Общая характеристика энтеробактерий.

1.1.Таксономия энтеробактерий

Семейство Enterobateriaceae

Трибы Esherichia, Erwiniae, Jersiniae, Klebsiellae, Proteae

1.2.Основные свойства

Морфология – Грамотрицательные неспорообразующие палочки,иногда подвижные, имеющие фимбрии и половые пили

Биохимические свойства факультативные анаэробы, хемооорганотрофы, оксидазоотрицательные, обладают сахаролитическими и протеолитическими свойствами, восстанавливают нитраты в нитриты

Биологическая активность энтеробактерий имеет обратную корреляцию с их патогенными свойствами, чем менее они активны в биохимическом отношении, тем большей патогенностью обладаютпо отношению к человеку.

Таксономия и биологические свойства возбудителей

Признаки	Возбудители
Эшерихии	Шигеллы
А.Таксономия
Семейство	Enterobacteriaceae	Enterobacteriaceae
Триба	Echerichiae	Echerichiae
Род	Echerichia	Shigella
Виды	E.coli	Sh.disenteriae Sh.flexneri Sh.boydi Sn.sonnei
Б.Морфология
Форма	Короткие палочки	Короткие палочки
Капсула	У некоторых видов	Микрокапсула
Жгутики	перитрихи	Не имеют
Споры	Не образуют	Не образуют
В.Тинкториальные свойства: окраска по Граму	Грам(-)	Грам(-)
Г.Культуральные свойства
Тип дыхания	Факультативные анаэробы	Факультативные анаэробы
Специальные питательные среды	Эндо, Левина, Плоскирева, Олькеницкого, Ресселя
Д.Оптимальные значения рН, температуры	7,2 – 7,5 37^оС	6,7 – 7,4 37^оС
Е.Антигены	ОНК, R, M, O, ЛПС-протеиновый у некоторых, гемолизин	О- ЛПС-протеиновый К – только у Sh.flexneri
Ж.Факторы патогенности
Токсины	Экзотоксин (О-антиген) Экзотоксин (холероподобный) у некоторых шигелл Гемолизин	Эндотоксин, Экзотоксин (у Sn.disenteriae)
Ферменты		Гиалуронидаза, фибринолизин, плазмокоагулаза
Структурные компоненты клетки	Капсула (у некоторых) колицины	Микрокапсула, белки наружной мембраны

3.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение эшерихиозов и дизентерии

Признаки	Возбудители
Эшерихии	Шигеллы
А.Эпидемиология
Источник	Больной, бактерионоситель	Больной, бактерионоситель
Пути передачи	Алиментарный контактный, воздушно-капельный,	Алиментарный контактный
Б.Вызываемые заболевания	Коли-энтериты, гнойно-воспалительные, септические заболевания, пищевые интоксикации	Дизентерия
В.Постинфекционный иммунитет	Слабонапряженный, типоспецифический	Слабонапряженный, видоспецифический
Г.Специфическая профилактика	Не разработана	Не разработана Вакцина Чернохвостова применяется для лечения хронических форм заболевания
Д.Специфическое лечение	Коли-протейный бактериофаг, колибактерин, бифидумбактерин, бификолл	Дизентерийный бактериофаг

3.1.Значение эшерихий в патологии человека

Группы эшерихий	Вызываемая патология
Условно-патогенные эшерихии (предст.нормальной м/ф кишечника) Патогенные эшерихии: 1 категория ЭПКП (энтеропатогенные кишечные палочки) 2 категория ЭИКП(энтероинвазивные кишечные палочки) ЭТКП (энтеротоксигенные кишечные палочки)	1)Пищевые токсикоинфекции 2)Гнойно-септические заболевания   Коли-энтериты у детей до 1 года   Дизентериеподобные заболевания у детей и взрослых Холероподобные заболевания у детей и взрослых

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

Задание №1.Бактериологическое исследование мазковиз носа на выявление бактерионосительства 3 этап (протокол №1)

Задание №2.Бактериологическое исследование испражнений больного с подозрением на колиэнтерит. 2 этап.

