При приеме биопсийного материала лаборант пустил в работу кусочки тканей после гастробиопсии.

1. Расскажите о строение желудка, его функциях. Клетки желез желудка и что они выделяют.

2. Перечислите этапы проводки материала, какие особенности проводки такого рода материала можете назвать?

3. Назовите методы окрасок, которые здесь будут применять.

4. Перечислите этапы окрашивания препарата методом окраски, используемым для выявления хеликобактерной инфекции.

5. Определите, какой материал подлежит утилизации, какой архивированию? Поясните правила архивирования и утилизации материала.

Ответы:

1 Желудок — это полый мышечный орган, расположенный в левом подреберье.

Слизистая оболочка желудка имеет складки. покрыта одн.цилиндр. эпит.с многочисл. слизистыми железками и железами, вырабатывающими пищ. ферменты и соляную кислоту.

---есть собственный слой соединительной ткани, пронизанной многочисленными кровеносными и лимфатическими сосудами.

---- содержит собственную тонкую мышечную пластинку, образованную тремя слоями гладкомышечных волокон.

Мышечная оболочка образована 3-мя толстыми слоями гладкой мышечной ткани.

серозная оболочка желудка образована соединительной тканью.

Функции желудка:

● образование кислоты и пепсина для осуществления пищеварения;

● механическая и химическая переработка пищи желудочным соком, ферментами;

● депонирование пищевого комка на время, необходимое для должного переваривания;

● эвакуация в двенадцатиперстную кишку;

● выработка внутреннего фактора Кастла для усвоения витамина В₁₂

● участие в метаболизме путем синтеза серотонина, простогландинов;

● синтез слизи для защиты поверхности

  Железы желудка:

● фундальные (пепсиноген и соляную кислоту)

● кардиальные (мукоидный секрет, бикарбонаты и хлориды калия и натрия)

● пилорические.(щелочной слизистый секрет., гастрин вырабатывают G-клетки)

2. Этапы проводки

1) фиксация тканей(формалин)

2) обезвоживание тканей(в спиртах восходящей концентрации и ксилоле)

3) пропитка тканей парафином

3. Г/Э.  Ядра приобретают сине-фиолетовый цвет, цитоплазма-розовый цвет.

 1. депарафинирование срезов в емкости в ксилол на 5 мин, затем в спирты по 3 мин.

 2. окрашивание гематоксилином 10 мин.

3. промывание в теплой проточной воде и опускание на несколько минут в теплую воду для дозревания краски (подсинить препарат).

4. окрашивание в емкости с эозином на 3 мин.

5. промывание под проточной холодной водой, затем в спирты восходящей концентрации на 2-3 мин в каждую поочередно, после в термостат для просушки.

 6. просветление и заключение срезов.

4. Окраска толуидиновым синим

Результат: нр-темно-синий.

1. депарафинированный срез гидратировала в дистиллированной воде.

2. погрузила срез в раствор толуидинового синего на 25-30 мин.

3. промыла срез в дистиллированной воде 3-5 мин.

4. промыла срезы в 80% этаноле в течении 3сек

5. просветлила в ксилоле в течении 10 мин.

6.Заключила срез.

 

5. Утилизация. Обеззараженные отходы собирают в одноразовую герметичную упаковку желтого цвета. Твердые и острые предметы (гистологические препараты и др.) утилизируются централизованно, после дезинфекции вывозятся на полигоны твердых бытовых отходов.

Отходы, образовавшиеся в результате проведения патологоанатомических исследований, утилизируются в соответствии с СанПин 2.1.7.2790-10. Патологоанатомические и органические операционные отходы класса Б (органы, ткани и так далее) подлежат кремации (сжиганию) или захоронению на кладбищах в специальных могилах на специально отведенном участке кладбища в соответствии с требованиями законодательства РФ. Обеззараживание таких отходов не требуется, патологоанатомическим отделением заключен договор с компанией, которая утилизирует отходы класса Б.

Правила утилизации

Обеззараженные отходы собирают в одноразовую герметичную упаковку желтого цвета. Твердые и острые предметы (гистологические препараты и др.) утилизируются централизованно, после дезинфекции вывозятся на полигоны твердых бытовых отходов.

Отходы, образовавшиеся в результате проведения патологоанатомических исследований, утилизируются в соответствии с СанПин 2.1.7.2790-10. Патологоанатомические и органические операционные отходы класса Б (органы, ткани и так далее) подлежат кремации (сжиганию) или захоронению на кладбищах в специальных могилах на специально отведенном участке кладбища в соответствии с требованиями законодательства РФ. Обеззараживание таких отходов не требуется, патологоанатомическим отделением заключен договор с компанией, которая утилизирует отходы класса Б.

