Некоторые рецепторы (маркеры) ИКК

Популяция ИКК	Маркеры
Номер в систе­ме CD	Функции
Т-лимфоциты	CD2	Адгезия (лиганд к CD58); участие в активации
CD3	Часть рецепторного ком­плекса TCR - CD3
СD 5	Костимуляция Т-лимфоцитов. Лиганд CD72
СD6	Адгезия, активация Т-Л
СD7	FcμR. Передача сигнала
CD4/CD8	Корецептор Т-хелперов Лиганд МНС-II
В-лимфоциты	CDI9	Часть корецептора В-Л
CD 20	Са^2+- канал. Регуляция актива­ции В-Л
CD21	Часть корецептора В-Л CR2; лиганд C3d, EBV
CD 22	Адгезия В-Л на Т-Л и моноцитах
CD 72	Лиганд CD5. Учас­тие в активации В-Л
NK-лимфоциты	CD2	Адгезия (лиганд — CD58); участие в активации
CD7	FcμR. Передача сигнала
CD 11b	α-Субъединицы β2-интегринов; b-ICAM-l,iC3b, с- фибриногена
CD11c
CD56	Медиатор цитотоксичности. Адгезия. Изоформа N-CAM
Активированные лимфоциты и моноциты	CD 25	α-Цепь рецептора ИЛ-2
CD 30	Костимуляция?
CD54	Адгезия; лиганд β2-интегринов
CD 60	NeuAc-NeuAcGal эпи-топ гликопротеинов
CD 69	Передача сигнала. Ранний маркер активации
HLA-DR, DQ, DP
CD 71	Трансферриновый рецептор пролиферирующих клеток

Иммунологические реакции, позволяющие проводить имунофенотипирование, различны по степени экономических затрат, трудоемкости, необходимости применения высокотехнологичного оборудования. Выбор той или иной реакции (метода) чаще всего основан навзаимоотношениях важности получаемой диагностической информации и экономических затрат.

Но любая реакция иммунофенотипирования всегда основана на взаимодействии клеточный ре­цептор-АТ к нему. А для выявления этого взаимодействия используют различные приемы: реакцию розеткообразования, комплемензависимый цитолиз и реакцию иммунофлуоресценции.

 

Реакция розеткообразования

Самая первая реакция иммунофенотипирования это реакция розеткообразования. В настоящее время комплекс реакций розеткообразования выводится из иммунодиагностической практики. К её положительным чертам относятся простота, отсутствие необходимости в дорогостоящем оборудовании и невысокая стоимость. Однако розеткообразование в качестве процедуры иммунофенотипирования позволяет определить лишь незначительное количество мембранных рецепторов, специфичность, воспроизводимость полученных результатов невысоки, а следовательно и диагностическая информация не отличается значимостью. В то же время реакции розеткообразования сохраняют свое значение при проведении экспериментальных исследований в области иммунологии в качестве процедуры сепарации ИКК. Так, если суспензию Е-РОК наслоить на градиент плотности фиколл-верографин и подвергнуть центрифугированию, то на дно пробирки седиментируют лишь Т-лимфоциты, экспрессирующие маркер CD2. Другие популяции лимфоцитов будут задерживаться в интерфазе. Соответственно, такой подход позволяет провести выделение клеток в виде гомогенной популяции. Кроме этого, возможности реакций розеткобразования могут быть расширены. Дело в том, что истинное розеткообразование характерно лишь для двух типов RBC и, соответственно, позволяет выявить только два рецептора. Но RBC можно использовать в качестве пассивного носителя АТ к рецепторам, помогающего визуализации взаимодействия рецептор-АТ к нему. Так были разработаны реакции розеткообразования для выявления рецептора к комплементу на В-лимфоцитах (ЕАС-РОК: Е-эритроцит, А-антитело к эритроциту, С- комплемент), рецептора к Fc-фрагменту IgG (Fсg-РОК) и Fc-фрагменту IgM (Fсm-РОК), характерных для Т-хелперов, Т-цитотоксических лимфоцитов и В-лимфоцитов. Эта же реакция оказалась полезной для определения числа В-лимфоцитов, несущих Ig разной классовой принадлежности. Во всех этих реакциях требуется подготовка RBC. Она заключается в сенсибилизации RBC антисывороткой (в субагглютинирующих разведениях!), см. ниже.