ТЕМА: «Дифтерийная палочка. Бордетеллы»

ЦЕЛЬ: изучение биологических свойств возбудителя дифтерии, коклюша, паракоклюша, патогенеза вызываемых ими заболеваний, принципов их микробиологической диагностики, профилактики и терапии.

ПЛАН ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ:

№	Содержание занятия	Литература по теме
	Таксономия и история открытия возбудителей дифтерии, коклюша и паракоклюша.	1.Лекция «Возбудители дифтерии и коклюша»
	Биологические свойства свойства возбудителей	2.В.Д.Тимаков, учебник, 1994, с.314-317, 340-344
	Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение	3.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.297-299, 307-311
	Практическая работа	4.Л.Б.Борисов, практикум, 1993, с.160-163, 171-175 5.Л.Б.Борисов, практикум, 1984, с.160-163, 171-175 6.М.П.Зыков,практикум, 1977, с.165-170, 224-231

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ:

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, характеризующееся токсическим поражением сердечно-сосудистой и нервной систем а также фибринозным воспалением в месте входных ворот.

Коклюш – инфекционное заболевание, характеризующееся острым катарральным воспалением верхних дыхательных путей и приступами спазматического кашля.

1.Таксономия и история открытия возбудителей дифтерии, коклюша и паракоклюша.

1.1.Таксономия

Таксономическая единица	Возбудители
дифтерии	коклюша
Род	Corinebacterium	Bordetella
Вид	Corinebacterium diphteriae	B.pertussis B.parapertussis B.bronchiseptica

1.2.История открытия возбудителей дифтерии, коклюша.

Возбудитель дифтерии открыт и выделен Клебсом Е. и Леффлером Ф. В 1883-84 гг. Коклюшная палочка выделена от больного ребенка в 1906 году Ж.Борде и О.Жангу

2.Биологические свойства возбудителей

Признаки	Возбудители
дифтерии	коклюша	паракоклюша
А.Морфология
Форма	Палочки	Овоидные палочки	Овоидные палочки
Капсула	Микрокапсула	Нежная капсула	Не образует
Жгутики	Не имеет	Не имеет	Не имеет
Споры	Не образует	Не образует	Не образует
Б.Тинкториальные свойства
Окраска по Граму	Грам(+)	Грам(-)	Грам(-)
Специальные методы окраски	По Нейссеру (выявляются зерна волютина)
В.Культуральные свойства
Тип дыхания	аэробы	аэробы	аэробы
Специальные питательные среды	Клауберга, Тинсдаля, Ру, Леффлера	Борде-Жангу, КУЛ	МПА
рН среды, температура	7,3-7,8 37^оС	6,8-7,4 37^оС	6,8-7,4 37^оС
Г.Антигены	О, К	1-видовой,2,3,4,5,6 - типоспецифические	Всего 14; 8, 9, 10 - типоспецифические
Д.Факторы патогенности
Токсины	Экзотоксин (гистотоксин)	Термолабильный гистотоксин
Ферменты	Лейкоцидин Нейраминидаза Гиалуронидаза Фибринолизин	Лецитиназа Плазмокоагулаза Гиалуронидаза
Структурные и химические компоненты	Микрокапсула Корд-фактор	Капсула Ворсинки

2.2.В зависимости от совокупности культурально-биохимических свойств вид Corinebacterium diphteriae разделяется на 2 биовара – gravis и mitis.

3.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика

Признаки	Возбудители
дифтерии	коклюша
А.Эпидемиология
Источник	Больной, бактерионоситель	Больной, реже- бактерионоситель
Механизм заражения	аэрогенный	аэрогенный
Пути передачи	Воздушно-капельный,капельный, алиментарный	Воздушно-капельный
Б.Вызываемые заболевания	дифтерия	коклюш
В.Постинфекционный иммунитет	Стойкий, напряженный, антитоксический, антимикробный	Стойкий, напряженный, типоспецифический
Г.Основной метод диагностики	бактериологический	бактериологический
Д.Специфическая профилактика	Вакцины АДС, АКДС, АДС-М, АД-анатоксин	Вакцина АКДС
Е.Специфическое лечение	Сыворотка противодифтерийная антитоксическая	Противококлюшный Иммуноглобулин Плазма иммунизированных доноров

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Задание №1. Бактериологическое исследование остатков пищи, явившихся причиной отравления(2 этап, см.протокол №2)

Задание №2. Микроскопия демонстрационного мазка дифтерийной палочки, окраска по Нейссеру, зарисовать

Задание №3 Микроскопия демонстрационного мазкакоклюшной палочки, окраска по Граму, зарисовать.

