Мікробіологічна діагностика, специфічна профілактика і терапія правця

Первинна бактеріоскопія. Із патологічного або секційного матеріалів виготовляють декілька мазків та препаратів-відбитків, забарвлюють за Грамом, Ожешко (для виявлення спор) і мікроскопують під імерсійною системою. Бактеріологічне і біологічне дослідженя. Отриманий в лабораторії матеріал розтирають у стерильних ступках із піском, добавляючи середовище для контролю стерильності до отримання 10 % суспензії. Рідку фазу матеріалу розділяють на дві рівні частини, одну з яких прогрівають при 80 0С протягом 20 хв. Це приводить до загибелі вегетативних клітин бактерій і значно підвищує шанси на виділення C. tetani. Далі грітий і негрітий матеріал досліджують паралельно. Для накопичення анаеробних клостридій обидві порції висівають у дві пробірки з середовищем Кітта-Тароцці (або тіогліколевим бульйоном). Одночасно для отримання ізольованих колоній роблять посів на чашку з анаеробним кров'яним агаром. Посіви інкубують в анаеробних умовах при температурі 37 0С протягом 48-72 год. Колонії C. tetani на кров'яному агарі плоскі, напівпрозорі з нерівними краями, нерідко у вигляді переплетенних ниток, що нагадують павучків. Навколо колоній виникає зона гемолізу. Якщо колонії відсутні, роблять висів із середовищ накопичення на кров'яний агар. При посіві уколом у високий стовпчик цукрового агару колонії C. tetani нагадують хмаринки або жмуточки вати. Виділену чисту культуру ідентифікують за морфологічними, культуральними ознаками і обов'язково шляхом визначення токсигенності, яка є вирішальним тестом при діагностиці правця. Для виявлення токсичної дії культури або первинного досліджуваного матеріалу ставлять біологічну пробу нейтралізації токсину правцевою сироваткою на тваринах. Специфічна профілактика: Активну імунізацію роблять правцевим анатоксином; для специфічної профілактики правця у дітей використовують коклюшно-дифтерійно-правцеву вакцину, асоційований дифтерійно-правцевий анатоксин, хімічну сорбовану тифозно-паратифозно-правцеву вакцину. Щеплення роблять усім дітям з 3 місяців життя, сільським жителям певних районів (за епідеміологічними показаннями), будівельникам, лісозаготівникам, робітникам водопровідних і очисних споруд, підприємств для переробки торфу, працівникам залізничного транспорту. Надалі через 1,5—2 роки, 6 і 11 років проводять ревакцинацію.

Збудник ботулізму, біологічні властивості, класифікація.

Збудник ботулізму – Clostridium botulini. Біологічні властивості - C.botulinum коротка Грам-позитивна паличка, утворює овальну субтермінально розташовану спору («тенісна ракетка») Оптимальна температура культивування +25-30⁰С Утворює R-форму колоній, які нагадують собою крапельки роси, На середовищах з кров’ю колонії у вигляді «відбитків пальців», оточені зонами гемолізу. На середовищі Кітта-Тароцці збудник утворює помутніння з подальшим випаданням в осад. Серотипи A,B, F мають більш виражені протеолітичні властивості; Серотипи C,D.E виявляють цукролітичні властивості, протеолітичні не виражені. Класифікація ботулізму В клінічній картині виділяють легкі, середньотяжкі і тяжкі форми хвороби. При легкому перебігу у пацієнтів паралітичний синдром обмежується ураженням окорухових м’язів: при середньотяжкому поширюється на глоссофарингеальную мускулатуру. Тяжкий перебіг характеризується дихальною недостатністю і тяжкими бульбарними порушеннями

Епідеміологія і патогенез ботулізму, клінічні прояви.

Резервуар інфекції - Травоїдні тварини, які виділяють Cl. botulinum з випорожненнями. У подальшому з Cl. botulinum утворюються спори, а при попаданні їх на харчові продукти (обов'язково в анаеробних умовах) виділяється токсин. Джерелом хвороби частіше є гриби (мариновані, іноді солоні), в'ялена риба, рідше - м'ясо, ковбаси, шинка домашнього консервування (анаеробна середу). Хворий на ботулізм не заразний.

