Работа 1. Подсчет лейкоцитов пробирочным способом

Ход работы. В центрифужную пробирку набирают 0,4 мл 5% р-ра уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим. Кислота разрушает оболочки форменных элементов, а краситель окрашивает ядра белых клеток. При этом эритроциты становятся невидимыми и не мешают подсчету лейкоцитов. Считают лейкоциты, как и эритроциты, согласно правилу Егорова. Пипеткой от гемометра Сали набирают 0,02 мл цельной крови и выдувают в пробирку (см. занятие 1, работа 1). Затем разбавленной кровью (разведение 1:20) заполняют камеру и ставят ее под микроскоп. Лейкоциты считают при малом увеличении (окуляр 15, объектив 20) в 100 больших квадратах, неразделенных на маленькие.

Количество лейкоцитов определяют по формуле:

, а после сокращения Х=Л 50/мкл=Л 5 10⁷/л

Л – число лейкоцитов в 100 больших квадратах.

Рекомендации к оформлению работы. В результате работы укажите полученное число лейкоцитов, а также пределы колебаний и средний показатель у студентов подгруппы. В анализе сравните полученные показатели с нормой.

Работа 2. Определение лейкоцитарной формулы

Ход работы. Мазок крови помещают под микроскоп и считают лейкоциты в иммерсионной системе. Необходимо просмотреть не менее 200 клеток. Мазок передвигают либо от верхнего края до нижнего, затем отодвигают на 2-3 поля зрения вдоль края, затем идут в обратном направлении; либо от края продвигают на 5-6 полей к середине мазка, затем столько же вбок, потом обратно к краю. Отодвигают на несколько полей вбок и опять повторяют продвижение, пока не будет сосчитано 50 клеток. Просматривают под микроскопом 4 таких участка по 4 углам мазка. Каждую клетку отмечают на 11-клавишном счетчике, на котором есть клавиши для всех видов лейкоцитов. Сосчитав в сумме 200 клеток, делят каждый показатель пополам и записывают лейкоформулу.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах запишите подсчитанную лейкоцитарную формулу, определите по ней индекс регенерации. Кроме того, учитывая количество лейкоцитов по работе 1, вычислите абсолютное число отдельных видов лейкоцитов. В анализе сравните эти показатели с нормой.

 

 

Занятие 3

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ГРУППЫ КРОВИ

 

Цель занятия. Рассмотреть основные механизмы поддержания гомеостаза, группы крови и правила ее переливания. Научиться определять групповую принадлежность крови в системах агглютиногенов АВО и резус.

 

Примерные вопросы для самоподготовки

1. Состав плазмы. Белки плазмы (альбумины, глобулины, фибриноген) и их значение. Минеральный состав плазмы.

2. Физико-химические свойства крови: вязкость, относительная плотность, осмотическое и онкотическое давление.

3. Осмотическая резистентность эритроцитов и ее определение.

4. Коллоидная стабильность плазмы и суспензионная устойчивость крови. СОЭ и ее определение.

5. Реакция крови и поддержание ее постоянства. Буферные системы крови.

6. Группы крови и реакции агглютинации. Значение переливания крови. Система агглютиногенов АВО и определение групп крови по этой системе. Классические правила переливания крови.

7. Резус-фактор и резус-несовместимость. Другие системы агглютиногенов. Группы крови и заболеваемость.

8. Современные правила переливания крови. Пересадка органов и тканей.

СОСТАВ ПЛАЗМЫ КРОВИ

Плазма – это жидкая часть крови. Она имеет желтоватый цвет, слегка опалесцирует. В ее состав входят вода (90-92%), минеральные соли (0,9%), белки, липиды, углеводы, продукты обмена, гормоны, витамины и растворенные в ней газы. Состав плазмы отличается лишь относительным постоянством и во многом зависит от приема пищи, воды и солей. Содержание некоторых компонентов плазмы (фосфатов, мочевины, мочевой кислоты, нейтрального жира) может варьировать в широких пределах, не вызывая расстройств функций организма. В то же время концентрация глюкозы, белков, всех катионов, хлора и гидрокарбонатов – это более жесткие гомеостатические константы. Значительные отклонения этих показателей от средних величин на длительное время приводят к тяжелейшим последствиям для организма, зачастую несовместимых с жизнью.Ионы К⁺, Na⁺, Cl^- обеспечивают нормальные функции всех клеток, а особенно возбудимых тканей. Ионы Са²⁺ источник для транспорта их внутрь клеток, они также необходимы для обеспечения физико-химических свойств плазменных белков, активности ферментов, для реализации свертывания крови, для сокращения мышечной ткани, для высвобождения медиаторов.

