Основные методические указания

На практических занятиях в течение семестра студент изучает материал на микроскопических препаратах под непосредственным контролем преподавателя. Прежде чем приступить к изучению гистологических препаратов студент должен вспомнить и знать правила работы с микроскопом. Основные из них:

1. Поставить микроскоп в удобное для наблюдения положение.

2. Револьвер микроскопа должен быть замкнут на засечке слабого (8х) объектива.

3. Установить освещение при слабом объективе: для этого надо повернуть ручку освещенности в такое положение, чтобы все поле зрения микроскопа было освещено равномерно и достаточно интенсивно.

4. Положить препарат на предметный столик микроскопа так, чтобы объект находился над отверстием столика. Во избежание загрязнения препарата его надо брать двумя пальцами за грани.

5. Рассмотреть препарат при малом увеличении. Движением макровинта найти фокус, при котором препарат наиболее четко виден в поле зрения (расстояние между покровным стеклом препарата и линзой объектива при этом будет около 1 см). Передвигать препарат по столику только пальцами рук.

6. Не меняя положение тубуса, повернуть плавным движением револьвер на сильный (40х) объектив, проследив за замыканием засечки револьвера и рассмотреть препарат при этом увеличении. Студент должен помнить, что расстояние между оптикой объектива и покровным стеклом препарата составляет меньше половины миллиметра, поэтому очень легко неосторожным движением раздавить препарат и повредить объектив. При сильном увеличении необходимо пользоваться только микрометрическим винтом.

7. После окончания изучения данного препарата следует поднять тубус, перевести револьвер на слабое увеличение и только тогда снять препарат со столика микроскопа. Запрещается вытаскивать препарат из-под сильного объектива, этим можно повредить препарат и испортить объектив.

Изучение препаратов должно сопровождаться их обязательной зарисовской в альбом или тетрадь. Зарисовки необходимо выполнять простым или цветными карандашами. Каждый рисунок должен иметь название и обозначения. Надо помнить, что изготовление рисунка с препарата – не самоцель. Зарисовка дает возможность студенту лучше понять и запомнить препарат и обеспечивает более глубокое восприятие фактического материала.

В течение практических занятий студент обязан научиться на любом препарате определять изученные им эмбриологические структуры, знать их расположение, строение и функции. Эти знания проверяются на зачетном занятии, на котором студент, получив от преподавателя препарат без названия, должен его определить и разобраться во всех деталях его строения.

 

Практическое занятие по теме

«МОРФОЛОГИЯ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК»

Цель занятия: Познакомить студента с морфологическими особенностями женских и мужских половых клеток (яйцеклеток и сперматозоидов), показать их сходство и различия между собой, а также другими соматическими клетками организма.

Ход занятия:

Задание 1. Гомолецитальная яйцеклетка беззубки. Срез через яичник беззубки (анадонты)

При малом увеличении найдите группы крупных, окрашенных в розовый цвет округлых яйцеклеток с ядром и ядрышком. Изучая препарат при большом увеличении необходимо обратить внимание на то, что яйцеклетка покрыта прилегающей к цитоплазме тонкой оболочкой – цитолеммой и вторичной оболочкой, отделяющейся от яйцеклетки и образующей складки. В цитоплазме обнаружить зерна желтка розового цвета. Бледно окрашенное ядро расположено эксцентрично, его оболочка хорошо выражена. В ядре четко просматривается ядрышко.

Задание 2. Телолецитальная яйцеклетка лягушки. Срез через яичник лягушки

При малом увеличении в строме яичника увидеть яйцеклетки, находящиеся на разных стадиях роста. В начале роста яйцеклетка небольшого размера, с базофильной цитоплазмой и бледным ядром. К концу периода роста клетка крупных размеров (за счет отложения в ней большого количества желтка). Цитоплазма окрашивается в розовый цвет. В яйцеклетке обнаруживается крупное бледно окрашенное ядро и большое количество ядрышек. Снаружи яйцеклетка окружена слоем фолликулярных клеток овальной формы.

Задание 3. Изучение строения куриного яйца

Задание 4. Сперматозоиды морской свинки. Мазок спермы

При малом увеличении найти нитевидной формы бичевидные сперматозоиды. Нередко на препарате сперматозоиды склеиваются головками и, создается впечатление, что многие из них имеют несколько хвостиков. При большом увеличении рассмотреть части сперматозоида: головку, шейку, среднюю часть и хвостик. Головка имеет грушевидную форму, в ней большую часть занимает ядро. В передней части головки располагается акросома, имеющая форму темно окрашенного колпачка.

Задание 5. Сперматозоиды петуха. Мазок спермы

При малом увеличении найти участок, в котором сперматозоиды лежат по одиночке. При большом увеличении обнаружить части сперматозоида. Головка сперматозоида имеет несколько вытянутую и изогнутую головку. Сперматозоиды петуха отличаются от сперматозоидов морской свинки своими незначительными размерами, а также формой головки.

Практическое занятие по теме

«СТРОЕНИЕ ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗ И ГАМЕТОГЕНЕЗ»

Цель занятия: Познакомить студентов с особенностями строения половых желез (яичников и семенников) и развитием в них половых клеток.

