Заглавная страница Избранные статьи Случайная статья Познавательные статьи Новые добавления Обратная связь КАТЕГОРИИ: АрхеологияБиология Генетика География Информатика История Логика Маркетинг Математика Менеджмент Механика Педагогика Религия Социология Технологии Физика Философия Финансы Химия Экология ТОП 10 на сайте Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрацииТехника нижней прямой подачи мяча. Франко-прусская война (причины и последствия) Организация работы процедурного кабинета Смысловое и механическое запоминание, их место и роль в усвоении знаний Коммуникативные барьеры и пути их преодоления Обработка изделий медицинского назначения многократного применения Образцы текста публицистического стиля Четыре типа изменения баланса Задачи с ответами для Всероссийской олимпиады по праву Мы поможем в написании ваших работ! ЗНАЕТЕ ЛИ ВЫ?
Влияние общества на человека
Приготовление дезинфицирующих растворов различной концентрации Практические работы по географии для 6 класса Организация работы процедурного кабинета Изменения в неживой природе осенью Уборка процедурного кабинета Сольфеджио. Все правила по сольфеджио Балочные системы. Определение реакций опор и моментов защемления |
Определение способности микроорганизмов продуцировать
b -лактамазу Тест на уреазу Аминогликозидные антибиотики, являясь ин- гибиторами синтеза белка, угнетают образование уреазы Proteus mirabilis, используемого в качестве тест-организма. Питательную среду, содержащую мо- чевину, вносят в два ряда пробирок. В один ряд добав- ляют стандартный раствор испытуемого антибиотика в определенных концентрациях, в другой ряд — испы- туемый раствор. Пробирки засевают Р. mirabilis и че- рез 60-75 мин. инкубации измеряют pH с помощью по- тенциометра. Значения pH в пробирках, содержащих стандартный раствор, используют для построения стандартной кривой, которая служит для определения Enterobacteriaceae и Acinetobacter spp.
Pseudomonas spp. и Acinetobacter spp. Амикацин, ампициллин, цефазолин, цефалотоксин, цефотаксим, гентамицин, тобрамицин, триметоприм- сульфаметоксазол, норфлоксацин Амикацин, цефтазидим, гентамицин, мезлоциллин, тобрамицин, триметоприм- сульфаметоксазол, норфлоксацин количества антибиотика в испытуемом растворе. Тест на люциферазу Метод основан на способности аминогликозид- ных антибиотиков угнетать образование АТФ микроб- ными клетками. Люминесцентный метод определения АТФ в присутствии люциферазы отличается высокой Staphylococcus spp. Ампициллин, цефалотин, клиндамицин, эритромицин, гентамицин, оксациллин, бензилпенициллин, ванкомицин, триметоприм-сульфаметоксазол, норфлоксацин Enterococcus spp. Бензилпенициллин, ампициллин, ванкомицин, стрептомицин и гентамицин (синергидность действия), норфлоксацин Streptococcus spp. Бензилпенициллин, цефалотин, левомицетин, эритромицин, ванкомицин, норфлоксацин Haemophilus spp. Ампициллин, цефотаксим, цефуроксим, левомицетин, триметоприм-сульфаметок- сазол
Определение способности микроорганизмов продуцировать b -лактамазу Устойчивость микроорганизмов к пенициллину может быть связана с их способностью продуцировать фермент β лактамазу, инактивирующий этот антибио- тик. В чашку Петри вносят 0,5 мл суточной бульонной культуры стандартного штамма Staphyloccus aureus, чувствительного к пенициллину, и 20 мл расплавлен- ного и охлажденного до 45°C питательного агара. Бы- стро перемешивают и оставляют до застывания агара. После этого в центр чашки на поверхность среды по- мещают бумажный диск, содержащий пенициллин. По радиусам к диску петлей подсевают исследуемые культуры. Посевы инкубируют при 37°C 24 часа. О способности бактерий продуцировать β-лактамазу судят по наличию роста стандартного штамма стафи- лококка вокруг исследуемой культуры.
чувствительностью. Бактериальную культуру вносят в пробирки, содержащие стандартный или испытуе- мый раствор антибиотика, инкубируют 90 мин., после чего определяют количество АТФ в специальном при- боре люминометре.
Хроматографические методы Высокоэффективная жидкостная хроматогра- фия (ВЭЖХ) Испытуемый раствор пропускают через хроматографическую колонку, заполненную носите- лем, представляющим собой мелкодисперсный ги- дрофобизированный сорбент. Гидрофобное покрытие носителя варьируется в зависимости от молекулярной массы разделяемой смеси. При нанесении микроколичества испытуемого раствора амфифильные вещества сорбируются на по- верхности частиц носителя и вытесняются с нее в гра- диенте апротонного растворителя (система вода — ацетонитрил). Вещества разделяются в соответствии со своим сродством к сорбенту (гидрофобностью). Эффективность анализа определяется микронны- ми размерами частиц носителя, так что время анализа не превышает 5-10 мин. Раствор на выходе из колонки анализируется в проточном УФ-детекторе с одновременной записью. Положение пика выходящего вещества является его калибровочной характеристикой. Количество веще- ства в нанесенной пробе определяется автоматиче- ским интегратором. Преимуществами метода является высокая ско- рость определения, точность, специфичность и чув- ствительность. Количественное определение тетрациклина ме- тодом ВЭЖХ Готовят растворы испытуемого образца и стан- дартного препарата тетрациклина и хроматографи- руют их попеременно на жидкостном хроматографе с УФ-детектором, получая не менее 5 хроматограмм каждого раствора в строго определенном режиме тем- пературы и скорости подвижной фазы. Количество те- трациклина в пробе вычисляют по формуле:
X — количество тетрациклина в испытуемом об- разце, в граммах; ботанного таким же образом, как испытуемый пре- парат. Содержание ампициллина в препарате в процен- тах (X) рассчитывают по формуле: D 0 — величина оптической плотности испытуемо- го раствора препарата; D CT — величина оптической плотности раствора стандартного образца; а — навеска стандартного образца ампициллина, в граммах; b — содержание ампициллина в стандартном об- S обр — среднее значение площадей пиков тетраци- разце, в процентах. клина, вычисленное из хроматограмм раствора испы- туемого препарата; S СТ — среднее значение площадей пиков тетраци- клина, вычисленное из хроматограмм стандартного образца; А — содержание тетрациклина в стандартном об- разце, в граммах.
|
||||||||||||
Последнее изменение этой страницы: 2021-04-05; просмотров: 72; Нарушение авторского права страницы; Мы поможем в написании вашей работы! infopedia.su Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав. Обратная связь - 3.15.10.137 (0.008 с.) |