В состав минеральных компонентов плазмы входят и микроэлементы (более 15: медь, кобальт, марганец, цинк и другие). Они играют важную роль в процессах метаболизма клеток и обеспечении их функции, поскольку входят в состав ферментов, катализируют их действие, участвуют в гемопоэзе.

Необходимым для жизнедеятельности организма является содержание в плазме крови углеводов, из которых более 90% приходится на глюкозу. Благодаря высокой растворимости в воде, хорошей способности к мембранному транспорту и легкости использования в метаболических процессах, глюкоза для многих клеток организма является главным источником энергии. Ее содержание в артериальной крови выше, чем в венозной, так как она непрерывно используется клетками тканей. У здорового человека в венозной крови содержится 3,3-5,5 ммоль/л глюкозы. Уровень глюкозы в крови зависит от соотношения следующих факторов: всасывания из желудочно-кишечного тракта, поступления из депо (гликоген печени, мышц), новообразования из аминокислот и жирных кислот, утилизации тканями и депонирования в виде гликогена.

Важную роль в реализации питательной функции крови играют содержащиеся в плазме липиды и белки.

Белки основной компонент плазмы. На их долю приходится 6-8% от массы плазмы, общее содержание белков колеблется от 65 до 85г/л. Число белков плазмы составляет около 200, из них 70 выделены в чистом виде. Основными плазменными белками являются альбумины (4-5% или 38-50г/л), глобулины (до 3% или 20-30г/л), фибриноген (0,2-0,4% или 2-4 г/л). Таким образом, больше всего в плазме альбуминов и для оценки белкового состава плазмы в клинике обычно определяют альбумино-глобулиновый показатель, или белковый коэффициент, составляющий у здорового человека 1,3-2,2.

Альбумины. Их основная функция поддержание онкотического давления. Кроме того, они служат резервом аминокислот для белкового синтеза и выполняют тем самым питательную функцию. Благодаря большой поверхности и выраженному отрицательному заряду обеспечивают стабильность коллоидного раствора и суспензионные свойства крови, адсорбируют и транспортируют эндогенные и экзогенные вещества. Так, они переносят неэстерифицированные жирные кислоты, билирубин, стероидные гормоны, соли желчных кислот, а также лекарственные препараты, частично связывают тироксин и значительную часть ионов кальция.

Альфа-глобулины входят в состав гликопротеинов. К ним относятся ингибиторы протеолитических ферментов, транспортные белки для гормонов, витаминов и микроэлементов. Ими являются: эритропоэтины, плазминоген (профермент плазмина, расщепляющего фибрин), протромбин (фактор свертывания крови) и т. д.

Бета-глобулины самая богатая липидами фракция белков. Находясь в составе липопротеинов, эти белки содержат 3/4 всех липидов плазмы крови, в том числе фосфолипиды, холестерин и сфингомиелины. К ним относятся: белок трансферрин (обеспечивающий транспорт железа), большая часть белков системы комплемента, многие факторы свертывания крови.

Гамма-глобулины – это иммуноглобулины (JgA, JgQ, JgM, JgD, JgE) – их содержание свидетельствует о состоянии гуморального звена иммунитета.

Фибриноген плазменный фактор свертывания крови. При снижении его содержания кровь долго не свертывается.

В общем функции белков плазмы крови многообразны: 1) обусловливают онкотическое давление, которое определяет обмен воды между кровью и тканями; 2) регулируют рН крови за счет буферных свойств; 3) влияют на вязкость плазмы, имеющую важное значение в поддержании артериального давления; 4) обеспечивают гуморальный иммунитет; 5) участвуют в свертывании крови; 6) способствуют сохранению жидкого состояния крови, так как входят в состав естественных антикоагулянтов; 7) влияют на скорость оседания эритроцитов; 8) служат переносчиками ряда гормонов, липидов, минеральных веществ, холестерина; 9) представляют резерв для построения тканевых белков; 10) осуществляют креаторные связи, т.е. передачу информации, влияющей на генетический аппарат клеток и обеспечивающей процессы роста, развития, диффренцировки и поддержания структуры организма (эритропоэтины, фактор роста нервов и т.д.).