1)Описание колоний микроорганизмов,выращенных на среде Эндо

колонии среднего размера, с ровными краями, блестящей поверхностью, малинового цвета с металлическим блеском

2)постановка оринтировочной реакции агглютинации настекле споливалентной ОВ-эшерихиозной сывороткой

Вывод по реакции агглютинации реакция с поливалентной ОВ-сывороткой положительная

3)Приготовление мазка из подозрительной колонии, окраска по Граму, микроскопия

4)Пересев подозрительной колонии на среду Ресселя

ЗАНЯТИЕ №4

ТЕМА: «Сальмонеллы- возбудители брюшного тифа и паратифов А и В. Сальмонеллезы»

ЦЕЛЬ: ознакомитьстудентов с основными свойствами сальмонелл, микробиологической диагностикой, специфической и неспецифической профилактикой и основными приниципами лечения вызываемых ими заболеваний.

ПЛАН:

№	Содержание занятия	Литература по теме
	Таксономия и история открытия сальмонелл	Лекция «Возбудители кишечных инфекций: эшерихии, сальмонеллы»
	Биологические свойства сальмонелл	2.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.273-279
	Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая и неспецифическая профилактика, основные принципы лечения заболеваний	3.В.Д.Тимаков, учебник, 1983, с.279-286
	Практическая работа	4.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.181-188 5. Л.Б.Борисов,практикум, 1993, с. 144-149 6.М.П.Зыков, практикум, 1977, с.186-204

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ:

Брюшной тиф – острое инфекционное заболевание, характеризующееся поражением лимфоидных тканей кишечника, лихорадкой, интоксикацией, бактериемией. Паратифы А и В по клинике и патогенезу сходны с брюшным тифом.

Сальмонеллезы – острые инфекционные заболевания, протекающие в виде гастроэнтеритов у взрослых больных и токсико-септическойинфекции у детей.

Таксономия и история открытия сальмонелл

Семейство Enterobacteriaceae

Триба Echerichia

Род Salmonella

Виды S.typhi, S.parathyphi A, S.parathyphi B, S.typhymurium и др.

Род Salmonella включает более 2000 сероваров

Название сальмонелл связаны с именем американского ученого Salmon, впервые описавшего их в 1885 году

Биологические свойства сальмонелл

Признаки	Основные свойства
А.Таксономия
Семейство	Enterobacteriaceae
Триба	Echerichia
Род	Salmonella
Виды	S.typhi, S.parathyphi A, S.parathyphi B, S.typhymurium и др.
Б.Морфология
Форма	Палочки
Размеры	От 0,4 – 0,8 до 1,0 – 5,0 мкм
Жгутики	имеются
Капсула	Имеется у некоторых
споры	Не образуют
В.Тинкториальные свойства	Грамотрицательные
Г.Культуральные свойства
Д.Тип дыхания	Факультативные анаэробы
Е.Специальные питательные среды	Висмутсульфитная, Левина, Плоскирева, селенитовая, Мюллера
Ж.Оптимальные значения температуры, рН	pH 7,2 37^oC
З.Антигены	O, H, K (Vi), M
Фазы Н-антигена	1-я(специфическая) 2-я (неспецифическая)
И.Факторы патогенности
Токсины	Эндотоксин (ЛПС-протеин комплекс)
Ферменты	Гиалуронидаза, фибринолизин, лецитиназа, гемолизин
Структурные и химические компоненты	Фимбрии, адгезины, капсула (у некоторых)

Биохимическая активность

Виды сальмонелл	Расщепление сахаров	Образование
глюкоза	лактоза	сахароза	маннит	мальтоза	индол	сероводород
S.typhi	К	-	-	К	К	-	+
S.parathyphy A	КГ	-	-	КГ	КГ	-	-
S.parathyphy B	КГ	-	-	КГ	КГ	-	+

3.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая и неспецифическая профилактика,основные принципы лечения заболеваний, вызываемых сальмонеллами

3.1.Эпимидемиология, иммунитет, специфическая профилактика и лечение

Признаки	Основные характеристики
А.Эпидемиология
Источник инфекции	Больные,бактерионосители, животные
Механизм заражения	Фекально-оральный
Пути передачи	Контактный, алиментарный, водный
Б.Заболевания, вызываемые сальмонеллами	Брюшной тиф, паратифы А и В, сальмонеллезы
В.Постинфекционный иммунитет
При брюшном тифе	Гуморальный, длительный, напряженный
При паратифах	Гуморальный, длительный, напряженный
При сальмонеллезах	Непродолжительный, нестойкий
Г.Специфическая профилактика	Вакцина ГАВte, брюшнотифозная спиртовая, вакцина, обогащенная Vi-антигеном, Вакцина НИИСИ
Д.Специфическая терапия	Брюшнотифозный бактериофаг

