Алгоритм лабораторных исследований на туберкулез

 

Алгоритм лабораторной диагностики ТБ представлен на рис. 3.2.

Таблица 3.1. Сбор материала [7] для диагностики туберкулеза, его хранение и транспортировка

Исследуемый материал

Сбор материала

Посуда

Количество

Транспортировка Время от взятия материала

Хранение (при необходимости)

 

Мокрота	Пациент прополаскивает рот и откашливает мокроту 3-5 раз	Стерильный контейнер для мокроты	3-5 мл	1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 1-3 дня
Индуцированная мокрота	Пациент ингалирует стерильный гипертонический раствор соли с использованием ультразвукового ингалятора	Стерильный контейнер для мокроты	3-5 мл	1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 1-2 дня
Промывные воды бронхов (при бронхоскопии)	Процедуру проводит врач во время бронхоскопии, в бронхи вводят 5-10 мл теплого физраствора, материал собирают в стерильную посуду	Стерильный контейнер для мокроты	5-10 мл	1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 1-2 дня
Промывные воды желудка (для детей)	До процедуры нельзя принимать пищу в течение 12 ч. Пациенту дают выпить 200 мл дистиллированной воды, после чего в желудок вводят зонд и отсасывают содержимое желудка в стерильную пробирку. Детям после сна вводят назогастральный зонд и отсасывают 2-5 мл содержимого желудка, если содержимое желудка не удается получить, вводят 5-10 мл физраствора, который потом отсасывают, к образцу добавляют 8% содовый раствор в соотношении 1:1.	Стерильная пробирка	Весь материал	30 мин, если не проведена нейтрализация кислотности желудочного сока	Немедленная отсылка в лабораторию
Моча	Пациент подмывается с мылом, нельзя использовать дезинфицирующие средства	Стерильный контейнер	50-100 мл	1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 24 ч.
Плевральные и иные пунктаты	Проводят плевральную или иную пункцию	Стерильная пробирка	5-10 мл	Сразу после сбора	Холодильник +2-+8^оС 24 ч.
Ликвор	Люмбальная пункция	Стерильная пробирка	> 5 мл	Сразу после сбора, в течение 15 мин	Холодильник +2-+8^оС 1-2 ч.
Кал	Деревянной или стеклянной палочкой берут материал из кала или из прямой кишки	Стерильная пробирка	1 г	1-2 ч	Холодильник +2-+8^оС 24 ч.
Кровь	Берут кровь из вены (место забора крови дезинфицируют 70% спиртом)	Стерильная пробирка с гепарином или пробирка со специальной средой	3 мл	1-2 ч.	Гемокультиватор +37^оС 24 ч.
Гнойное отделяемое, менструальная кровь	Берут материал стерильным шприцем или тампоном и помещают в стерильную пробирку	Стерильная пробирка	1-5 мл	1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 24 ч.
Операционный и биопсийный материал	Для исследования берут кусочек ткани из стенки патологического образования	Стерильная посуда		1-2 ч.	Холодильник +2-+8^оС 1-2 дня

 

Подозрение на наличие МЛУ-ТБ служит основанием для направления в лабораторию не менее двух образцов мокроты для бактериоскопического (мазок) и культурального (посев) исследований на наличие КУБ. Одна из двух полученных культур в последующем может использоваться для тестирования лекарственной чувствительности. Этот так называемый непрямой метод тестирования основан на исследовании культуры МБТ, выделенной из обработанного образца мокроты.

Таблица 3.2. Лабораторная диагностика ТБ

Вид исследования

Метод, срок исследования

Исследуемый материал, кол-во

Результат

Цель

Ограничения метода

 

Микроскопия	Циль-Нильсен, 1 день, cito 1 час	Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минималь-ное кол-во 3 мл	КУБ+ КУБ-	Выявление и диагностика ТБ	Отсутствие видоспецифичности Нельзя отличить живые КУБ от неживых Нельзя определить лекарственную чувствительность
Флуоресцентный, 1 день, cito 1 час	Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минималь-ное кол-во 3 мл	КУБ+ КУБ-
Бактериологическое исследование	На плотных средах Положительный результат для КУБ+ 28 дней, для КУБ- – 30 дней, отрицательный результат выдается после 8 недель	Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минимальное кол-во 3 мл	МБТ+ МБТ- Количественное определение роста микобактерий	Подтверждение диагноза ТБ	Возможна контаминация культуры (допустимый уровень 2-5%) Необходимо повторять посев
В жидких средах (автоматизированные системы) Положительный результат для КУБ+ 7 дней, для КУБ- – 18 дней, отрицательный результат выдается через 42 дня	Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала, минимальное кол-во 3 мл	МБТ+ МБТ-
Определение ДНК МБТ и мутаций, ассоциированных с резистентностью к R	Метод амплификации и детекции специфических последовательностей нуклеиновых кислот, проведение ПЦР в реальном времени, 1-2 дня, cito 3ч. от взятия образца	Мокрота, индуцированная мокрота и др. образцы патологического материала	Выявление ДНК МБТ и мутаций в rpoB гене	Диагностика ТБ и определение резистентности к рифампицину	Нельзя отличить живые МБТ от неживых
ТЛЧ	ТЛЧ на плотных средах, результат через 28 дней после получения культуры	Культура МБТ	Определение чувствительности МБТ к ПТЛС	Определение режима лечения Определяется чувствительность к ПТЛС 1 и 2 рядов	Низкая достоверность к PAS, Eto/Pto, Cs
ТЛЧ на жидких средах в автоматизированных системах инкубации, результат через 14 дней	Культура МБТ	Определение чувствительности МБТ к ПТЛС	Определение режима лечения Определяется чувствительность к ПТЛС 1 и 2 рядов	Низкая достоверность к PAS, Eto/Pto, Cs, Z
Определение мутаций, ассоци-ированных с лекарственной устойчивостью МБТ	Амплификация и обратная гибридизация на стрипе LPA результат через 1-2 дня	Положительные образцы мокроты, индуцированной мокроты, культура МБТ	Определение чувствительности МБТ к ПТЛС (выявление мутаций в генах inhA и katG (H), rpoB (R), gyrA (Fq) rrs (АГ/CР), embB (E))	Ускоренная детекция лекарственной устойчивости	Проводится не ко всем ПТЛС
Генотипирование	Сполиготипирование, полиморфизм длины рестрикционных фрагментов (ПДРФ), MIRU-VNTR от 4 до 60 дней от момента получения культуры	Культура МБТ	Установление принадлежности штаммов к определенным семействам	Эпидемиологические связи и контаминация лабораторных образцов	-

 

 

 

Рис. 3.1. Алгоритм лабораторных исследований на ТБ

 

Использование быстрых методов для ранней диагностики МЛУ-ТБ крайне необходимо в первую очередь для всех начинающих повторный курс лечения.