Архив.

Органы ткани, а также их фрагменты, оставшиеся после вырезки и заливки материала, хранят в 10% нейтральном формалине в больших емкостях с плотно закрывающимися крышками

- «влажный архив». Каждый объект завязывают в марлю вместе с биркой, на которой указан год и номер исследования. Также существуют архивы гистологических препаратов и блоков; документации ПАО.

 Гистологические препараты (стекла) предпочтительнее хранить в вертикальном положении, исключая попадание на них прямого солнечного света для избежание выцветания.

Влажный архив (в 10% нейтральном формалине) патологоанатомического вскрытия может быть уничтожен по окончании гистологического исследования и установления патологоанатомического диагноза.

· Стекла с срезанным материалом, блоки и журналы хранятся 25 лет

· Влажный архив (раковый) хранится 25 лет

 · Секционный материал хранится 1 год

Правила архивирования

Достаточно хранить их при комнатной температуре. Нужно вести учёт (журнал выдачи и хранение гистологических препаратов и парафиновых блоков)
Влажный архив (в 10% нейтральном формалине) патологоанатомического вскрытия может быть уничтожен по окончании гистологического исследования и установления патологоанатомического диагноза. Гистологические препараты и парафиновые блоки материалов патологоанатомических вскрытий хранят 3 года. Уничтожают без составления акта.

 5. Врач-патологоанатом подтвердил диагноз лейкоза у умершего пациента. На исследование взяты ткани всех органов, особенно те, где были обнаружены характерные для лейкоза изменения (лимфоузлы, часть берцовой кости, селезенка, печень).

1. Перечислите органы иммунной системы и кроветворения. Расскажите о сходных чертах их строения.

2. Расскажите о строении лимфатических узлов, их функциях.

3. Перечислите этапы проводки материала, в том числе костной ткани.

4. Назовите окраску и перечислите этапы окрашивания препарата методом окраски, используемым для выявления лейкозных клеток.

5. Определите, какой материал подлежит утилизации, какой архивированию? Поясните правила архивирования и утилизации материала.

Ответы:

1. Органы кроветворения - органы, производящие все компоненты крови.

● Центральные- красный кост. мозг(вырабатывает лейкоциты,кот-е поступают в кров.русло), тимус(вырабатывает Т-лимфоциты)

● Периферические- селезенка(много В и Т лимф.,которые обеспечивают иммунологическую «проверку»крови), лимфоидные образования, лимфатические узлы(содержат В и Т-лимф., макрофаги)

Красный костный мозг.

ККМ – это центральный кроветворный орган, потому что в нем происходит антиген независимая пролиферация и дифференцировка В -лимфоцитов. состоит из ретикулярной стромы соединительной ткани, кровяных тяжей или островков клеток и синусоидальных капилляров.

Строение.

1.Строма: (стромальный компонент) ретикулярные клетки отросчатой формы и волокна, образующие трхмерную сеть. Функции:Опорная, трофическая, регуляторная.

2. Паренхима.(гемопоэтический компонент) Образован скоплениями кроветворных клеток миелоцитарного и лимфоцитарных рядов. (миелоидная ткань- это совокупность 5 видов гемопоэтических клеток: незрелые и зрелые эритроциты, гранулоциты, моноциты, тромбоциты и В-лимфоциты.)

3. Сосудистый компонент. представлен синусоидными гемокапиллярами.
Вместе с мегакариоцитом они образуют островок тромбоцитопоэза (кнаружи от капилляра лежит мегакариоцит. Он просовывает отросток цитоплазмы в полость капилляра через щели в эндотелии).

Функции:

-- обеспечивает антиген независимую пролиферацию и дифференцировку В-лимфоцитов.
- -- универсальный кроветворный орган.(выпускает в периферическую кровь 5 видов зрелых форменных элементов: эритроциты, гранулоциты, моноциты, тромбоциты и «наивные» В-лимфоциты)

Тимус

- центральный орган иммунной системы, но из-за способности вырабатывать гормон тирозин, относится также и к эндокрин.системе.

Железа розовато-серого цвета и имеет форму двузубой вилки. Есть доля правая и левая.

Строение.