ЗАНЯТИЕ № 9

ТЕМА: «Возбудители туберкулеза, микобактериозов, лепры. Сибирязвенная палочка»

ЦЕЛЬ: изучить основные биологические свойтсва микобактерий и сибирязвенной палочки, особенности вызываемых ими заболеваний с микробиологической диагностикой, профилактикой и лечением

ПЛАН ЗАНЯТИЯ

№	Содержание занятия	Литература по теме
	Общая характеристика микобактерий	1.Лекция «Микобактерии –возбудители туберкулеза и лепры», «Возбудители зоонозов»
	Таксономия и история открытия возбудителей туберкулеза, лепры и сибирской язвы	2.В.Д.Тимаков, учебнтк, 1983, с.318-322,348-354
	Биологические свойства возбудителей	3.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.305-307, 311-318
	Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение	4.Л.Б.Борисов, практикум,1993, с.191-196, 205-207
	Практическая работа	5.Л.Б.Борисов,практикум, 1984, с.163-169, 208-215 6.М.П.Зыков, практикум, 1977,с.174-181, 231-237

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ

Туберкулез – инфекционное заболевание, вызываемое микобактериями и характеризуется чаще всего хроническим течением, многообразтем клинических проявлений и поражений различных органов, главным образом, дыхательной системы.

Лепра (проказа) – хроническое инфекционное заболевание, характеризующеесяпоражением кожи, слизистых оболочек, периферической нервнойсистемы и внутренних органов.

Сибирская язва – острое инфекционное заболевание, характеризующееся тяжелой интоксикацией, лихорадкой и протекающее в виде кожной, легочной икишечной формах.

1.Общая характеристика микобактерий:

а) высокое содержание липидов и миколовой кислоты;

б) склонность к ветвлению (актиномицеты, подобие грибов);

в) устойчивость к действию кислот, щелочей, спирта;

г) плохо окрашиваютсмя анилиновыми красителями;

д) медленно растут на питательных средах.

Микобактериозы – заболевания вызываемые микобактериями,кроме туберкулеза и лепры.

2.История открытия возбудителей туберкулеза и сибирской язвы.

В 1882 году Роберт Кох открыл туберклезную палочку. Возбудитель сибирской язвы открыт в 1849 году Полендером,чистая культура получена в 1876 году Кохом.

3.Биологические свойства возбудителей туберкулеза и сибирской язвы

Признаки	Возбудители
туберкулеза	сибирской язвы
А.Таксономия
Порядок	Actinomecitales
Семейство	Mycobacteriaceae	Bacillaceae
Род	Mycobacterium	Bacillus
Вид	M.tuberculosis M.bovis M.africanus	Bacillum antracis
Б.Морфология
Форма	Полиморфные палочки	Палочки с обрубленными концами
Капсула	микрокапсула	имеется
Жгутики	нет	нет
Споры	Не образуют	Центрально расположены
В.Тинкториальные свойства
Окраска по Граму	Грам(+)	Грам (+)
Специальные методы окраски	По Цилю-Нильссену	По Ожешке
Г.Культуральные свойства
Тип дыхания	аэробы	Факультативные анаэробы
Питательные среды	Левенштейна-Иерсена, Петраньяни	МПА, МПБ
рН среды, температура	6,8-7,2	7,2-7,6
Д.Антигены	Белковые, полисахаридные	О-соматический (ПСХ), Термостабильный, К-белковый (протективный)
Е.Факторы патогенности
Токсины		Экзотоксин
Ферменты	Лецитиназа, миколовая кислота	Протеаза
Структурные и химические компоненты	Корд-фактор, ПСХ, фосфолипиды, воск, туберкулопротеиды	капсула

3.2.На искусственных питательных средах микобактерии лепры не культивируются.

3.3.Антигенная структура микобактерий лепры:

а) термостабильный антиген – полисахаридной природы;

б) антиген термолабильный белковый (высоко специфичен для лепрозных палочек)

4.Эпидемиология, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение.

