Важнейшие a-аминокислоты, пептиды

Лабораторная работа № 11

Химические методы обнаружения аминокислот и белков

Опыт №1.Реакция обнаружения аминокислот и белков

Реакция используется для обнаружения a-аминокислот и белков, в криминалистике - обнаружение невидимых пятен белковой природы.

Методика эксперимента: В пробирки поместить по 3-4 капли 1% раствора глицина, a-аланина и по 2 капли 0,1% раствора нингидрина. Содержимое пробирок нагреть.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

Наблюдения, отметьте цвет продукта: ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Выводы: _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Опыт № 2. Амфотерные свойства аминокислот

Методика эксперимента. В 2 пробирки поместить по 5 капель 1% раствора a-аланина и добавить по каплям в одну из них 0,1% раствор хлороводородной кислоты, подкрашенной индикатором конго в синий цвет, до появления розово-красной окраски, а в другую - 0,1% раствор гидроксида натрия, подкрашенный фенолфталеином, до исчезновения окраски.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССОВ:

Наблюдения:

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Опыт №3 Реакция аминокислот с формальдегидом

Реакция под названием "формольное титрование" используется для количественного определения аминокислот. Реакция протекает по амино-группе, поэтому образуется продукт кислой природы, количество которого можно оценить, если исходно добавить известное количества щелочи. Щелочь в присутствии фенолфталеина окрашивается в малиновый цвет. В момент нейтрализации щелочи продуктом реакции малиновая окраска исчезает.

Реакция широко используется для количественного определения аминокислот в пищевых продуктах, БАД, содержащих аминокислоты, белковые гидролизаты (с целью установления возможной фальсификации состава)..

Методика эксперимента. В пробирку поместить 5 капель 1% раствора глицина и добавить 1 каплю индикатора метилового красного. Раствор окрашивается в желтый цвет (нейтральная среда). К полученной смеси добавить равный объем формалина. Отметить изменение окраски индикатора.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

внутренняя соль метиленимин глицина

(нейтральная среда)

Наблюдения:

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Выводы:

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Опыт №4. Ксантопротеиновая реакция

Реакцию используют для обнаружения ароматических и гетероциклических аминокислот (например, тирозина, фенилаланина, триптофана, гистидина) и содержащих их белков.

Методика эксперимента. В одну пробирку поместить 5 капель 1% раствора тирозина, в другую - 10 капель раствора яичного белка. В каждую из пробирок добавить по 3 капли концентрированной азотной кислоты. Смесь нагреть до появления желтой окраски. Пробирки охладить и осторожно добавить по 1-2 капли 10% раствора гидроксида натрия до появления ярко-оранжевой окраски.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

хиноидная структура

Наблюдения:

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Выводы:

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Опыт №5 Биуретовая реакция на пептидную связь

Реакция используется для обнаружения индивидуальных аминокислот и пептидных связей в пептидах, белках, представляющих собой продукт поликонденсации a-аминокислот.

Методика эксперимента. В две пробирки поместить по 3-5 капель 1% раствора сульфата меди, добавить по каплям 10% раствор гидроксида натрия до образования осадка. Далее в одну из пробирок приливают 1% раствор глицина, а в другую - раствор яичного белка.

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

Наблюдения:

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Выводы: _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Опыт №6. Цветная реакция обнаружения серусодержащих аминокислот (реакция Фоля)

Реакцию Фоля используют для обнаружения биоорганических соединений, содержащих атомы серы. Этим методом может быть доказано присутствие атомов серы в таких аминокислотах как: цистеине, метионине, цистине, а также унитиоле, липоевой кислоте и др.

цистеин метионин цистин

Методика эксперимента. В пробирку поместить 5 капель 1% раствора цистеина. Добавить 2-3 капли 10% раствора гидроксида натрия. Нагреть смесь до кипения, а затем добавить 2 капли 10% раствора ацетата свинца (II).

ХИМИЗМ ПРОЦЕССА:

Наблюдения:

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Выводы: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Вопросы к защите работы.

1. Какое практическое значение имеет реакция a-аминокислот с нингидрином?

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

2. Напишите уравнение реакции метионина с формальдегидом.

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

3. Напишите уравнение реакции метионина со щелочью с последующим добавлением ацетата свинца.

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

4. Напишите уравнение реакции взаимодействия фенилаланина с азотной кислотой.

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

5. Приведите химизм взаимодействия a-аланина с хлороводородной кислотой и гидроксидом натрия.

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

6. Каковы внешние признаки биуретовой реакции?

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

7. Какие a-аминокислоты в составе белка могут быть обнаружены с помощью ксантопротеиновой реакции?

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Занятие 1.3.5.

Углеводы

Лабораторная работа № 12