Ознайомлення з імунологічною лабораторією, обладнанням, матеріалами та правилами роботи у ній

 

При масових серологічних дослідженнях, виявлення титрів сироваток використовують обладнання, з допомогою якого можливо полегшити процедуру розведення сироваток, внесення компонентів реакції: автоматичні піпетки, апарат Флоринського, мікротитратор «Такачі».

А п а р а т Ф л о р и н с ь к о г о: завдяки груповій автоматичній піпетці одночасно розводять 10 сироваток крові або вносять компоненти в 10 стандартних серологічних пробірок, розміщених в 100-гніздовому штативі (10×10).

 

 

М і к р о т и т р а т о р «Т а к а ч і» включає в себе полістеролові пластини (129*93мм) з лунками, металеві петлі – пристосування для взяття та розведення сироваток в об’ємі 0,025 та 0,05 мл, скляні піпетки крапельниці для розливу передбачених умовами досліду розчинника. При допомозі скляних піпеток, на які надіта крапельна насадка у вигляді пластмасового конусу з сталевою трубочкою усередині, розливають по лункам пластини ізотонічний розчин в об’ємі 0,025 мл (одна крапля) або 0,05 мл (дві краплі). Краплі певного об’єму формуються при умові, що піпетку тримають суворо вертикально на відстані 1 см від пластини. З допомогою металевих петель беруть необхідну кількість сироватки крові. Петлі представляють собою тонкі металеві стержні з накінечниками напівсферичної форми, що складаються з пластинок з вертикальними прорізями. Головки петель з сироваткою поміщають у лунки першого ряду, обертають навколо осі, змішують сироватку з розчином, потім переносять розведену сироватку в слідуючий ряд лунок, забезпечуючи при цьому її розведення у два рази і т. д. На завершуючому етапі в лунки з допомогою крапельної піпетки вносять інші компоненти реакції. Ці пристрої можна застосовувати при постановці багатьох серологічних реакцій (РА, РЗК, РНГА та ін.).

 

Для внесення компонентів реакції в лунки планшетів усе частіше використовують 4-,8- та 12-канальні а в т о м а т и ч н і п і п е т к и з об’ємами, що можна змінювати.

П о с у д, який використовується при постановці серологічних реакцій, повинен бути чистим і сухим, стерильність не обов’язкова. Скляний посуд: аглютинаційні, преципітаційні, центрифужні пробірки, піпетки градуйовані (краще без шкідливого простору або піпеточний дозатор) і пастерівські, чашки Петрі, предметні скельця (миють і кип’ятять у дистильованій воді). Для їх обробки не слід використовувати дезінфекційні розчини, кислоти, луги. Скло повинно бути прозорим, без плям і подряпин. При постановці серологічних реакцій в пробірках слід підбирати їх так, щоб вони були однаковими за висотою і діаметром, мали однакову конфігурацію дна, однаковий колір скла.

Замість пробірок часто використовують полістеролові планшети багаторазового та одноразового використання. На кожному планшеті є лунки, розміщені у 8 рядів по 12 у кожному ряді. Лунки однакові за розмірами і конфігурацією дна. Їх використовують для постановки реакцій гемаглютинації, мікроаглютинації, імуноферментного аналізу.

І н с т р у м е н т и т а а п а р а т у р а: бактеріологічна петля, пінцет, штативи для пробірок, лупа, аглютиноскоп, термостат, холодильник, центрифуга.

Питання для самоконтролю:

1. Дати визначення «антиген» та «антитіло».

2. Роль антитіл у захисті організму.

3. На чому основані імунологічні механізми взаємодії антигенів та антитіл.

4. Фази серологічних реакцій.

5. Задачі імунологічних методів.

6. Мета застосування серологічних реакцій.