3.3.Наиболее часто встречающиеся возбудители сальмонеллезов S.enteritidis, S.typhymurium, S.nfantis, S.choleraesuis, S.panama, S.derby

3.4. Главные источники сальмонеллезов животные, птицы, люди (больные и бактерионосители)

3.5.При микробиологической диагностике с учетом особенностей патогеназа тифо-паратифозных заболеваний у больных берется следующий материал:

- на 1-й неделе заболевания кровь на посев

- на 2-й неделе заболевания желчь, моча, испражнения

- на 3-й неделе заболевания желчь, моча, испражнения

- на 4-й неделе заболевания желчь, моча, испражнения

- на 4-6 - й неделе заболевания желчь, моча, испражнения

Начиная со 2-й недели заболевания производятся серологические исследования по выявлению в сыворотке крови специфических антител.

3.6.Сероидентификация культур,выделенных от больных,производится в реакции агглютинации на стекле с препаратами диагностическими сыворотками.

3.7.Серодиагностика при подозрении на тифо-паратифозные заболевания проводится с применением следующих серологических реакций: Видаля.

3.8. Серодиагностика с целью выявления бактерионосительства реакция агглютинации с Vi-антигеном, РПГА с Vi-диагностикумом.

Для установления рода сальмонелл – р.агглютинации с адсорбированной поливалентной сывороткой (A, B, C, D, E)

Для определения серогрупп – ставят реакцию отдельно с каждой их монорецепторных сывороток, которые входят в поливалентную в качестве ее составляющих компонентов.

Для установления серотипа – с Н-сывороткой (I фазы)

Среда Ресселя:Среда Олькеницкого

1% лактоза 1% лактоза 0,02 соли Мора

0,1% глюкозы 1% сахароза 0,03 гипосульфита натрия

0,1% глюкозы –при образовании сероводорода наблюдается почернение

При из-за небольшого количества глюкозы ее сбраживание наблюдается только в столбике, при сбраживании лактозы (присутствует в большой концентрации) – как в столбике, так и в косяке

3.9.Диагностические препараты

Антигены: брюшнотифозный О-антиген, Н-антиген, Vi-антигенг, п/т А, п/т В,

Эритроцитарные диагностикумы О-, Н-, Vi-

Сыворотки для сероидентификации

Групповые (поли- и моноспецифические)

Типовые (моно- и полиспецифические)

3.10.Кожно-аллергическая проба при подозрении на брюшной тиф ставится с препаратом эбертин.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

Задание №1.

Бактериологическое исследование мазков со слизистой носа 3-й этап (см.протокол №1)

 

Задание №2.

3-й этап бактериологического исследования испражнений больногос подозрением на колиэнтерит.

А)учет результатов посева на среду Ресселя;

Б)микроскопия мазка, окрашенного по Граму;

В)РА с типовыми противоэшерихиозными сыворотками

 

Задание №3.

3-й этап бактериологического исследования крови больного с подозрением на брюшной тиф (метод гемокультур)

А)характер роста на среде Плоскирева

Б)мазок из подозрительной (бесцветной) колонии, окраска по Граму, микроскопия

В)пересев подозрительных (бесцветных) колоний на среду Олькеницкого.

Задание№4.

Серологическое исследование крови больного при подозрении на тифо-паратифозное заболевание. Постановка реакции Видаля.

Компоненты реакции

1.Сыворотка крови больного 1:10

2.Физиологический раствор

3.Диагностикумы:

- брюшного тифа О;

- брюшного тифа Р;

- паратифа А;

- паратифа В. Приготовление кратных разведений 1:100, 1:200, 1:400.1:800 и т.д.

После приготовления указанных разведений во все пробирки добавляют по 2 капли диагностикума, встряхивают для перемешивания и помещают для инкубации в термостат на 24 часа при 22^оС.

Учет результатов реакции

Компоненты	Разведения сыворотки	Контроль диагностикума	Контроль сыворотки
1:100	1:200	1:400	1:800
1-й ряд-брюшной тиф-О	4+	3+	2+	1+
2-й ряд-брюшной тиф-Н	2+	1+
3-ряд-паратиф А
4 ряд-паратиф В

Вывод В сыворотке обнаруженыантитела к О-антигену сальмонеллы брюшного тифа в титре 200. У больного – стадия разгара заболевания

ЗАНЯТИЕ №5