Патогенез ботулізму
Ботулотоксин не руйнується ферментами травного тракту. Його особливістю є всмоктуваність через слизову оболонку шлунка та кишечнику, після чого останній розноситься струмом крові по всьому організму. Токсин вибірково вражає холінергічні відділи нервової системи. Характерні для ботулізму паралічі різних груп м'язів пов'язують з припиненням виділення ацетилхоліну в нервових синапсах, в той час як холінестеразная активність істотно не порушується. Паралічі м'язів гортані, глотки та дихальних м'язів призводять до порушення ковтання і дихання, що сприяє виникненню аспіраційних пневмоній, зумовлених вторинної мікрофлорою. Зазвичай хворі гинуть від паралічу дихання або від вторинної інфекції дихальної системи.

57.Мікробіологічна діагностика, специфічна профілактика і терапія ботулізму.

Лабораторна діагностика ботулізму направлена на виявлення токсину в матеріалах, взятих у хворих, а також харчових продуктах, що спричинили отруєння. Токсини визначають шляхом постановки біопроби і становлення його типу в реакції нейтралізації. В усіх випадках захворювань із симптомами ботулізму у хворих обов'язково беруть промивні води шлунка, блювотні маси, кров, фекалії, сечу. Необхідно досліджувати і залишки підозрілої їжі.

Визначення сероварів збудника ботулізму здійснюють за допомогою

реакції нейтралізації токсину in vivo, методом ІФА або в РНГА.

Виділення культур C. botulinum. До посіву досліджуваний матеріал

емульгують у фарфорових ступках. По 10 мл матеріалу

сіють у 4 флакони з 75-150 мл свіжорегенерованого рідкого середовища

(Кітта-Тароцці, Хоттінгера, казеїново- На 2,

4, 6 і 10-й день із флаконів, де є ріст, виготовляють мазки, забарвюють за

Грамом і мікроскопують. Збудник ботулізму має вигляд крупних

грампозитивних паличок із овальною субтермінальною спорою, що нагаують тенісні ракеткигрибного)

 

Лікування.Хворим на ботулізм промивають шлунок розчином калію перманганату. Внутрішньом'язово дробно вводять полівалентну сироватку трьох сероварів збудника, а також моновалентні сироватки сероварів А, Е і сироватку серовару В, якщо стан хворого не кращає, повторні ін'єкції сироватки роблять через 5—10 год у тих самих дозах. Усім іншим особам, які вживали їжу, що стала причиною захворювання хоча б однієї людини, сироватку призначають з профілактичною метою. Для вироблення активного імунітету поряд із сироваткою вводять і ботулінічний анатоксин. Профілактика. Велике значення в запобіганні ботулізму має додержання технології обробки продуктів на підприємствах харчової промисловості, особливо виготовлення консервів із м'яса, риби та овочів, а також копчення і соління риби, виготовлення ковбасних виробів.

 

58.Збудники газової анаеробної інфекції: класифікація, біологічні властивості.

До збудників анаеробної інфекції належать С. perfringens, С. novyi, C. septicum, С. histolyticum, С. difficile.

С. perfringens — товста поліморфна нерухома паличка з

округленими кінцями завдовжки 3—9 мкм і завширшки 0,9—1,3 мкм.

В організмі тварин і людини утворює капсулу, у зовнішньому

середовищі — овальної форми спору, що розташована субтермінально і

перевищує поперечник самого мікроорганізму. Збудник забарвлюється

всіма аніліновими барвниками, грампозитивний.

Культивування. С perfringens росте в усіх живильних середовищах, що

застосовуються для культивування анаеробів (рН 6,0—8,0). Оптимальна

температура для росту 35—37 °С (крайні границі — 16 і 50 °С).

У середовищі Кітта — Тароцці дає рівномірну каламуть із значним

виділенням газу. В глибині агару стовпчиком колонії мають вигляд

дисків або сочевичок (рис. 82, б). На кров'яному агарі з глюкозою утворює

гладенькі дископодібні колонії сірого кольору з рівними краями і

підвищенням у центрі.

Clostridium novyi.

Морфологія. С. novyi — крупна поліморфна паличка з округленими

кінцями завдовжки 4,7—22,5 мкм, завширшки 1,4—2,5 мкм. Часто

розташовується короткими ланцюжками (рис. 83, а), рухлива, перитрих,

має до 20 джгутиків; у зовнішньому середовищі утворює овальні спори,

розташовані звичайно суб-термінально, в організмі тварин і людини

капсул не продукує, забарвлюється грампозитивно.

Культивування. С novyi — строгий анаероб. Оптимальна температура

росту 37—45 °С (крайні границі — 15 і 50 °С), рН 7,8. У середовищі

Кітта — Тароцці росте з накопиченням газу, випаданням осаду і

просвітленням середовища. На глюкозокров'яному агарі утворює шорсткі

колонії з трохи піднятим центром і бахромчастими краями з зонами

гемолізу. У посіві в агарі стовпчиком розвивається у вигляді

пластівчастих колоній з компактним центром і тонкими нитками, що

відходять від нього.