 Снаружи- капсула из соединительной ткани. От нее отходят септы (трабекулы) из рыхлой соединительной ткани, которые делят тимус на незамкнутые дольки.Долька состоит из стромы и паренхимы.

Строма – это эпителий. Одна клетка стромы называется эпителиоретикулоцит (ЭРЦ). Один ЭРЦ имеет много цитоплазматических отростков. С помощью анастомозирующих отростков ЭРЦы образуют трехмерную сеть. В петлях этой сети находятся дифференцирующиеся Т-лимфоциты. Все зрелые и незрелые лимфоциты называются лимфоидная ткань. Лимфоидная ткань –это паренхима тимуса.

Лимфоидная ткань в дольке лежит в 2 слоя:

1.  а) корковое вещество

2. б) мозговое вещество. В центре мозгового вещества лежат эпителиальные слоистые тельца Они состоят из эпителиоретикулоцитов, лежащих концентрически.

Сходство строения

Все органы имеют общий принцип строения и состоят из ретикулярной стромы и гемопоэтических клеток разной степени зрелости. Стромой почти всех кроветворных органов является ретикулярная ткань мезенхимального происхождения, а у тимуса ретикулоэпителиальная ткань энтеродермального происхождения.

2. Лимфатические узлы — это органы, расположенные по ходу лимфатических сосудов

Каждый лимфоузел имеет капсулу из соединительной ткани. От нее внутрь идут тончайшие ответвления – капсулярные трабекулы. У ворот узла эта капсула образует околохиларное утолщение с широкими трабекулами, идущими в паренхиму (функциональную часть органа). Через ворота в лимфоузел входят нервы и артерии и выходят выносящие лимфатические сосуды и вены. Паренхима состоит из двух веществ:

● коркового. Этот слой более темный и расположен ближе к капсуле. В корковом веществе находятся фолликулы, содержащие В-лимфоциты;

● мозгового. Этот слой светлый, он находится в центре узла и прилегает к его воротам. Мозговое вещество состоит из мякотных тяжей, разграниченных широкими синусами. Они также являются местом скопления В-лимфоцитов. Кроме того, здесь находятся плазматические клетки, макрофаги и другие элементы лимфоидной ткани.

Между трабекулами, паренхимой и капсулой есть каналы – синусы. Именно по ним движется лимфа, которая поступила в узел. Из входящих сосудов она течет в каналы коркового и мозгового вещества, а оттуда в воротный синус и выносящие сосуды. Иногда она проходит более короткий путь, просачиваясь через паренхиму обоих слоев в направлении выходящих сосудов.

Функции:

1Лимфопоэз. В корковом веществе образуются В-лимфоциты (в светлых центрах фолликулов), его синус заполнен фагоцитами, а в паракортикальной зоне, граничащей с мозговым веществом, вырабатываются Т-лимфоциты. Кроме того, в лимфоузлах синтезируется лейкоцитарный фактор, который стимулирует деление клеток.

2.Барьерная. В лимфоузле, точнее – в его синусах, пронизанных сетью ретикулярных волокон, происходит фильтрация лимфы. Они задерживают инородные частицы, микроорганизмы и опухолевые клетки. Более того, там их активно захватывают макрофаги.

3.Иммунологическая. участие лимфоцитов в иммунных процессах, синтезе плазматических клеток и выработке иммуноглобулинов.

3. Этапы проводки

1) фиксация тканей(формалин)

2) обезвоживание тканей(в спиртах восходящей концентрации и ксилоле)

3) пропитка тканей парафином

Кости и патологические обезызвествленные ткани фиксируют по общим правилам. После фиксации такие ткани нельзя сразу заливать в обволакивающую среду. Они должны быть предварительно подвергнуты специальной обработке, имеющей целью удаление извести. Процесс извлечения извести из тканей называется декальцинацией. Декальцинация всегда применяется после фиксации.

Особенности проведения вырезки материала:

1. Костные части выпиливают.

2. Толщина фрагментов для проводки не более 3 мм.

3. Мягкие ткани не обязательно отделять от костей.

4. Не подрезать материал в процессе декальцинации.

5. После вырезки фиксировать в 10% формалине 24-48 часов.

6. Метка с надписью «дек» помогает ориентироваться при резке блоков.

Гемотоксилин-эозин

Ядра приобретают сине-фиолетовый цвет, цитоплазма-розовый цвет.

1. депарафинирование срезов в емкости в ксилол на 5 мин, затем в спирты по 3 мин.

2. окрашивание гематоксилином 10 мин.

