Метод наиболее вероятных чисел (НВЧ)

Метод НВЧ используют при испытании ЛС с низ- ким уровнем микробной контаминации, а также в тех случаях, когда нельзя применить другие методы. Ме- тод НВЧ менее чувствителен и точен по сравнению с чашечным агаровым методом или методом мембран- ной фильтрации. Метод используют только для опре- деления общего числа бактерий, так как результаты, полученные для определения общего числа грибов, особенно плесневых, считают недостоверными.

При выполнении испытания исследуемый обра- зец готовят в виде раствора, суспензии или эмульсии в разведениях 1:10, 1:100, 1:1000, используя подхо- дящий растворитель. Жидкую питательную среду разливают в 12 стерильных пробирок по 9 мл в каж- дую. Пробирки ставят в штатив в 4 ряда по 3 про- бирки.

В первый ряд пробирок вносят по 1 мл испыту- емого образца в разведении 1:10, во второй ряд — по 1 мл в разведении 1:100, в третий ряд — по 1 мл в разведении 1:1000. В пробирки четвертого ряда вно- сят по 1 мл разбавителя, который используют для рас- творения, суспендирования или эмульгирования об- разца. Посевы инкубируют в стандартных условиях в течение не более 3 сут.

После завершения испытания о тмечают число пробирок в первом, втором и третьем рядах, в которых визуально наблюдают рост микроорганизмов. Среда  в пробирках четвертого ряда (контроль разбавителя) должна оставаться стерильной. Полученное трехзнач- ное число соответствует наиболее вероятному коли-

честву жизнеспособных микроорганизмов в 1,0 г или в 1,0 мл лекарственного средства (Таблица 51).

 

Наиболее вероятное число микроорганизмов (НВЧ)

Таблица 51.

Количество пробирок в каждом ряду, где наблюдают рост

зи с природой исследуемого препарата (помутнение среды, изменение ее цвета и т. п.), делают пересев на со- ответствующую жидкую или агаризованную среду, что- бы убедиться в наличии роста микроорганизмов.

 

Определение отдельных видов

Количество препарата в пробирке

                        в г (мл)                        

НВЧмикроорганизмов

в 1 г (мл) препарата

Микроорганизмов, недопустимых

И ограниченных количественно

    0.1            0.01          0.001                                          

0	0	0	>3
0	0	1	3
0	1	0	3
0	1	1	6.1
0	2	0	6.2
0	3	0	9.4
1	0	0	3.6
1	0	1	7.2
1	0	2	11
1	1	0	7.4
1	1	1	11
1	2	0	11
1	2	1	15
1	3	0	16
2	0	0	9.2
2	0	1	14
2	0	2	20
2	1	0	15
2	1	1	20
2	1	2	27
2	2	0	21
2	2	1	28
2	2	2	35
2	3	0	29
2	3	1	36
3	0	0	23
3	0	1	38
3	0	2	64
3	1	0	43
3	1	1	75
3	1	2	120
3	1	3	160
3	2	0	93
3	2	1	150
3	2	2	210
3	2	3	290
3	3	0	240
3	3	1	460
3	3	2	1100

     3                 3                3                      >1100        

 

Пример. В первом ряду рост микроорганизмов на- блюдается в трех пробирках, во втором ряду — в двух пробирках, в третьем ряду — в одной пробирке. Полу- ченное число «321» по таблице 5 соответствует цифре

«150».

Следовательно, наиболее вероятное число бакте- рий в 1 г или 1 мл исследуемого образца — 150. Если учет результатов не может быть определен точно в свя-

В лекарственных средствах

Испытание включает использование селектив- ных и диагностических питательных сред, описанных в ГФ XII изд [43, 44].