Clostridium septicum

Морфологія. Клостридії поліморфні, довжина їх коливається від 3,1

до 14,1 мкм, товщина — від 1,1 до 1,6 мкм; трапляються і ниткоподібні

форми до 50 мкм завдовжки. Мікроорганізми рухливі, перитрихи, в

організмі тварин не продукують капсул, спори їх розташовуються

центрально або субтермінально, грампозитивні.

Культивування. Клостридії злоякісного набряку — строгі анаероби, тем-

пературний оптимум росту 37—45 °С, рН середовища 7,6. Добре

розвиваються в МПБ і на МПА з додаванням 0,5 % розчину глюкози. На

глюкозо-кров'яному агарі утворюють суцільний ніжний наліт у вигляді

химерно переплетених ниток на тлі гемолізу. В агарі стовпчиком колонії

мають вигляд клубків вовни (рис. 84, б). У бульйоні спричиняють

рівномірне помутніння з наступним випаданням пухкого білуватого

слизистого осаду.

Clostridium histolyticum Це грампозитивна, рухлива паличка завдовжки 1,6—3 мкм і діаметром

0,6—1 мкм, утворює овальні спори, розташовані субтермінально. С.

histolyticum має властивість продукувати колагеназу, протеїназу і

діалізабельний токсин, які розплавляють тканини зараженого організму.

При внутрішньовенному введенні тваринам екзотоксин спричиняє лізис

(3-клітин підшлункової залози, в результаті чого швидко настає смерть

59.Епідеміологія і патогенез газової анаеробної інфекції, клінічні прояви.

Інфікування відбувається виключно рановим шляхом. В рані за наявністю сполучених ряду перелікованих сприятливих умов спори клостридій починають швидко проростати і розмножуватись. Вони виділяють дуже сильні токсини: некротоксин і гемолізин, а також ферменти-токсини: лецитиназу, гіалуронідазу, колагеназу, протези та ін. Ферменти і токсини підвищують проникненисть судин, руйнують мембрани клітин, що призводить до місцевого розвитку набряків, крововиливів, гемолізу та змертвінь. Уражаються м'язи, сполучна тканина, судини, нерви. Необмежене швидке поширення вологого клостридіального некрозу призводить до дуже важкої інтоксикації мікробними ферментами і токсинами, а також продуктами розпаду тканин, інвазії мікроорганізмів у кровоток. Як наслідок цього розвивається анаеробний сепсис, поліорганна недостатність або бактеріо-токсичний шок.

Клініка. Перебігу захворювання властивий фазний характер. Першим проявом передує інкубаційний період, який триває від 3 (переважно) до 7 діб. На ранніх стадіях у хворих спостерігаються: слабкість, стурбованість, збудження, підвищення температури тіла, тахікардія.Подалі загальний стан швидко погіршується, збудження змінюється на емоціальне (пригнічення та депресія, зникає апетит, слизові оболонки та язик стають сухими, вкриваються брудним нальотом, температура підвішується до 39-400С, збільшується тахікардія, знижується артеріальний тиск. В аналізах крові визначається підвищення кількості лейкоцитів, значний зсув лейкоцитарної формули вліво, прискорення ШОЕ, прогресування анемії.З розвитком сепсису симптоми загальної інтоксикації посилюються, з'являються ознаки поліорганної недостатності і зниження діурезу, жовтяниця з відповідним підвищенням рівня азотемії, білірубинемією. Токсичний шок – супроводжується стрімким падінням гемодинаміки та інших життєвоважливих функцій і може швидко призвести до загибелі хворого.

 

60.Мікробіологічна діагностика, специфічна профілактика і терапія газової анаеробної інфекції.

В якості досліджуваного матеріалу беруть шматочки уражених тканин, рановий вміст, eкcудат, випіт при набряках; при харчових токсикоінфеціях –блювотні маси, прогмивні води шлунка, випорожнення, кров, залишки підозрілої їжі; при псевдомембранозному коліті –біоптати слизової оболонки сігми та випорожнення. Мікробіологічна діагностика газової гангрени зводиться до виділення чистих культур збудників, їх ідентифікації на основі морфологічних, культуральних і біохімічних властивостей та визначення типів токсинів.

