунологический надзор и иммунологическая толерантность.

9. Регуляция иммунитета. Иммунная регуляторная система.

10. Возрастные особенности физиологии лейкоцитов.

ЛЕЙКОЦИТЫ

Лейкоциты, или белые кровяные тельца, – истинные клетки крови. Они содержат ядро и органеллы.

По своему строению их делят на две группы: гранулоциты и агранулоциты.

Гранулоциты – лейкоциты, в цитоплазме которых содержится зернистость. К гранулоцитам относятся: нейтрофилы, эозинофилы и базофилы. Гранулоциты вырабатываются в красном костном мозге.

Агранулоциты – лейкоциты, цитоплазма которых гомогенна и не содержит зернистости. К агранулоцитам относятся: моноциты, лимфоциты, плазматические клетки. Продукция, дифференцировка и функционирование лимфоцитов происходит в лимфоидных органах: костном мозге, эмбриональной печени, вилочковой железе, лимфатических узлах, селезенке и крови. Моноциты образуются в красном костном мозге.

В кровотоке имеются два пула лейкоцитов: 1 – клетки, свободно циркулирующие в крови; 2 – клетки, занимающие краевое положение в сосудах и не участвующие в циркуляции (пристеночные, или депонированные). Это подразделение является функциональным, поскольку между циркулирующими и краевыми клетками существуют динамическое равновесие и постоянный обмен. При изменении физиологического состояния организма взаимоотношения между лейкоцитами этих пул изменяются.

В 1 л крови здорового человека содержится 4-9 10⁹ лейкоцитов. Процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов называют лейкоцитарной формулой, или лейкограммой.

Лейкоформула (в %)

Число лейкоцитов в 1 л	Гранулоциты	Агранулоциты
Нейтрофилы	Эозино- филы	Базо- филы	Лимфоциты	Моноциты
М	ю	п	с
4-9 10^9		0-1	1-5	45-70	1-5	0,5-1	25-38	2-9

 

У здоровых людей она постоянна, а ее изменение – признак различных заболеваний.

Лейкоцитозы и лейкопении

Лейкоциты – одна из самых реактивных систем организма, поэтому их количество и качество изменяются при самых различных воздействиях. Общее увеличение числа лейкоцитов называют лейкоцитозом, а уменьшение – лейкопенией. Лейкоцитозы могут быть физиологическими и патологическими (истинными).

Физиологические лейкоцитозы развиваются у здоровых людей. Они имеют общие признаки:

1 – стабильность лейкоцитарной формулы;

2 – число лейкоцитов увеличивается не столь резко;

3 – имеют перераспределительный характер, обусловленный перераспределением лейкоцитов между сосудами разных органов и тканей, а также их раздепонированием;

4 – кратковременность;

5 – не изменяется функциональная активность лейкоцитов.