Признаки	Возбудители
туберкулеза	сибирской язвы
А.Эпидемиология:
Источник	Больной человек, животные, птицы	Крупный имелкий рогатый скот, свиньи, олени, ослы
Пути передачи	Контактынй, бытовой, воздушно-капельный	Контактный, аэрогенный
Б.Вызываемые заболевания	туберкулез	сибирская язва
В.Постинфекционный иммунитет	Нестерильный, клеточный	Наряженный, длительный, антимикробный и антитоксический
Г.Основной метод диагностики	Бактериологический	Бактериологический
Д.Специфическая профилактика	Вакцина БЦЖ	Живая сухая вакцина,
Е.Специфическое лечение		Противосибирязвенная сыворотка, иммуноглобулин (доноские и гетерогенные)

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Задание№1.Бактериологическое исследование остатков пищи, послужившей причиной отравления (3 этап,см.протокол №2)

Задание №2.Микроскопия демонстрационного мазка измокроты больного туберкулезом,окраска по Цилю-Нильссену, зарисовать.

Задание №3.Микроскопия демонстрационного мазка из культуры сибирязвенной палочки, окраска по Граму, зарисовать.

Задание №4.Постановка реакции кольпреципитации по Асколи.

Компоненты:

1.Исследуемый антиген.

2. Преципитирующая противосибирязвенная сыворотка.

Этапы выполнения теста.

1.В узкую преципитационную пробирку вносят 0,3 мл преципитирующей сыворотки.

2.Осторожно наслаивают равное количество преципитиногена.

Результат на границе 2 сред образуются кольцо преципитации

Вывод реакция Асколи положительная, следовательно исследуемый материал (экстракт из шкуры животного) содержит специфический антиген, свойственный возбудителю сибирской язвы.

ЗАНЯТИЕ № 10

ТЕМА: «Возбудители зоонозных инфекций: чумы, псевдотуберкулеза, туляремии и бруцеллеза»

ЦЕЛЬ: изучить основные биологические свойства возбудителей зоонозных инфекций, их роль в патологии, диагностику, специфическую профилактику и лечение этих инфекционных заболеваний.

ПЛАН:

№	Содержание занятия	Литература по теме
	Понятие о зоонозах	1.Лекция «Возбудители зоонозов: чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы»
	Основные биологические свойства возбудителей	2.Л.Б.Борисов, учебник, 1994, с.288-290
	Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение	3.В.Д.Тимаков,учебник, 1983, с.293-297
	Практическая работа	4.Л.Б.Борисов, практикум, 1984, с.198-208 5.М.П.Зыков, практикум, 1977, с.174-186

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ:

Чума – острое инфекционное заболевание,характеризующеесятяжелой общей интоксикацией, поражением лимфатической системы с тенденцией к эпидемическому и пандемическому распространению.

Псевдотуберкулез – острое инфекционное заболевание, характеризующееся циклическим течением, интоксикацией, поражением органов желудочно-кишечного тракта, суставов конечностей и общей аллергической реакцией

Бруцеллез – инфекционно-аллергическое заболевание, характеризующееся длительной лихорадкой, поражением опроно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, моче-половой и други систем организма. Имеет склонность к затяжному хроническому течению.

Туляремия – острое инфекционное заболевание с природной очаговостью. Характеризуется лихорадкой, образованием лимфаденитов и поражением различных органов (глаз, легких, желудочно-кишечного тракта и других).

1.Понятие о зоонозах.

1.1.Зоонозы – это инфекциооные заболевания,при которых источниками инфекции служат дикие и домашние животные и птицы.

1.2.К зоонозным инфекциям относят чуму, туляремию, бруцеллез, псевдотуберкулез,сибирскую язву, лептоспироз и другие.

1.3.Особенности зоонозных инфекций:

а) человек не является биологическим хозяином возбудителя;

б) как правило, отстутствует передача возбудилея от больного человека здоровому или от больного животным;

в) появлению зоонозов у людей, как правило, предшествуют эпизоотии среди животных.

2.Основные биологические свойства возбудителей

Признаки	Возбудители
чумы	псевдотуберкулеза
А.Таксономические свойства
Семейство	Enterobacteriaceae	Enterobacteriaceae
Триба	Jersiniae	Jersiniae
Род	Jersinia	Jersinia
Вид	J.pestis	J.pseudotuberculosis
Б.Морфология и тинкториальные свойства
Форма	палочковидная	палочковидная
Капсула	образуют	Не образуют
Жгутики	Не имеют	Имеют
Споры	Не образуют	Не образуют
Окраска по Граму	Грам(-)	Грам(-)
В.Культуральные свойства
Тип дыхания	Факультативный анаэроб	Факультативный анаэроб
Питательные среды	МПА, МПБ, агар Хоттингера
рН среды, темпаратура	6,4-7,2 28^оС	6,0 – 8,0 25-28^оС
Г.Антигены	F1, VW, OCA, T, J	О, Н
Д.Факторы патогенности
Токсины	Мышиный токсин	Энтеротоксин
Ферменты	гемолизин, фибринолизин, коагулаза и другие	гиалуронидаза, нейраминидаза
Структурные и химические компоненты	Капсула, пестицины, антигены F1,VW