3. промывание в теплой проточной воде и опускание на несколько минут в теплую воду для дозревания краски (подсинить препарат).

4. окрашивание в емкости с эозином на 3 мин.

5. промывание под проточной холодной водой, затем в спирты восходящей концентрации на 2-3 мин в каждую поочередно, после в термостат для просушки.

 6. просветление и заключение срезов.

5 Утилизация. Обеззараженные отходы собирают в одноразовую герметичную упаковку желтого цвета. Твердые и острые предметы (гистологические препараты и др.) утилизируются централизованно, после дезинфекции вывозятся на полигоны твердых бытовых отходов.

Отходы, образовавшиеся в результате проведения патологоанатомических исследований, утилизируются в соответствии с СанПин 2.1.7.2790-10. Патологоанатомические и органические операционные отходы класса Б (органы, ткани и так далее) подлежат кремации (сжиганию) или захоронению на кладбищах в специальных могилах на специально отведенном участке кладбища в соответствии с требованиями законодательства РФ. Обеззараживание таких отходов не требуется, патологоанатомическим отделением заключен договор с компанией, которая утилизирует отходы класса Б.

Правила утилизации

Обеззараженные отходы собирают в одноразовую герметичную упаковку желтого цвета. Твердые и острые предметы (гистологические препараты и др.) утилизируются централизованно, после дезинфекции вывозятся на полигоны твердых бытовых отходов.

Отходы, образовавшиеся в результате проведения патологоанатомических исследований, утилизируются в соответствии с СанПин 2.1.7.2790-10. Патологоанатомические и органические операционные отходы класса Б (органы, ткани и так далее) подлежат кремации (сжиганию) или захоронению на кладбищах в специальных могилах на специально отведенном участке кладбища в соответствии с требованиями законодательства РФ. Обеззараживание таких отходов не требуется, патологоанатомическим отделением заключен договор с компанией, которая утилизирует отходы класса Б.

Архив.

Органы ткани, а также их фрагменты, оставшиеся после вырезки и заливки материала, хранят в 10% нейтральном формалине в больших емкостях с плотно закрывающимися крышками

- «влажный архив». Каждый объект завязывают в марлю вместе с биркой, на которой указан год и номер исследования. Также существуют архивы гистологических препаратов и блоков; документации ПАО.

 Гистологические препараты (стекла) предпочтительнее хранить в вертикальном положении, исключая попадание на них прямого солнечного света для избежание выцветания.

Влажный архив (в 10% нейтральном формалине) патологоанатомического вскрытия может быть уничтожен по окончании гистологического исследования и установления патологоанатомического диагноза.

· Стекла с срезанным материалом, блоки и журналы хранятся 25 лет

· Влажный архив (раковый) хранится 25 лет

 · Секционный материал хранится 1 год

Правила архивирования

Достаточно хранить их при комнатной температуре. Нужно вести учёт (журнал выдачи и хранение гистологических препаратов и парафиновых блоков)
Влажный архив (в 10% нейтральном формалине) патологоанатомического вскрытия может быть уничтожен по окончании гистологического исследования и установления патологоанатомического диагноза. Гистологические препараты и парафиновые блоки материалов патологоанатомических вскрытий хранят 3 года. Уничтожают без составления акта.

 

6.На исследование поступил фрагмент головки бедренной кости после операции по эндопротезированию тазобедренного сустава..

1. Расскажите о видах и особенностях строения костной ткани.

2. Какие виды костной ткани встречаются в длинной трубчатой кости (например, бедренной).

3. Перечислите этапы проводки материала.

4. Назовите окраску и перечислите этапы окрашивания препарата.

5. Определите, какой материал подлежит утилизации, какой архивированию? Поясните правила архивирования и утилизации материала.

Ответы:

1.- Костная ткань — это особый тип соединительной ткани, также состоящий из клеток и межклеточного вещества. К клеткам относятся остеобласты, остеоциты, остеокласты.

Виды:

● Грубоволокнистая – пучки волокон расположены в разных направлениях(незрелая кост.ткань, существует в организме временно)

● Тонковолокнистая – волокна расположены параллельно в костных пластинках (зрелая кост. Ткань. Образует костный скелет)

 

кость характеризуется значительным содержанием межклеточного вещества и своеобразным его строением. Межклеточное вещество состоит из основного аморфного вещества, пропитанного неорганическими солями, в котором располагаются образующие небольшие пучки коллагеновые волокна. Они содержат, в основном, белок — коллаген I.