Для лекарственных средств в форме аэрозолей

Для аэрозолей на основе спиртов и твердых ве- ществ 3,0 г образца (после испарения пропеллента) переносят в 30 мл буферного раствора, перемешивают и проводят количественное и качественное определе- ние микроорганизмов. Не менее 1,0 г образца исполь- зуют для количественного определения энтеробакте- рий, устойчивых к желчи.

Для аэрозолей на основе масел 3,0 г образца (по- сле испарения пропеллента) переносят в 30 мл буфер- ного раствора с твином-80 в количестве не более 5% и стеклянные бусы. Смесь нагревают на водяной бане до температуры не выше 40°С и энергично встряхи- вают до получения гомогенной эмульсии, которую используют для количественного и качественного определения микроорганизмов. Не менее 1,0 г образца используют для количественного определения энтеро- бактерий, устойчивых к желчи.

 

Для трансдермальных пластырей

При отборе трансдермальных пластырей исполь- зуют образец, состоящий из 10 единиц. С каждого из 10 пластырей снимают защитную пленку, пользу- ясь стерильными инструментами. При необходимости пластырь разрезают стерильными ножницами на бо- лее мелкие фрагменты, которые переносят в колбу вме- стимостью 1000 мл, содержащую 500 мл стерильного буферного раствора и стеклянные бусы. Колбу нагре- вают на водяной бане до температуры не выше 40°С, энергично встряхивают в течение 30 мин. Использу- ют 50 мл полученного смыва для количественного определения микроорганизмов методом мембранной фильтрации и определения на отсутствие P. aeruginosa и S. aureus.

Если известно, что пластырь обладает антими- кробным действием, в разбавитель добавляют подхо- дящий инактиватор (твин-80 и (или) лецитин).

В случае, если смыв с трансдермальных пласты- рей нельзя использовать для определения методом мембранной фильтрации, применяют метод прямого посева на питательные среды.

Для лекарственных растительных средств (ЛРС)

К ЛРС относятся лекарственные препараты, в том числе сборы, расфасованные в пачки, пакеты, брикеты и пр.

От каждой контролируемой серии лекарственно- го препарата независимо от ее объема отбирают ми- нимум 5 невскрытых пачек, пакетов, брикетов. Перед испытанием пачки вскрывают с помощью стерильных инструментов, отбирают из них пробу в равных коли- чествах, перемешивают и переносят в стерильную ем- кость. Масса пробы должна составлять не менее 50,0 г. Для количественного определения аэробных ми- кроорганизмов и грибов образец в количестве 10,0 г (плоды, кора, корни и корневища, почки и др.) или 2,0 г (трава, листья, цветки и другие с большим коэф- фициентом водопоглощения), переносят в стерильную колбу. При объеме образца 10,0 г в колбу помещают 100 мл стерильного раствора натрия хлорида 0,9%. Колбу с исследуемым образцом встряхивают на качал- ке или аппарате для встряхивания в течение не менее 15 мин. Полученный смыв считают разведением 1:10. При объеме образца 2,0 г в колбу добавляют 200 мл стерильного раствора натрия хлорида 0,9%. Получен-

ный смыв считают разведением 1:100.

Если образец плохо смачивается, в колбу добавля- ют поверхностно-активное вещество — стерильный твин-80 в количестве 0,1% от объема раствора.

Из полученных смывов ЛРС, соответствующих разведениям 1:10 или 1:100, готовят последующие десятикратные разведения в том же разбавителе, ко- торые используют для количественного определения аэробных бактерий и грибов, а также для испытания на отсутствие E. сoli, Salmonella и энтеробактерий, устойчивых к желчи.

 

23.8 Методы количественного определения аэробных микроорганизмов

В зависимости от природы лекарственного сред- ства и его физико-химических свойств используют один из вариантов чашечного агарового метода (глу- бинный, двухслойный, поверхностный, модифициро- ванный глубинный), метод мембранной фильтрации или пробирочный метод наиболее вероятных чисел (НВЧ).

Чашечные агаровые методы

Для культивирования микроорганизмов использу- ют агаризованные питательные среды в соответствии с рецептами Государственной фармакопеи XII изд.: соево-казеиновый агар или среду №1, сухую, для кон- троля микробной загрязненности — для выращивания бактерий, агар Сабуро с глюкозой или среду №2, су-

хую, для контроля микробной загрязненности — для выращивания дрожжевых и плесневых грибов.

Для каждого разведения образца используют не менее двух чашек Петри с определенной средой.

 

Глубинный метод

В стерильную чашку Петри диаметром 90 мм вно- сят 1 мл испытуемого образца, приготовленного для анализа. Добавляют 15-20 мл расплавленной и охлаж- денной до 42,5±2,5°С агаризованной питательной сре- ды и быстро перемешивают вращательными движени- ями. При большем диаметре чашек Петри количество среды соответственно увеличивают до 20-25 мл. По- сле застывания агара чашки переворачивают и инку- бируют посевы.

 

Двухслойный метод

Расплавленные агаризованные питательные среды вносят в количестве 15-20 мл в каждую стерильную чашку Петри диаметром 90 мм и оставляют до засты- вания. При большем диаметре чашек Петри количе- ство среды соответственно увеличивают. Поверхность агара в чашках подсушивают.

В пробирку с 4 мл соответствующей расплавлен- ной и охлажденной до 42,5±2,5°С питательной среды вносят 1 мл образца, приготовленного для анализа, быстро перемешивают содержимое пробирки. Затем содержимое пробирки выливают на поверхность за- стывшего и подсушенного агара в чашке Петри, равномерно распределяя верхний слой среды враща- тельными движениями. После застывания чашки пе- реворачивают и помещают в термостат для инкубации.

 

Поверхностный метод

Расплавленные и охлажденные до 42,5±2,5°С питательные среды вносят в  количестве 15-20 мл в каждую стерильную чашку Петри диаметром 90 мм и оставляют до застывания. Поверхность агара в чаш- ках подсушивают.

Образец, приготовленный для анализа, наносят на агар в количестве 0,1 мл и равномерно распределя- ют шпателем по поверхности среды.

Чашки переворачивают и помещают в термостат для инкубации.