Бактеріоскопія. готують мазки, забарвлюють за Грамом, наявність у мазках великої кількості крупних грампозитивних паличок зі спорами чи капсулами або без них може служити ознакою можливого розвитку газової гангрени. Для первинного накопичення анаеробів широко використовують середовище Кітта-Тароцці. На ньому C. perfringensросте з інтенсивним помутнінням і бурхливим газоутворенням. При посіві на стерильне знежирене лакмусове молоко C. Perfringens вже через 4-5 год викликає його звудження з утворенням цегляного кольору губчастого згустка, який газ підіймає на поверхню пептонізованої рідини.

Класичним середовищем для отримання ізольованих колоній є кров’яний цукровий агар Цейслера. На цьому агарі колонії основних збудників мають гладеньку дископодібну форму сіруватого кольору з рівними або бахромчастими краями і піднятим центром, оточені зоною гемолізу.

Лікування і профілактика передбачають такі заходи: 1) хірургічну обробку ран; 2) раннє введення з рофілактичною метою полівалентної антитоксичної очищеної або концентрованої сироватки «Діа-ферм-3» проти С. perfringens, С. novyiта С. septicum, 3) застосування для боротьби з рановою інфекцією антибіотиків, антистафілококової плазми, антисгафілококового гамма-глобуліну.Лікування тільки антитоксичною сироваткою в ряді випадків не дає потрібного ефекту, тоді як комплексне застосування антитоксичної сироватки й антибіотиків, які змінюють дисперсійні і дифузні властивості екзотоксинів, значно знижує летальність.

Профілактика псевдомембранозного коліту полягає у припиненні введення антибіотиків з селекціонуючими властивостями.Як додаткові терапевтичні засоби застосовують оксигенотерапію, переливання крові, введення інгібіторів протеолітичних ферментів (протеаз), препаратів, які нормалізують обмін речовин

 

61.Збудник дифтерії, біологічні властивості, характеристика біоварів

Збудник Corynebacterium diphtheriae є аеробом, не утворює спор і капсул. Морфологічно являє собою грампозитивну паличку із потовщеннями на кінцях (булавовидна форма через тільця Бабеша-Ернста). У мазках дифтерійні палички розташовані під кутом одна до одної подібно до латинської літери V. За своїми біологічними властивостями коринебактерії дифтерії поділяють на три біовари:mitis, gravis й близький до нього intermedius.

Бактерії біовару gravis -короткі, неправильної форми, з невеликою кількістю метахроматичних гранул.

Биовар mitis утворює довгі зігнуті поліморфні палички, що містять багато волютинових зерен (тільця Бебеша-Еріста)

Бактерії біовару intermedius найбільш великі з бочкоподібними контурами, для них характерні поперечні перегородки, що розділяють клітину на декілька сегментів.

 

62.Епідеміологія і патогенез дифтерії, токсиноутворення, генетичні детермінанти токсигенності

Патогенез захворювання: Вхідні ворота для збудника -слизові оболонки носоглотки, іноді очей, статевих органів (у жінок), пошкоджені шкірні покриви. Дифтерійна паличка колонізує тканини в місці проникнення, викликаючи розвиток місцевого фібринозного запалення. Подібний тип уражень відомий як дифтитритичне запалення.Поширення плівок і перехід процесу на дихальні шляхи може викликати асфіксію. Системні прояви обумовлені дією токсину, що вражає нервову систему (переважно периферичні симпатичні вузли), серце і судини, надниркові залози і нирки.

Токсиноутворення.Коринебактерії дифтерії продукують у бульйонних культурах сильні екзотоксини (гістотоксин, дермонекротизин, гемолізин). Дифтерійний екзотоксин складається із двох (А і В) поліпептидних ланцюгів, з'єднаних дисульфідним містком. А-ланцюг переходить у цитоплазму, а В-ланцюг залишається в мембрані ендосоми і спричиняє зв'язування токсину з рецепторами на поверхні клітин. Генетичні детермінанти токсигенності (tox+-гени) локалізовані в геномі профага, інтегрованого з нуклеоїдом коринебактерій дифтерії

 

63.Патогенні мікобактерії, біологічні властивості.

До родини мікобактерій входять збудники туберкульозу, мікобактеріозів і лепри.

Мікобактерії туберкульозу (Mycobacterium tuberculosis) - тоненькі, прямі або трохи зігнуті палички довжиною 1-4 мкм і шириною 0,2-0,6 мкм, гомогенні або зернисті, грампозитивні. Вони нерухомі, не утворюють спор і капсул, можуть мати гіллясті, ниткоподібні й кокоподібні форми.

Збудник лепри (Mycobacterium leprae) вигляд прямих або трохи зігнутих грампозитивних безспорових нерухомих паличок за морфологією і хімічним складом подібних до мікобактерій туберкульозу.