2.2.Биологические свойства возбудителей бруцеллеза и туляремии

Признаки	Возбудители
бруцеллеза	туляремии
А.Таксономия
Семейство
Род	Brucella	Brucella
Вид	B.melitenses B.abortus B.suis	Francisella tularensis
Б.Морфология и тинкториальные свойства
Форма	палочковидная	палочковидная
Капсула	образует	образует
Жгутики	не имеет	не имеет
Споры	не образует	не образует
Окраска по Граму	Грам(-)	Грам(-)
Специальные методы окраски		По Романовскому-Гимзе
В.Культуральные свойства
Тип дыхания	аэробы	аэробы
Питательные среды	печеночные, сывороточные, кровяной агар	Мак-Коя, кровяной агар
рН, температура	6,8-7,0 37^оС	6,8-7,3 37^оС
Г.Антигены	A, M, V, G, R	O, Vi
Д.Факторы патогенности
Токсины	эндоктоксин	эндоктоксин
ферменты	Гиалуронидаза Нейраминидаза
Структурные и химические компоненты бактериальной клетки	капсула	капсула

3.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение

3.1.Эпидемиология, патогенез, постинфекционный иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение чумы и псевдотуберкулеза.

Признаки	Возбудители
чумы	псевдотуберкулеза
А.Эпидемиология
Переносчики	Грызуны, домашние животные	Грызуны, животные
Пути передачи	Трансмиссивный, алиментарный, контактный	Алиментарный, водный
Б.Постинфекционный иммунитет	Стойкий, напряженный, продолжительный	Не изучен
В.Основной метод диагностики	Бактериологический	Бактериологический
Г.Специфическая профилактика	Корпускулярные, химические вакцины EV	Не разработана

3.2.Эпидемиология, патогенез, иммунитет, диагностика, специфическая профилактика и лечение бруцеллеза и туляремии.

Признаки	Возбудители
бруцеллеза	туляремии
А.Эпидемиология
Источник	Домашние и дикие животные	Грызуны, хищные животные
Пути передачи	Алиментарный, контактный	Алиментарный, контактный трансмиссивный
Б.Постинфекционный иммунитет	Нестерильный	Стойкий, напряженный
В.Основной метод диагностики	Бактериологический	Серологический
Г.Специфическая профилактика	Вакцина Вершакова	Вакцина Эберта-Гайского
Д.Специфическая терапия	Иммуноглобулин, убитая бруцеллезная вакцина

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

Задание №1.4-й этап бактериологического исследования остатков пищи, послуживших причиной отравления. Учет результатов, заключение (см.протокол №2).

Задание №2. Постановка и учет реакции Хеддельсона и Райта при подозрении на бруцеллез.

А)реакция Хеддельсона

Компоненты (в мл)	Номер квадрата
1.Испытуемая сыворотка (неразведенная)	0,04	0,02	0,01	0,02	-	№ больного
2.Неразведенный бруцеллезный диагностикум	0,03	0,03	0,03	-	0,03
3.Физиологический раствор	-	-	-	0,03	0,03

Заключение: реакция положительная в объеме сыворотки 0,01 мл

Б)реакция Райта

Компоненты в мл	Номера пробирок
					6(КД)	7(КС)
1.Физ.раствор	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
2.Исследуемая сыворотка, разведена 1:25	0,5	0,5 из 1 пробирки	0,5 из 2 пробирки	0,5 из 3 пробирки	0,5 из 4 пробирки		0,5
Разведения сыворотки	1:50	1:100	1:200	1:400	1:800
Бруцеллезный диагностикум	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5	0,5
Результаты	4+	4+	3+	2+

Учет результатов на следующем занятии: последнее разведение, вызывающее реакцию, положительную на 3+ составляет 1:200. Реакция Райта положительна в титре 200.

Задание №3 Микроскопия и зарисовка демонстрационных препаратов возбудителя чумы.

ЗАНЯТИЕ № 11