Ход занятия:

Задание 1. Строение яичника кошки и развитие женских половых клеток

При малом увеличении микроскопа увидеть яичник, покрытый снаружи слоем кубических клеток. Под кубическим эпителием располагается плотная соединительная капсула – белочная оболочка. Периферическая часть яичника (под белочной оболочкой) представлена корковым веществом, а центральная - мозговым. В корковом веществе увидеть большое количество ооцитов, которые находятся на разных стадиях развития. Среди этих половых клеток найти: 1)первичный фолликулы, окруженные одним слоем плоских клеток; 2)фолликулы с кубическим эпителием; 3)вторичный фолликул с двумя слоями фолликулярных клеток; 4)третичный фолликул с образующейся полостью между фолликулярными клетками; 5)Граафов пузырек. В Граафовом пузырьке необходимо выделить: стенку, представленную зернистым слоем и соединительно-тканной оболочкой – текой; яйценосный бугорок; ооцит с оболочками; полость Граафова пузырька. Рассмотреть строение желтого тела.

При большом увеличении следует обратить внимание на строение ооцита. Цитоплазма ооцита обычно ячеистая, в центре которой находится ядро с хорошо выраженным ядрышком. В конце стадии первичного фолликула вокруг ооцита выделяется особая оболочка – оолема, окрашенная в оранжевый цвет.

Зарисовать яичник с половыми клетками, находящимися на разных стадиях развития.

Задание 2. Строение семенника и развитие мужских половых клеток. Поперечный разрез семенника крысы

При малом увеличении микроскопа найти серозную и соединительно-тканную оболочки, покрывающие снаружи семенник. В паренхиме семенника увидеть большое количество семенных канальцев, в стенках которых и осуществляется развитие мужских половых клеток (сперматозоидов). При сильном увеличении рассмотреть один из срезов стенки семенного канальца, обратив внимание на развивающиеся половые клетки – сперматогонии, сперматоциты 1 и 2 порядка, сперматиды, сперматозоиды. Особое внимание обратить на изменение формы и размеров клеток и их ядер в разные периоды сперматогенеза. В заключение следует познакомиться с клетками Сертоли.

Зарисовать часть стенки канальца с развивающимися мужскими половыми клетками.

Практическое занятие по теме

«РЕДУКЦИОННОЕ ДЕЛЕНИЕ И ОПЛОДОТВОРЕНИЕ»

Цель занятия: Познакомить студентов с морфологическими изменениями, наблюдаемыми в женской половой клетке при мейозе и оплодотворении.

Ход занятия:

Задание 1. Оплодотворение яйца лошадиной аскариды

При малом увеличении микроскопа найти округлой формы яйцо, окрашенное в синий цвет. Между яйцеклетками увидеть большое количество сперматозоидов клиновидной формы, часть которых проникает или проникла в яйцеклетку. При сильном увеличении в цитоплазме яйца рассмотреть проникшую мужскую половую клетку с маленьким ядром и ядро женской половой клетки. Следует помнить, что у аскариды сперматозоиды проникают в ядро до начала ее созревания.

Зарисовать отдельную яйцеклетку с проникшим в нее сперматозоидом.

Задание 2. Деления созревания в яйцах лошадиной аскариды

В полости яйцевода при малом увеличении микроскопа увидеть большое количество яиц, окруженных толстой оболочкой. Убедиться, что до первого деления созревания эта оболочка вплотную прилегает к яйцеклетке. При сильном увеличении найти яйцо с образовавшимся веретеном первого деления созревания. Обратить внимание на отделение первого полярного (направительного) тельца и начало образования перивителлинового пространства. После этого, передвигая препарат, найти и рассмотреть яйцо с образовавшимся веретеном второго деления созревания. Необходимо сосредоточить свое внимание на образовавшемся перивителлиновом пространстве и отделившимся втором полярном тельце. В результате второго деления созревания образуется зрелая яйцеклетка.

Зарисовать ооциты 1, 2 порядков и зрелую яйцеклетку с направительными тельцами и перивителлиновым пространством.

Задание 3.Синкарион у лошадиной аскариды (слияние пронуклеусов)

При слабом увеличении микроскопа в полости матки найти яйца, которые находятся на стадии слияния пронуклеусов. Рассматривая с большим увеличением зиготу с двумя пронуклеусами, следует помнить, что один пронуклеус представлен женским ядром, другой – ядром сперматозоида (после завершения периода созревания пронуклеусы имеют строение обычных интерфазных ядер). Обратить внимание на перивителлиновое пространство и оболочку зиготы. Найти и рассмотреть первое направительное тельце, прижатое к внутренней поверхности оболочки, а также второе направительное тельце, расположенное на поверхности зиготы. Зарисовать зиготу в состоянии синкариона.

Задание 4. Дробление зиготы аскариды

При слабом увеличении микроскопа найти на срезе зиготу на стадии метафазы. На этой стадии хромосомы располагаются по экватору. Следует помнить, что если зигота разрезана по экватору, образуется фигура материнской звезды, а если меридионально, то получается фигура экваториальной пластинки. На полюсах видны центриоли, окруженные лучистой сферой. Между центриолями протягиваются нити центрального веретена. Передвигая препарат, найти зиготу на стадии анафазы. Убедиться, что на этой стадии хромосомы начинают отходить в направлении центриолей. В начальной телофазе увидеть появление перетяжки клетки.

Зарисовать зиготу на стадии метафазы, анафазы и телофазы, обозначив выше указанные структуры.